LRRC1通过DLG1/YAP信号通路促进肝癌细胞增殖的研究

目的研究富含亮氨酸的重复序列蛋白1(LRRC1)通过巨盘状蛋白1(DLG1)/Yes相关蛋白(YAP)信号通路调节肝癌细胞增殖的机制。方法在原发性肝细胞癌患者的癌灶组织及配对癌旁组织中,检测LRRC1的表达水平。使用小干扰RNA(siRNA)抑制HepG2及Huh7中LRRC1的表达后,检测细胞增殖能力及YAP、细胞周期蛋白D1(Cyclin D1)和细胞周期蛋白依赖性激酶4(CDK4)表达水平。通过共聚焦显微镜,定位HepG2细胞中LRRC1与DLG1分布。结果肝细胞癌患者癌灶中LRRC1表达量较癌旁组织升高。siRNA抑制HepG2及Huh7细胞中LRRC1基因表达后,细胞增殖能力受到抑制,YAP、Cyclin D1及CDK4表达水平下降。镜下发现HepG2细胞中LRRC1与DLG1均主要分布于细胞膜内侧面,两者分布位置高度重叠。结论LRRC1通过DLG1/YAP信号通路调控细胞周期,促进肝癌细胞增殖。

PTTG1在D-GalN/TNF-α所致LO2肝细胞损伤中的变化及对细胞凋亡的影响

目的探讨垂体肿瘤转化基因1(PTTG1)在D-半乳糖胺(D-GalN)/TNF-α所致LO2肝细胞损伤中的变化,以及对细胞凋亡的影响和机制.方法通过蛋白免疫印迹法和免疫组织化学检测D-GalN/TNF-α作用前后LO2肝细胞中PTTG1的表达情况,使用PTTG1 shRNA慢病毒建立PTTG1干扰的LO2肝细胞稳转株,并通过蛋白免疫印迹法和RT-PCR检测细胞凋亡相关蛋白cleaved Caspase-3和内质网应激通路相关基因糖调节蛋白(GRP 78)、CCAAT/增强子结合蛋白同源蛋白(CHOP)的表达.结果D-GalN/TNF-α作用于LO2肝细胞0.5 h后PTTG1蛋白表达开始逐渐增加,1 h至24 h后PTTG1蛋白表达均高于未处理组(P均<0.05);与未处理组相比,D-GalN/TNF-α作用6 h后的LO2肝细胞免疫组织化学PTTG1阳性细胞数增加(P均<0.05).与阴性对照组相比,PTTG1稳定干扰的LO2肝细胞中的cleaved Caspase-3及GRP 78、CHOP表达增加(P<0.05).结论PTTG1在D-GalN/TNF-α所致的LO2肝细胞损伤中表达增加,且干扰PTTG1的表达可促进LO2肝细胞凋亡并激活GRP 78/CHOP内质网应激通路.

累及胰腺并以急性胰腺炎为表现的结外鼻型NK/T细胞淋巴瘤一例报道及文献复习

目的侵及胰腺的NK/T细胞淋巴瘤极为罕见,临床表现无特异性,容易被临床医生误诊或漏诊。该文拟提高对以急性胰腺炎为表现的结外鼻型NK/T细胞淋巴瘤的临床表现及诊治要点的认识。方法报道以急性胰腺炎为表现的结外鼻型NK/T细胞淋巴瘤1例,并以"NK/T Cell"及"Pancreas"、或"NK/T细胞"及"胰腺"等为检索词在Pubmed数据库、中国期刊全文数据库(CNKI)、万方数据知识服务平台检索相关文献,收集资料完整的侵及胰腺的NK/T细胞淋巴瘤的病例,分析其临床特点、治疗方案及预后情况等。结果该例为38岁男性患者,因上腹痛及血清淀粉酶、脂肪酶升高收入我科。腹部MRI提示胰体部囊实性病变,行超声引导下胰腺穿刺提示恶性肿瘤细胞,倾向于NK/T淋巴瘤细胞。通过鼻咽部肿物的穿刺活检,最终确诊为结外鼻型NK/T细胞淋巴瘤。患者先后进行8个疗程化学治疗及2次放射治疗,胰腺病灶在6个疗程化学治疗后完全消失,鼻咽部病灶在6个疗程化学治疗后明显缩小,8个疗程化学治疗后几乎消失。检索文献后共收集国内外8例侵及胰腺的NK/T细胞淋巴瘤患者的资料,其中5例诊断为结外鼻型NK/T细胞淋巴瘤,3例原发于胰腺。共有7例有明确的随访资料,仅1例获得完全缓解,其余在诊断后8个月内死亡。结论NK/T细胞淋巴瘤尽管罕见,临床医生应意识到其可作为急性胰腺炎的发病原因之一,影像学检查可发现病灶,确诊需依靠病理和免疫组织化学检测。治疗以化学治疗为主,辅以放射治疗。

