肝细胞肝癌组织中CD90表达与临床病理参数的关系

目的探讨肝细胞肝癌（HCC）患者组织中CD90的表达与临床病理参数的关系,为HCC患者的临床治疗提供参考。方法选择2010年1月-2012年12月中山大学孙逸仙纪念医院肝胆外科住院并进行肝癌切除的HCC患者共80例,收集患者HCC组织（HCC组）、癌旁组织（癌旁组）,并收集40例同时期就诊的肝外伤患者正常肝脏组织（对照组）,分析不同组织中CD90表达与临床病理参数的关系。结果 3组CD90阳性表达总体差异有统计学意义（χ^2=120.341,P〈0.05）。HCC组和癌旁组CD90表达明显高于对照组,差异有统计学意义（Z=-8.519,-3.545,P〈0.05）。HCC组CD90表达明显高于癌旁组,差异有统计学意义（Z=-8.958,P〈0.05）。CD90在HCC组织中的表达与肿瘤大小、肝内转移、TMN分期和病理分级有关（Z=-2.204、-2.728、-3.085、-4.068,P〈0.05）。CD90阳性患者1年生存率与2年生存率分别为87.67%和63.01%,CD90阴性患者分别为85.71%和57.14%,差异均无统计学意义（χ^2=1.421,P=0.233;χ^2=0.094,P=0.759）。结论 CD90在HCC组织和癌旁组织中高表达,且其表达与临床病理参数紧密相关,可为HCC患者诊断、治疗、预后评估提供参考。

肝细胞癌患者血清中CD31表达水平及其对肿瘤细胞侵袭及增殖的影响

目的探讨肝细胞癌(HCC)患者血清CD31表达水平以及对肝癌细胞侵袭和增殖影响。方法选取该院45例HCC患者为研究组,45例同期体检的健康人群为对照组,ELISA检测肝癌患者血清CD31表达水平;采用小分子干扰RNA(si RNA)抑制肝癌细胞中CD31的表达,transwell法观察CD31对肝癌细胞侵袭的影响,CCK-8(Cell Counting Kit-8)法检测肝癌细胞增殖的变化。结果 CD31在肝癌患者血清中的表达水平显著高于正常健康人群,差异具有统计学意义(P<0.05);抑制肝癌细胞中CD31的表达后,肝癌细胞的侵袭和增殖能力显著下降,差异具有统计学意义(P<0.05)。结论 CD31在肝癌患者血清中高表达,并可增强肝癌细胞的侵袭和增殖能力。

人工肝支持系统治疗肝功能衰竭的Meta分析

目的探讨人工肝支持系统对肝功能衰竭的治疗效果。方法检索国内外1970年1月~2008年6月公开发表的人工肝治疗肝功能衰竭的相关论文,提取生存率或出院时临床好转率等可以反映远期预后的资料,以风险比(RR)为效应量进行异质性检验和统计量合计分析。结果共有12篇研究论文入选,共包含肝功能衰竭病例304例。治疗组给予机械型人工肝或生物型人工肝联合常规内科治疗。对照组均给予常规内科治疗。10篇文献讨论了人工肝对肝功能衰竭的疗效,另两篇探讨了生物肝的应用。总体而言,人工肝支持系统对肝功能衰竭的预后有一定程度的改善(RR值0.80,可信区间0.664~0.969,P值0.022),对急性肝功能衰竭的预后基本无改善(RR值0.899,可信区间0.72~1.12,P值0.361)对慢性肝功能衰竭急性加重患者的预后改善明显。(RR值0.57,可信区间为0.39~0.84,P值为0.004)。结论人工肝支持治疗对肝功能衰竭的生存率改善轻微,对慢性肝功能衰竭急性加重者明显降低死亡率。人工肝支持系统类型影响生存率。生物肝对急性肝衰竭或慢性肝功能衰竭急性加重患者都可以降低死亡率。开发生物肝支持系统应是该领域重点研发方向。

纤维素与明胶微载体微重力培养肝细胞的比较

目的探讨商品化的多孔微载体:cytopore 2和cultispher S何种更适合于微重力条件下培养CL-1细胞。方法采用RCCS旋转培养系统,在50ml水平微重力旋转培养CL-1细胞。分别对接种至cytopore 2和cultispher S的细胞进行动态形态学观察、细胞计数和功能学检测。结果CL-1细胞在两种载体上均可粘附生长,并于第9天达到生长高峰。细胞计数结果提示cultispher S的细胞密度可达到4×106个/ml。在第10、11、12天,cytopore 2组的上清中白蛋白浓度明显高于cultispher S组,有显著差异(P<0.05),在第10、11天,cytopore 2组的上清中尿素浓度明显高于cultispher S组,有显著差异(P<0.05)。结论Cytopore2培养的CL-1细胞计数低于Cultispher S组,但功能好于Cultispher S组。

