有氧运动与黑枸黄酮干预酒精性肝损伤模型小鼠炎性因子的变化

背景:目前,针对酒精性肝损伤的治疗仍未得以较好的解决,研究发现黑果枸杞提取物在免疫调节,降血脂、血糖,抗氧化,心血管疾病的预防及治疗,肿瘤治疗等方面具有较广的应用价值。目的:验证有氧运动联合黑果枸杞黄酮对酒精性肝损伤的干预效果并分享抗炎性的损伤机制。方法:40只健康雄性昆明(KM)小鼠构建酒精性肝损伤模型,随机分为模型组、黑枸黄酮组、有氧运动组和有氧运动联合黑枸黄酮组。各干预组于建模成功后第1天开始进行有氧运动和黑枸黄酮灌胃干预。6周干预后,小鼠禁食过夜,随后分离出肝组织。苏木精-伊红染色、组织病理评分;生物化学分析法检测血清谷丙转氨酶、谷草转氨酶和总胆红素含量;实时荧光定量(Realtime-PCR)技术检测肝组织和血液中肿瘤坏死因子α、核转录因子κB、白细胞介素6及白细胞介素10 mRNA表达水平。结果与结论:(1)苏木精-伊红染色和组织病理变化:模型小鼠肝索结构排列紊乱、小叶结构损坏严重、胞质疏松内充满大小不一的脂肪空泡并伴有炎性细胞浸润;有氧运动组、黑枸黄酮组的小鼠肝组织破坏有不同程度的改善(P<0.05);有氧运动联合黑枸黄酮组小鼠肝细胞坏死和脂肪蓄积得以改善,炎细胞浸润明显减少(P<0.01);(2)血液生化:有氧运动联合黑枸黄酮组谷丙转氨酶、谷草转氨酶、总胆红素水平较模型组显著降低(P <0.01),有氧运动组谷丙转氨酶、谷草转氨酶、总胆红素水平也有所下降(P <0.05);(3)Real-timePCR检测结果:3个干预组炎性细胞因子肿瘤坏死因子α、核转录因子κB及白细胞介素6在肝组织和血液中表达均明显低于模型组(P <0.05),其中有氧运动联合黑枸黄酮组各炎性细胞因子的表达水平最低(P <0.01);干预组白细胞介素10表达显著高于模型组;并且肿瘤坏死因子α、核转录因子κB、白细胞介素6和白细胞介素10在肝组织和血液中的表达呈正相关;(4)结果说明,有氧运动、黑枸黄酮能有效降低炎性细胞因子的表达。作为一种微创性早期检测手段,推测以血浆中炎性因子的循环RNA检测可以作为酒精性肝损伤筛查诊断、观察及预后监测中一个重要标志物。

虎纹克胰素与运动干预对阻塞性黄疸肝细胞损伤修复机制的研究

阻塞性黄疸是一种临床常见的肝胆疾病,目前可通过外科手术解除阻塞,但已造成的肝损伤很难修复。虎纹克胰素(huwentoxin-XI,HWTX-XI)是一种具有高效胰蛋白酶抑制活性的多肽,其对肝损伤的保护作用尚未进行实验性研究。有报道称,有氧运动能减轻炎症以及促进肝再生和修复。为了探讨HWTX-XI给药配合有氧运动对阻塞性黄疸引起的小鼠肝损伤的拮抗作用,采用胆总管悬挂于腹壁的造模,分别以跑台和尾静脉输注HWTX-XI为干预手段,使用HE染色观察阻塞性黄疸小鼠肝组织形态结构变化,应用RT-PCR和免疫组化技术检测相关炎性细胞因子的基因和蛋白质表达水平。结果显示,HWTX-XI给药配合有氧运动有利于胆管阻塞的小鼠肝损伤的修复,而且这种影响的机制可能与NF-κB通道因子的表达下调有关。同时,HWTX-XI与有氧运动的结合干预对以上模型的干预效果较二者单因素干预的效果更佳。

NF-κB信号通路在小鼠阻塞性黄疸及运动与黑果枸杞多糖干预中的差异表达

目的:探讨NF-κB信号通路在小鼠阻塞性黄疸致肝损伤的机理及阐述运动联合黑果枸杞多糖改善肝损伤的效果。方法:KM小鼠随机分为5组:假手术组、模型组、枸杞组、运动组、枸杞+运动组。应用HE染色、免疫组化法、Realtime-PCR技术对肝组织进行检测。结果:1)HE染色显示,假手术组肝细胞索排列整齐;模型组大鼠肝细胞纤维化,可见片状肝细胞变性、坏死,乃至肝细胞索结构紊乱;枸杞组、运动组可见肝细胞少量点、片状坏死,肝小叶结构改变,肝索排列欠整齐;枸杞+运动组无明显组织坏死,肝小叶结构基本正常,肝索排列较整齐。免疫组织化学染色结果显示,枸杞+运动组小鼠肝组织NF-KB P65、TNF-α阳性表达均显著低于模型组。Real-time PCR结果显示,与模型组比较,枸杞+运动组小鼠血清NF-k B、TNF-α、TGF-β、IL-6 m RNA表达降低。结论:运动联合黑果枸杞多糖能改善肝损伤小鼠的免疫功能,对阻塞性黄疸小鼠的肝细胞具有修复作用。