GSK2606414对酒精联合棕榈酸诱导AML12细胞凋亡的影响

目的探究内质网应激抑制剂GSK2606414在预防酒精联合棕榈酸诱导的AML12细胞凋亡的作用及机制。方法选取C57BL/6雌性小鼠10只,随机分为对照组(n=5)及模型组(n=5)。采用Lieber-DeCarli液体饮食诱导小鼠酒精性脂肪肝模型。免疫组织化学法、蛋白免疫印迹法及实时定量PCR法检测内质网应激相关蛋白活化转录因子4(ATF4)和CCAAT/增强子结合蛋白同源蛋白(CHOP)的表达水平。使用酒精加棕榈酸处理AML12鼠正常肝细胞24 h后检测ATF4及CHOP的改变情况。利用GSK2606414抑制剂预处理AML12细胞,随后使用酒精加棕榈酸处理,蛋白免疫印迹法检测ATF4及CHOP的表达,TUNEL法检测细胞凋亡情况。结果血清ALT、AST水平及病理结果均证实酒精性脂肪肝小鼠模型建立成功,模型组ATF4和CHOP蛋白的表达高于对照组(P均<0.001)。酒精加棕榈酸刺激AML12肝细胞后ATF4和CHOP的蛋白表达水平升高(P均<0.001)。使用GSK2606414抑制剂预处理AML12细胞与未预处理组相比,ATF4和CHOP的蛋白表达受到抑制(P均<0.05),细胞凋亡减少。结论 GSK2606414抑制剂可改善酒精联合棕榈酸诱导的AML12细胞凋亡,其机制可能与其能抑制内质网应激有关。

垂体肿瘤转化基因1在肝细胞癌患者中的表达及意义

目的探讨垂体肿瘤转化基因(PTTG)1在肝细胞癌(肝癌)患者肝组织中的表达及意义。方法收集中山大学附属第三医院2011年7月至2016年12月确诊的60例肝癌肝切除病理组织标本和2016年6月至12月行肝癌肝切除的15例新鲜肝癌及癌旁组织标本。患者均签署知情同意书,符合医学伦理学规定。以同期因肝血管瘤行肝叶切除的远离血管瘤正常肝组织24例作为正常对照组。免疫组化法、Western blot、RT-PCR染色检测肝癌组织PTTG1表达。PTTG1表达与临床参数的相关性研究采用t检验、Mann-Whitney检验、Kruskal-Wallis检验。率的比较采用χ~2检验或Fisher确切概率法。结果免疫组化检测显示肝癌和癌旁组织的PTTG1阳性率分别为65%(5%,80%)、3%(2%,6%),明显高于正常对照组织的2%(1%,2%)(Z=6.644,3.876;P<0.05)。Western blot检测显示肝癌组织和癌旁组织的PTTG1相对表达量分别为0.88(0.80,1.78)、0.83(0.53,1.27),明显高于正常对照组织的0.36(0.20,0.62)(Z=3.223,2.605;P<0.05)。RT-PCR检测显示肝癌组织PTTG1相对mRNA表达量为3.09(1.46,4.77),明显高于癌旁组织的0.90(0.62,1.14)(Z=2.605,P<0.05)。肝癌组织PTTG1蛋白表达与组织分化程度有关(χ~2=3.849,P<0.05);而癌旁组织PTTG1表达与患者年龄、血清α-L-岩藻糖苷酶水平和肿瘤体积有关(t=2.463,χ~2=4.342,6.070;P<0.05)。结论PTTG1在肝癌组织中高表达,且PTTG1蛋白表达与肝癌患者α-L-岩藻糖苷酶水平、肿瘤大小、分化程度等相关。