白念珠菌酵母相细胞长片段基因表达系列分析文库的构建和初步分析

目的构建白念珠菌酵母相细胞长片段基因表达系列分析文库并探讨其基因表达特点。方法采用长片段基因表达系列分析技术(LongSAGE)构建白念珠菌酵母相细胞LongSAGE文库,并从中挑取1000个阳性克隆进行测序。结果成功构建了白念珠菌酵母相细胞LongSAGE文库。1000个测序文件中,共获得标签17773个,代表单一转录本7333种,其中单一匹配标签占16·65%,多重匹配标签占6·59%,推测蛋白标签占16·27%,基因组及粘粒等标签占1·64%,新标签为58·86%。标签拷贝数超过35的33个高表达标签中有11个可能属于新的表达序列。结论LongSAGE是一种能够快速、高通量地研究细胞基因表达谱及其丰度的方法,可发现新的表达序列。

菌丝相白假丝酵母菌长片段基因表达系列分析文库的构建及结果分析

目的构建菌丝相白假丝酵母菌长片段基因表达系列分析文库并探讨其基因表达特点。方法采用长片段基因表达系列分析技术(LongSAGE)构建菌丝相白假丝酵母菌LongSAGE文库,从文库中挑取阳性克隆测序,用SAGEs-oftware对测序结果进行分析和检索,从而了解菌丝相白假丝酵母菌基因表达情况。结果在菌丝相白假丝酵母菌的1 000个测序文件中,共获得标签17 552个,代表单一转录本6 627种,其中单一匹配标签占20.5%,多重匹配标签占6.64%,假设蛋白标签为18.47%,新标签为53.07%。标签拷贝数超过35拷贝的36个高表达标签中有15个可能属于新的表达序列。结论用LongSAGE技术获得了菌丝相白假丝酵母菌基因表达谱及其丰度的量化信息,可以发现新的表达序列,为进一步研究提供了基础。

根癌农杆菌介导的烟曲霉几丁质合成酶chsC基因缺失突变体的构建

目的利用根癌农杆菌介导的基因转化定点插入突变几丁质合成酶chsC基因,实现基因失活而构建几丁质合成酶chsC基因缺失烟曲霉突变体。方法构建根癌农杆菌二元载体pDHt/SK,利用根癌农杆菌介导的转化插入突变烟曲霉几丁质合成酶chsC基因,用潮霉素抗性基因筛选转化子,并进行实时定量逆转录聚合酶链反应(RT-PCR)鉴定。结果潮霉素抗性基因通过同源重组成功插入烟曲霉基因组中;经RT-PCR鉴定,烟曲霉几丁质合成酶基因chsC表达失活。结论利用根癌农杆菌介导的基因转化可以定点插入突变并失活目的基因,此方法有可能成为烟曲霉基因转化和功能基因组研究的有力工具。

运用3′RACE验证LongSAGE文库构建后白念珠菌不同菌相的差异表达基因

目的 鉴定从LongSAGE文库筛选到的白念珠菌不同菌相表达基因差异表达标签JMD8和JSW10所代表基因。方法 诱导白念珠菌菌丝相的表达后,运用3′RACE技术扩增白念珠菌差异表达基因标签基因片段,纯化回收后,T/A连接,经氯化钙法转化大肠杆菌,X gal/IPTG诱导表达,在阳性菌株中抽提质粒后酶切、测序。结果 两个片段均能在GenBank中找到同源序列,Score值小于40 ,Evalue小于0 5。结论 鉴定了白念珠菌LongSAGE标签JMD8和JSW 10代表的基因分别为EFT2和SHMII。

不同剂量和疗程伐昔洛韦治疗带状疱疹的多中心随机双盲对照研究

目的:比较不同剂量和疗程伐昔洛韦治疗带状疱疹的疗效和安全性。方法:选择带状疱疹患者为研究对象,采用多中心、随机、双盲、对照的临床试验。试验组患者采用伐昔洛韦1000mg每日3次口服,共服7d;对照组患者采用伐昔洛韦300mg每日2次口服,共服10d。用药后第3、6和10天观察疗效和不良反应。结果:共入组128例,全分析集(FAS)分析128例,符合方案集(PPS)分析118例。治疗后第3、6和10天,试验组和对照组患者的症状、体征积分下降值及有效率比较差异无统计学意义(P>0.05);疼痛视觉模拟评分法(visnal analogue scale,VAS)值比较,两组间差异无统计学意义(P>0.05),但入组时疼痛VAS值≥8的患者,FAS集分析显示,在治疗后第6、10天VAS值下降两组均存在统计学差异(P<0.05);PPS集分析显示治疗后第10天VAS值下降,两组间存在统计学差异(P<0.05)。试验组和对照组不良反应发生率分别为17.18%和12.50%,主要为嗜睡和恶心。结论:增加伐昔洛韦用量治疗带状疱疹安全、有效,与较低剂量伐昔洛韦组相比,对疼痛程度较严重的患者能更显著地减轻疼痛。

白念珠菌菌丝的诱导培养

目的 探讨培养条件对白念珠菌菌丝形成的影响。方法 改变培养基成分、pH值及培养温度 ,诱导白念珠菌芽管 (早期菌丝相 )的形成。结果 M199、164 0培养在pH 7.0、3 7℃振荡培养时可诱导白念珠菌生长为纯的菌丝。

