皂质芦荟细胞悬浮培养初探

试验初步研究了皂质芦荟细胞悬浮培养过程。比较了不同基本培养基、接种量对悬浮培养过程中细胞生长量的影响。采用正交设计方法,对影响皂质芦荟悬浮细胞生长的因素进行了优化研究。初步探讨了皂质芦荟在细胞生长周期里生理生化特性。结果表明:B5培养基有利于细胞的增殖;每50 mL培养液中加入2 g愈伤组织的接种量为宜;筛选出最适激素组合为2,4-D 3.0 mg/L+KT 0.5 mg/L,葡萄糖25 g/L pH值5.8;皂质芦荟悬浮培养的生长周期为25 d,细胞增值率曲线呈S型;在悬浮细胞生长前期,pH值明显下降,在细胞对数生长期,pH值略有升高,并趋于平缓;总酚含量、POD、SOD均出现2个峰值,但出现时间不同,其变化趋势与细胞生长趋势呈正相关,PPO活性与细胞生长趋势呈负相关。

降低皂质芦荟诱导愈伤组织褐化的初步研究

对降低皂质芦荟诱导愈伤组织褐化情况的研究表明,外植体接种前进行预处理对控制诱导愈伤组织的褐化有一定的帮助。其中,以在PVP(2 g/L)溶液中浸泡15 m in的效果最为显著;暗培养能显著减轻褐化的发生,有利于愈伤组织的生长;培养基中附加抗氧化剂和吸附剂对愈伤组织的褐化有不同的作用效果,抗氧化剂要优于吸附剂。以收获愈伤鲜重为基础,考察其抗褐化能力为:L-谷氨酰胺(5 mg/L)>AgNO3(15 mg/L)>Vc(2 mg/L)>PVP(0.5 mg/L)>柠檬酸(5 mg/L)>Na2S2O3(10 mg/L)>空白>活性炭(10 mg/L)。

皂质芦荟诱导愈伤组织影响因素的初步研究

文章探讨外植体种类、基本培养基类型以及外源激素配比3方面对皂质芦荟诱导愈伤组织的影响,并对其愈伤组织生长增殖进行了实验研究。结果表明,皂质芦荟根段是诱导愈伤组织较适宜的外植体;在MS培养基上诱导的愈伤组织在出愈率和增殖上都好于B5、ER。对6-BA、NAA、2,4-D进行L9(3)3正交试验设计,分析可知,激素对诱导愈伤组织无显著差异;观察愈伤组织生长状况,综合因素认为6-BA3.0mg.L-1+2,4-D3.0mg.L-1+NAA2.0mg.L-1的激素组合诱导效果最佳,愈伤组织收获鲜重最高,达5.661g。在愈伤组织增殖过程中,添加水解乳蛋白的增殖效果比氨基苯甲酸明显,以6-BA3.0mg.L-1+2,4-D3.0mg.L-1+NAA2.0mg.L-1+水解乳蛋白100mg.L-1+对氨基苯甲酸100mg.L-1组合的愈伤组织增殖率最高,达5.86。愈伤组织生长周期为35d,15d开始进行对数生长期,最大生物量达6.62g。