BATF2真核表达载体的构建及其对肝癌细胞Bel-7402增殖的影响

目的:构建人BATF2真核表达载体,并验证其过表达对肝癌Bel-7402细胞增殖的影响。方法:利用Trizol法提取正常人外周血单核细胞RNA并将其反转录成cDNA,再以cDNA为模板扩增出BATF2基因序列,再将其连接到pcDNA3.1真核表达载体上,采用酶切和测序的方法对重组质粒进行鉴定;用脂质体转染的方法将重组质粒转染Bel-7402细胞后,Western blot检测BATF2蛋白表达变化,MTT法检测对细胞增殖的影响。结果:双酶切和DNA测序结果验证了pcDNA3.1-BATF2真核表达载体构建成功;pc-DNA3.1-BATF2组BATF2蛋白表达量高于空白对照组与pcDNA3.1组(P<0.05)。转染48、72、96 h后,pc-DNA3.1-BATF2组Bel-7402细胞增殖的OD值均低于空白对照组和pcDNA3.1组(P<0.05)。结论:成功构建pcDNA3.1-BATF2真核表达载体并转染Bel-7402细胞后BATF2蛋白表达量增加,且过表达BATF2能够显著抑制肝癌细胞Bel-7402细胞增殖能力。

过表达BTAF2对肝癌Bel-7402细胞侵袭和迁移的影响

目的 探讨碱性亮氨酸拉链转录因子2(BATF2)过表达对肝癌Bel-7402细胞侵袭迁移的影响。方法 利用Lipofeetamine 3000 Reagent脂质体转染法进行肝癌Bel-7402细胞转染,以转染pcDNA3.1空载体的Bel-7402细胞和转染pcDNA3.1-BATF2的Bel-7402细胞为研究对象,利用Western blot法检测转染后Bel-7402细胞的BATF2蛋白表达水平,Transwell小室检测转染后Bel-7402细胞侵袭能力,细胞划痕实验检测转染后Bel-7402细胞迁移能力。结果 相较于pcDNA3.1组,pcDNA3.1-BATF2组蛋白表达量显著增加,差异具有显著性(P<0.05);pcDNA3.1组侵袭穿膜的细胞数为(108.5±27.7)个,而pcDNA3.1-BATF2组侵袭穿膜的细胞术为(45.6±17.9)个,pcDNA3.1-BATF2组细胞穿膜数量明显减少(P<0.05);pcDNA3.1组迁移距离为(90.15±27.58)μm,而pcDNA3.1-BATF2组迁移距离为(51.46±16.17)μm, pcDNA3.1-BATF2组细胞迁移距离明显缩短(P<0.05)。结论 BATF2过表达能够抑制肝癌细胞Bel-7402侵袭和迁移能力。