上海市金山地区乙型肝炎病毒基因型分布及其与临床的关系

目的了解上海金山地区乙型肝炎病毒(HBV)感染者基因型分布及其与临床的关系。方法401例HBV DNA阳性患者采用聚合酶链反应(PCR)-酶联免疫吸附试验(ELISA)进行HBV DNA定量、微流基因芯片法进行基因分型、ELISA检测e抗原(HBeAg)及肝功能检查后进行综合分析。结果B型198例(49.38%),C型169例(42.14%),B/C混合型20例(4.99%),未分型14例(3.49%),未发现其他基因型。B型在慢性乙型重度肝炎(CSHB)患者中的比例显著低于无症状携带者(ASC)和慢性乙型轻、中度肝炎(CMHB)(P<0.01),而C型在CSHB患者中的比例显著高于ASC和CMHB(P<0.01)。ASC中B型患者的HBV DNA水平最低。C型患者的丙氨酸氨基转移酶(ALT)和γ-谷氨酰基转移酶(GGT)水平均高于B型。结论上海金山地区HBV感染者基因型以B型为主,C型次之,少量B/C混合型,C型与重肝病关系比B型密切。

过氧化物酶体增殖物激活受体γ在胰岛素抵抗高脂血症中的作用

目的探讨过氧化物酶体增殖物激活受体γ(peroxide daily proliferator- activated receptor γ,PPARγ)在阿托伐他汀治疗胰岛素抵抗高脂血症中的作用。方法选取2016年10月至2018年5月我院收治的胰岛素抵抗高脂血症患者116例,实时荧光定量PCR检测外周血单个核细胞PPARγ表达。给予阿托伐他汀降脂治疗,检测治疗前后患者血清总胆固醇(TC)、三酰甘油(TG)、低密度脂蛋白胆固醇(LDL- C)、高密度脂蛋白胆固醇(HDL- C)、空腹血糖(FBG)、空腹胰岛素(FINS)、白介素6(IL- 6)、C反应蛋白(CRP)和肿瘤坏死因子α(TNF-α)水平并计算胰岛素抵抗指数HOMA- IR。HOMA- IR >2.69的胰岛素抵抗患者纳入研究组,对照组HOMA- IR<2.69。对比两组患者降脂效果和脂肪分泌因子IL- 6、CRP和TNF-α水平变化。结果研究组患者外周血单个核细胞PPARγ表达低于对照组;对照组阿托伐他汀降脂效果优于研究组( P <0.05);治疗后研究组IL- 6、CRP和TNF-α变化明显小于对照组( P <0.05)。结论 PPARγ在胰岛素抵抗高脂血症治疗过程中发挥重要作用,PPARγ可有效增强阿托伐他汀降脂作用并抑制脂肪因子的分泌,其作用机理有待深入研究。

细胞外基质蛋白1在肿瘤中的表达及意义

目的:探讨细胞外基质蛋白1(extracellular matrix protein 1,ECM1)在肿瘤组织中的表达及意义。方法:应用免疫组织化学EnVision法,检测肝脏、乳腺、直肠组织(正常组织和肿瘤组织)中ECM1的表达,比较正常组织和肿瘤组织淋巴结转移肿瘤和淋巴结未转移肿瘤之间的ECM1表达差异。结果:ECM1的表达如下:正常肝组织阳性率20.0％(4／20),肝癌组织阳性率85.4％(70／82);正常乳腺组织阳性率9.1％(1／11),乳腺癌组织阳性率60.0％(18／30),其中淋巴结(一)者为37.5％(6／16),淋巴结(+)者为85.7％(12／14);正常直肠组织阳性率11.8％(2／17),直肠癌组织阳性率54.5％(18／33),其中淋巴结(一)者为33.3％(6／18),淋巴结(+)者为80.0％(12／15)。统计分析表明,对ECM1的表达,肿瘤组织高于正常组织,淋巴结转移性肿瘤高于非转移性(P<0.01)。结论:ECM1在肿瘤组织中过表达,并且与肿瘤的转移相关。

细胞外基质蛋白1对MCF-7和HUVEC增殖影响的研究

目的:探讨细胞外基质蛋白1(extracellular matrix protein 1,ECM1)对乳腺癌细胞株MCF-7和人脐静脉内皮细胞(human umbilical vein endothelial cell,HUVEC)增殖的影响。方法:构建ECM1-pEGFP-N2真核表达载体,采用PCR方法,扩增出ECM1基因,用BglⅡ和Kpn Ⅰ双酶切ECM1基因和pEGFP-N2载体,连接酶切目的片段,转化大肠杆菌DH5α,筛选阳性克隆酶切、测序鉴定;利用脂质体介导的转染技术转染MCF-7细胞,药物G418筛选稳定转染细胞株,荧光显微镜检测报告基因表达产物EGFP,免疫组化检测ECM1蛋白表达。用MTT比色法分析ECM1对MCF-7和HUVEC增殖的影响。结果:成功构建了ECM1-pEGFP-N2真核表达载体,并在MCF-7中稳定表达;MTT比色法检测MCF-7增殖结果显示未转染组、空载体转染组和ECM1转染组的D570值分别为0.95±0.07、0.97±0.09和1.03±0.12,三者无明显差异;MTT比色法检测HUVEC增殖结果示培养液组、空载体转染上清组、ECM1转染上清组HUVEC D570值分别为0.89±0.06、0.92±0.09和1.39±0.10,差异具有显著性意义(P<0.01)。结论:ECM1对乳腺癌细胞株MCF-7的增殖无影响,但能显著促进血管内皮细胞体外增殖。