63例麻风临床分析

目的 探讨临床工作中麻风诊断时应注意的问题。方法 对 63例麻风进行临床资料分析。结果及结论 63例麻风患者瘤型麻风 35例 ,为麻风主要临床表现型 ,麻风样反应 3例 ,易引起误诊、误治 ;合川 2 6例 ,为重庆市主要发病地区 ;城镇患者 1 5例 ,并不少见 ;由于麻风是一个社会的公共卫生问题 。

先天性巨痣合并白癜风1例

患者男,34岁。因背部黑色斑块30余年、黑色斑块内及腹部等部位出现白斑2年余就诊。皮肤科检查可见腰背部大片状黑色斑块,上有黑色毛发;腹部及黑色斑块内外均可见大小不一的色素脱失斑,白斑区组织病理检查示黑素细胞缺失。

多变根毛霉致面部皮肤毛霉病1例

报道1例由多变根毛霉引起的面部皮肤毛霉病。患者男,65岁,面部结节斑块伴痒半年余。皮损组织病理检查示真皮中下层有炎细胞及多核巨细胞浸润,并见粗大较短的无隔菌丝。经真菌培养和分子生物学鉴定,菌种鉴定为多变根毛霉。皮损经短时两性霉素B治疗后好转。

甄氏外瓶霉致暗色丝孢霉病

报告1例甄氏外瓶霉感染所致的暗色丝孢霉病。患者男,59岁。右小腿外踝上方肿块伴瘙痒5个月,皮损为一直径约3 cm的暗红色斑块。皮损组织病理PAS染色见分隔菌丝,组织块马铃薯葡萄糖琼脂(PDA)培养基上25℃培养长出黑色酵母样菌落,分离菌株最高生长温度37℃,小培养下见分枝分隔菌丝,环痕产孢,分生孢子聚集在环痕梗顶端,分离菌株ITS1区测序结果与甄氏外瓶霉98.54%同源。根据分离菌株生物学特点,菌株被确定为甄氏外瓶霉。

卡氏枝孢霉致着色芽生菌病1例

着色芽生菌病（chromomycosis）是由一组暗色真菌引起的皮肤及皮下组织慢性肉芽肿性疾病，病程慢性，皮损一般局限，也有逐步扩展的，少数可经血液播散，侵入内脏器官，危及生命。现将我科诊断的1例由卡氏枝孢霉引起的着色芽生菌病报告如下。

医学真菌学教学体会

真菌感染逐渐成为院内感染之一,应引起临床各科医师的重视。由于医学生对真菌的认识往往是从皮肤性病学的教学过程中获得,因此应高度重视医学真菌学的教学。本文对医学真菌学教学中应注意的问题进行了分析和总结。

艾滋病离中老年并不遥远

艾滋病，全名“获得性免疫缺陷综合征”（AIDS），是由人类免疫缺陷病毒（HIV）引起的一种免疫缺陷性疾病。当人体免疫系统被HIV病毒破坏后，由于抵抗能力过低，导致感染，最终引起死亡。

真菌形态转变及致病性相关的信号传导

双相型真菌形态转变是致病的重要基础。研究表明,形态转变由各种信号传导决定,主要由cAMP和有丝分裂原激活的蛋白激酶(MAPK)双向控制。感染过程中,致病真菌通过改变信号传导途径控制形态变化和致病性,故信号传导途径已成为新的抗真菌药潜在的作用靶位。

足癣趾间的微生态学调查

足癣是皮肤科的一个常见病和多发病,临床上对足癣的治疗常有一定困难,不少患者尽管使用各种治癣药物,效果仍不理想。随着微生态学研究的进展,已发现肠道菌群异常可引起胃肠道功能失调和炎症。

白假丝酵母天冬氨酸蛋白酶研究进展

白假丝酵母是免疫功能低下宿主条件致病感染中最常见的病原真菌之一,目前基本已肯定分泌型天冬氨酸蛋白酶(Sap)在其致病过程中具有重要作用.现将近年来有关白假丝酵母Sap的研究从其编码基因、分子特性和表达以及在白假丝酵母致病中的作用等作一综述.

斑秃患者生活质量评估及皮肤病生活质量指数的信度分析及因子分析

目的：探讨斑秃（AA）对患者生活质量的影响,分析皮肤病生活质量指数（DLQI）在评估患者生活质量时的信度及因子结构。方法：采用DLQI量表评估AA患者的生活质量,并用信度分析及因子分析评估DLQI的信度及因子结构。结果：共调查了168例AA患者,DLQI得分为0-26分,平均为（6.82±5.85）分。DLQI评分与患者的病程、脱发面积、斑秃类型、拉发试验、甲改变及应激事件等6个因素有关。DLQI量表信度分析显示,整体量表的Cronbach系数α=0.876（〉0.7）,删除问题l,α达最大值0.886。因子分析显示,DLQI量表用于测评AA时,特征值〉1的因子有2个,累计贡献率达59.58%。结论：AA对患者的生活质量有中等程度的影响。DLQI可以用来评估AA患者的生活质量,且具有较好的信度和效度。