光周期对九香虫卵及若虫历期的影响

九香虫Aspongopus chinensis Dallas,1851是中国传统药食两用资源昆虫,野生资源难以满足日益增长的社会需求。为了探索光周期对九香虫卵期及若虫历期的影响,本研究以实验室内养殖的子一代九香虫为研究对象,研究了不同光周期(L∶D=20 h∶4 h、18 h∶6 h、16 h∶8 h、14 h∶10 h、12 h∶12 h、10 h∶14 h)对其卵期及若虫历期的影响。结果显示,九香虫卵期和1~2龄若虫发育历期在不同光照时长下无明显差异;而在长光照(L:D≥16 h)条件下3~5龄若虫发育历期和总发育历期显著缩短。由上可知,适当提高九香虫高龄若虫期光照时长可以缩短其若虫的生长发育历期。本研究为未来九香虫的人工大规模养殖扩繁提供了理论基础和参考依据。

九香虫保幼激素环氧水解酶基因克隆、生物信息学及表达分析

【目的】保幼激素环氧水解酶(Juvenile hormone epoxide hydrolase,JHEH)是昆虫体内保幼激素(Juvenile hormone,JH)的主要降解酶。本文旨在分析九香虫Aspongopus chinensis Dallas保幼激素环氧水解酶基因序列(AcJHEH)信息,探索其在九香虫生长发育过程中的作用。【方法】以九香虫成虫的cDNA为模板,采用RT-PCR技术克隆获得AcJHEH基因序列,并利用生物信息学软件对其编码蛋白的理化特性、结构特征和系统进化进行分析;采用qRT-PCR技术检测并分析九香虫不同龄期和不同组织中AcJHEH的相对表达量。【结果】成功获得了AcJHEH的完整开放阅读框ORF序列,全长均为1363 bp,共编码453个氨基酸,预测分子量为51.74 ku,等电点(pI)为7.66,分子蛋白式C2414H3683N581O653S14,含有N-端跨膜基序XWG、催化三联体、保守基序HGWP和2个酪氨酸,属于环氧水解酶家族。系统进化树分析表明,AcJHEH与茶翅蝽Halyomorpha halys的JHEH聚为一支,再与同为半翅目的臭虫Cimex lectulariu和绿盲蝽Apolygus lucorum的JHEH聚为一类。荧光定量PCR结果显示,AcJHEH在九香虫不同发育阶段和各组织中均有表达,且脂肪中的表达量极显著高于其它组织(P<0.001);滞育九香虫成虫表达量最高,其次为4-5龄若虫都极显著高于其它发育阶段(P<0.001)。【结论】九香虫JHEH属于环氧水解酶家族,确定为保幼激素环氧水解酶。依据qPCR结果推测AcJHEH通过改变九香虫体内保幼激素浓度来影响九香虫4-5龄若虫蜕皮发育、成虫生殖系统发育和滞育等。

九香虫滞育期脂肪、糖类和蛋白质含量的变化规律

【目的】 研究九香虫Aspongopus chinensis Dallas滞育期体内的脂肪、糖类(总糖、糖原、海藻糖)、蛋白质含量的变化,探索体内营养物质变化与九香虫滞育的关系。【方法】 本研究利用索氏提取法、蒽酮比色法和BCA蛋白定量试剂盒分别测定了九香虫滞育期(10月-次年4月)和滞育解除后(次年5月)其体内的脂肪、糖类和蛋白质含量变化。【结果】 九香虫滞育期脂肪含量随着时间推移逐渐降低,到滞育后期(4月)脂肪含量最低为19.51%,与滞育初期(10月)的40.55%相比存在显著性差异(P<0.05);糖类在滞育初期(10月)开始积累,直至11月后不断减少至4月,滞育解除后(5月)糖类的含量又显著增高(P<0.05);蛋白质含量从滞育初期(10月)开始缓慢增加,直至3月开始下降,滞育解除后蛋白质含量显著低于滞育期(P<0.05)。【结论】 九香虫滞育期体内脂肪、糖类和蛋白都发生了不同程度的变化。脂肪含量降低,糖类的含量先升后降,蛋白质含量先增后减是九香虫滞育过程中主要的生理特征。