人外周血单个核细胞BLyS_(127-285)的克隆、表达和纯化

目的:从人外周血单个核细胞中克隆出B淋巴细胞刺激因子(B lymphocyte stimulator,BLys)胞外区片段BLyS127-285,并进行表达和纯化。方法:采用RT-PCR技术,从人外周血单个核细胞中扩增BLyS127-285,测序后构建原核表达载体,经IPTG诱导表达及Ni-NTA纯化,以SDS-PAGE和Western印迹法进行鉴定。结果:RT-PCR扩增出一个480 bp的DNA片段,序列分析与GenBank中报道的人BLyS127-285的cDNA序列一致,该胞外区片段在大肠杆菌中得到高效表达,表达量可达菌体总蛋白的49.8％,纯化后纯度可达97.0％。结论:成功地从人外周血单个核细胞中扩增出入BLyS127-285,并获得高效表达,其纯化产物为进一步研究其功能、开发与临床应用奠定了基础。

硫芥对大鼠止血和凝血功能的影响

目的：研究硫芥中毒对大鼠的止、凝血功能的影响机制。方法：建立大鼠硫芥中毒模型，注射 １／４ＬＤ５０硫芥 ７ ｄ后测定血红蛋白（Ｈｂ）、血小板计数（ＰＬＣ）、有核细胞计数（ＮＣ）、凝血酶原时间（ＰＴ）、活化部分凝血活酶时间（ＡＰＴＴ）、纤维结合蛋白（ＦＮ）、纤溶酶（Ｐｌｍ）等指标。结果：硫芥组及各治疗组大鼠 Ｈｂ、ＰＬＣ、ＮＣ明显低于对照组。硫芥中毒组大鼠血清 ＦＮ低于对照组，ＥＰＯ加用四药治疗组ＦＮ明显高于硫芥中毒组和其他治疗组。硫芥中毒组ＡＰＴＴ、ＰＴ均比其他各组延长。结论：硫芥中毒可导致大鼠ＰＬＣ、Ｈｂ，ＦＮ减少及内、外源凝血功能降低；促红细胞生成素（ＥＰＯ）对ＦＮ合成有促进作用。

HLA-A*0201/BSP融合基因的构建与表达

目的:克隆表达HLA-A*0201 α链胞外区与BirA酶底物肽(BirA substrate peptide,BSP)的融合蛋白。方法:采用PCR技术从人HLA-A*0201 α链cDNA库中克隆基因的胞外区,拼接可生物素化的BSP片段序列后,经双酶切插入载体pET28a(+)后在E.coli BL21(DE3)诱导高效表达,并对表达产物进行纯化与复性。结果:成功地扩增出HLA-A*0201／BSP基因并测序证实,构建了融合表达载体pET-HLA-A*0201,并获表达与纯化。结论:成功构建了HLA-A*0201／BSP融合基因,为进一步体外构建特定的HLA-A*0201四聚体,标记相应特异性CD8+T细胞提供物质基础。

高压氧联合药物治疗PE-SWD兔血浆中6-Keto-PGF_(1α)和TXB_2变化

目的 :探讨高压氧联合地塞米松、东莨菪碱、尼莫地平、果糖二磷酸钠应用对海水淹溺肺水肿 (PE SWD)兔肺损伤的作用机制。方法 :测定兔血浆血栓烷B2 (TXB2 )和 6 -酮 -前列腺素F1α(6 Keto PGF1α)的含量。结果 :海水淹溺导致兔血浆TXB2 明显增高 ,但对血浆 6 Keto PGF1α无明显影响。地塞米松、东莨菪碱、尼莫地平、果糖二磷酸钠的应用延迟了血浆TXB2 的增高时间 ,并提高了血浆 6 Keto PGF1α的含量。高压氧联合药物治疗不仅降低了血浆TXB2 含量 ,而且提高了血浆 6 Keto PGF1α的含量。结论 :高压氧与上述 4种药物联合应用能够减轻海水淹溺肺水肿兔肺的损伤。