有氧运动和黑果枸杞多糖对慢性脑缺血小鼠的干预及Notch通路相关因子的组织差异表达

目的观察有氧运动(SW)与黑果枸杞多糖(LRM)对慢性脑缺血小鼠的干预作用以及Notch通路相关因子在脑和血液组织差异表达的比较分析。方法 50只雄性KM小鼠,构建慢性脑缺血损伤模型,随机分为模型组(M组)、干预组[包括SW组、LRM组、LRM+SW组、阳性对照组(BLDJ组)],干预组分别进行中等强度有氧运动和/或黑果枸杞多糖(200 mg/kg)灌胃。设假手术组(SO组,10只)。各组进行神经行为学评估;Nissl染色进行脑组织显微结构形态学观察;免疫组化检测相关因子的蛋白表达水平;实时荧光定量技术检测脑组织和血液中Notch通路相关因子的表达。结果脑组织损伤得分M>SW>LRM>BLDJ>LRM+SW>SO(P<0.05)。M组脑组织神经元结构出现大面积损伤,LRM+SW组干预效果最佳(P<0.01)。SO组小鼠脑Notch1、Jagged1、NCX1、SYP阳性表达最高,干预组阳性表达均高于M组(P<0.01,P<0.05);LRM+SW组阳性表达较LRM组合BLDJ组高(P<0.01)。干预组调节神经细胞修复相关因子在组织和血液中的表达明显高于M组(P<0.01),其中LRM+SW组表达水平最高。Notch1、Jagged1、NCX1在组织和血液中的表达呈正相关,且在组织中的表达含量高于血液中的表达(P<0.05)。结论有氧运动与黑果枸杞多糖对小鼠慢性脑缺血引发的脑损伤有明显缓解作用,能不同程度促进神经元修复,且两者联合效果更为显著,其作用可能是通过调节Nocth通路中相关神经修复因子的表达,从而抑制脑损伤。

有氧运动对慢性脑缺血小鼠的PI3K/Akt信号通路的影响

目的：探讨有氧运动对慢性脑缺血小鼠干预效果及PI3K/Akt信号通路的影响。方法：参考Yoshizaki建立的小鼠慢性脑缺血模型,选择KM小鼠为实验动物,构建小鼠慢性脑缺血模型;应用神经行为学分析、尼氏染色、免疫组化实验技术,比较有氧运动对该模型的干预效果,探讨其神经保护作用的机制;建模成功后,将小鼠随机四组：SO组、M组、SW组、TM组。SW组：术后3~4天适应性游泳30分钟,继后每天递增10分钟,逐渐延长至60分钟,持续6周,每周休息1天。TM组：术后第1周进行3次适应性跑台训练,每次60分钟,每周6次,持续6周。结论：两种有氧运动均能对本模型的脑细胞发挥抗损伤作用,且其干预效果TM组优于SW组;两种有氧运动可能均通过调节PI3K/Akt信号通路的表达,达到抑制细胞凋亡,发挥其抗脑组织伤害的作用。

基于Illumina测序的运动拮抗OJ致肝损伤炎性差异表达基因分析

本研究采用Illumina高通量测序技术对运动干预阻塞性黄疸致肝损伤模型小鼠的血液和肝组织进行测序,并验证运动在干预血液和肝组织炎症相关的因子差异表达的作用。本研究用雄性健康昆明种小鼠30只,随机分成假手术组、模型组和运动组,采用腹壁悬挂胆总管方法进行阻塞性黄疸致肝损伤造模。造模成功炎性期后,对运动组小鼠采取中等强度的跑台运动进行训练。对小鼠的血液和肝组织分别进行Illumina高通量测序,并对炎性相关差异表达因子进行相关性分析。结果显示,运动能有效地干预阻塞性黄疸致肝损伤所诱发的炎性反应,使炎症相关因子差异表达显著下降,与炎症和免疫相关的信号通路的富集表现显著降低。运动干预小鼠的血液和肝组织中差异表达显著的炎性相关的因子主要富集在NF-κB、TGF-β、TNF等信号通路的相关因子,其相关分子功能主要涉及到细胞信号转导、抑制细胞凋亡、免疫反应等。从KEGG富集的信号通路来看,小鼠血液和肝组织中的差异性显著富集通路也主要集中于NF-κB、TGF-β、TNF炎性相关的信号通路。且各炎性因子及炎性信号通路的差异表达在小鼠血液和肝组织内呈现相同趋势。结果表明中等强度的有氧运动能对阻塞性黄疸致肝损伤起到有效的抗炎效果,其表现在相关的炎性因子表达显著下降,且炎性信号通路的表达也显著降低,同时,各炎性因子和炎性信号通路的富集与差异表达呈现相同趋势。本研究为临床上采用有氧运动干预阻塞性黄疸致肝损伤患者的效果评定及其靶标因子筛选等提供实验基础。