标本存放条件对血糖检测的影响及措施

目的分析标本存放条件对血糖检测的影响,以及探讨实验室如何采取合适的措施来避免这些因素的干扰。方法随机抽取10例患者连续2 d早晨空腹采血共20份标本。第1天每份标本分装入3支无添加剂管中,组成3组,30 min后分别进行离心,并对室温组标本检测,作为即时检测,其余两组分别放置冰箱和水浴箱保存。于2.5 h、5 h后分别对3组标本进行检测。第2天,每份标本分为两管,分别置入氟化钠草酸钾抗凝管和分离胶促凝剂管中,离心后分别于30 min(即时)2、.5 h、5 h后检测。结果无添加剂真空管中的血糖标本置室温和水浴箱2.5 h和5 h后血糖检测结果与即时检测结果相比差异均有统计学意义(P<0.01)。而冰箱存放标本2.5 h后与即时检测血糖值相比差异无统计学意义(P>0.05),但5 h后差异有统计学意义(P<0.05)。即时检测的两种真空管中的标本比较,差异无统计学意义(P>0.05)。2.5 h和5 h后血糖检测值与即时检测组同类试管比较差异均无统计学意义(P>0.05)。结论标本在不同条件下,由于糖酵解等因素会影响血糖的检测,而采用氟化钠草酸钾抗凝管和分离胶促凝剂真空采血管可以有效避免这些因素的影响。

脑损伤患者医院感染危险因素分析

目的 :探讨脑损伤患者医院感染危险因素。方法 :对 12 5例脑损伤住院患者进行回顾性研究分析。结果 :共发现 43例患者 5 5例次医院感染 ,感染部位以呼吸道为主 (5 4 5 5 % ) ,其次为泌尿道 (30 91% ) ,感染主要病原菌为G-杆菌和真菌。G-杆菌对青霉素G、环丙沙星、头孢三嗪、头孢唑啉耐药率高 (分别为 87 80 %、5 8 5 4%、48 78%、80 49% )。结论 :脑损伤患者存在病情重、昏迷时间长、抵抗力低、侵袭性操作多和抗生素不合理应用等感染危险因素。为减少医院感染发生率 ,必须加强预防措施 ,包括切断病原体传播途径 ,合理使用抗生素 ,改善宿主预防机制。

孕初检行口服葡萄糖耐量试验预测妊娠期糖尿病的前瞻性分析

目的探讨初检孕妇口服葡萄糖耐量试验(OGTT)的血糖对孕中期妊娠期糖尿病(GDM)的预测作用。方法招募2017年1月1日至2018年12月31日于上海市第六人民医院金山分院(上海朱泾地区)妇产科门诊产检孕妇840例,所有研究对象均在孕初检(8~16孕周)时行75 g OGTT,并在孕中期(24~28孕周)接受GDM筛查。将GDM分为仅以空腹血糖(FPG)诊断的GDM(F-GDM)和以OGTT 1h血糖(1hPG)、OGTT 2hPG诊断的GDM(P-GDM);分析孕初检FPG、OGTT 2hPG和GDM筛查的FPG、OGTT 1hPG、OGTT 2hPG的相关关系;以受试者工作特征(ROC)曲线用孕初检FPG预测F-GDM,以孕初检OGTT 2hPG预测P-GDM,分别找到最佳切点,再以该切点作为孕初检GDM诊断标准,用四格表分析初检GDM和中期GDM诊断特性。两组间比较采用t检验,相关性采用Spearman相关分析;相关系数采用Fisher Z变换法,比较采用U检验。结果(1)孕初检FPG和孕中期FPG、OGTT 1hPG和2hPG均相关(相关系数分别为r1=0.461、r2=0.146、r3=0.087,均P<0.05),但孕初检FPG和孕中期FPG相关性更好(r1与r2、r3比较P值均<0.05,r2与r3比较P>0.05);孕初检OGTT 2hPG和孕中期FPG、OGTT 1hPG和2hPG均相关(相关系数分别为r4=0.201、r5=0.425、r6=0.436,均P<0.05),但孕初检OGTT 2hPG和孕中期OGTT 1hPG、2hPG相关性更好(r4与r5、r6比较P值均<0.05,r5与r6比较P>0.05)。(2)孕初检FPG预测F-GDM的ROC曲线下最大面积0.781(95%CI:0.734~0.829,P<0.001),最佳切点4.95 mmol/L,敏感性67.3%,特异性74.4%;孕初检OGTT 2hPG预测P-GDM的ROC曲线下最大面积0.790(95%CI:0.742~0.839,P<0.001),最佳切点7.595 mmol/L,敏感性67.9%,特异性80.8%。(3)用孕初检FPG≥5.0 mmol/L和OGTT 2hPG≥7.6 mmol/L为切点诊断GDM,与孕中期诊断GDM比较:敏感性78.0%,特异性60.7%,阳性预测值33.2%,阴性预测值91.7%。结论建议在孕初检用OGTT筛查GDM,FPG≥5.0 mmol/L和OGTT 2hPG≥7.6 mmol/L可作为孕初检血糖异常参考值。