新型人源细胞混合型生物人工肝的安全性

背景:目前原位肝移植是惟一有效治疗急性肝衰竭的方法,但其存在供体匮乏的问题。人工肝可作为肝移植过渡支持手段。目的:观察新型人源细胞混合型生物人工肝的安全性。方法:在全接触灌流型生物反应器接种微载体微重力中国人肝细胞系1细胞,结合血浆灌流对D-氨基半乳糖诱发急性肝功能衰竭模型食蟹猴进行治疗,治疗过程中观察循环管路的密闭性、不良反应及监测动物的生命体征变化,治疗结束后取灌流型生物反应器中的中国人肝细胞系1细胞,把细胞碎片与细胞分别接种至裸鼠的颈部、后背部皮下进行比较。结果与结论:对急性肝功能衰竭食蟹猴模型的治疗过程中未发现循环管路中有液体渗漏,未发生出血、过敏、高热及其他严重的不良反应,生命体征平稳。接种后4周时,细胞碎片接种裸鼠未见接种部位出现种植瘤,细胞接种裸鼠共有10个接种部位出现肿瘤,致瘤率为100%。说明新型人源细胞混合型生物人工肝是安全可靠的,可进一步探讨其有效性,有望用于各种动物实验研究及各期临床实验研究。

免疫抑制剂治疗百草枯中毒的Meta分析

目的探讨免疫抑制剂对百草枯的治疗效果。方法检索国内外1970年1月～2008年6月公开发表的免疫抑制剂治疗百草枯中毒的相关论文,包括观察性研究和随机对照试验(RCT),提取观察性研究的生存率及可信区间,对照研究的风险比(RR)为效应量进行异质性检验和统计量合计分析。结果共计8项研究入选,6项历史对照性研究,2项随机对照研究。免疫抑制剂对百草枯中毒的预后有显著改善[历史对照的观察性研究RR为0.56(95%CI=0.45～0.69)和RCT研究RR为0.76(95%CI=0.62～0.94)]。结论免疫抑制剂治疗对百草枯中毒的生存率改善明显。但目前文献存在明显异质性,证据尚不够充分,需要进行更多的RCT试验以进一步明确。

简易选择性鞘外入肝血流阻断法在腹腔镜左半肝切除术中的应用

目的探讨简易选择性鞘外入肝血流阻断方法在腹腔镜左半肝切除术应用中的安全性和可行性。方法回顾性分析2016年1月15日至2021年8月15日梅州市人民医院45例因左肝肿瘤行腹腔镜左半肝切除术患者的临床资料。按入肝血流阻断方式分为两组,A组采用简易选择性鞘外入肝血流阻断方法阻断(n=21),B组采用左肝Glisson蒂鞘内分离结扎方法阻断(n=24),比较两组病例手术时间、术中出血量、术后住院时间、近期并发症及围手术期血白细胞数、肝功能等资料。结果两组病例手术时间、术中出血量、术后住院时间、近期并发症发生率和术后白蛋白、胆红素、凝血酶原时间比较,差异无统计学意义(P>0.05)。A组术后第1、3天白细胞数及术后第1天ALT、术后第3天AST均低于B组,差异有统计学意义(P<0.05)。结论简易选择性鞘外入肝血流阻断方法在腹腔镜左半肝切除术操作简便、安全可行,值得临床上推广使用。

经皮肝胆管引流术与经内镜鼻胆管引流术对急性梗阻性化脓性胆管炎的疗效对比研究

目的探讨经皮肝胆管引流术(Percutaneous transhepatic cholangiograph drainage,PTCD)与经内镜鼻胆管引流术(Endoscopic Nasobiliary Drainage,ENBD)对急性梗阻性化脓性胆管炎的疗效差异。方法选取本院2010年1月至2015年1月期间肝胆外科住院部急性梗阻性化脓性胆管炎患者134例,根据不同的手术方法将患者分为观察组与对照组,各67例,对照组患者采用经皮肝胆管引流术;观察组患者采用经内镜鼻胆管引流术,比较两组临床疗效。结果观察组治疗总有效率明显高于对照组,两组比较差异具有统计学意义(P<0.05),且与对照组比较,观察组患者术后5 d血清胆红素水平明显降低(P<0.05),腹痛缓解时间与住院时间明显缩短(P<0.05),住院费用明显减少(P<0.05)。观察组黄疸改善率明显高于对照组,总并发症发生率明显低于对照组,两组比较差异具有显著性(P<0.05)。结论经内镜鼻胆管引流术对急性梗阻性化脓性胆管炎的疗效更显著,有助于有效缓解临床症状,缩短病程,降低并发症风险,值得临床推广应用。

腹腔镜超声在腹腔镜肝切除术的应用评估

目的探讨腹腔镜超声在腹腔镜肝切除术中的应用。方法选取2013年1月至2017年12月我院收治且确诊有手术指征的肝肿物腹腔镜下肝切除患者46例。根据术中是否使用超声随机分为2组:观察组20例和对照组26例。比较两组患者术中及术后情况,记录术中出血量、手术时间、引流时间、术后住院时间、术后并发症及疗效。结果两组手术时间、术中输悬浮红细胞量、中转开腹例数及术后住院时间差异无统计学意义(P>0.05);与对照组相比,观察组术中出血量、引流时间、下床活动时间及术后并发症较少(P<0.05)。结论腹腔镜超声在腹腔镜肝切除术中能够指导手术,降低术中出血,降低术后并发症,提高肝切除术的安全性。

LC联合LCBDE与ERCP后择期行LC治疗胆囊结石合并胆总管结石的临床效果对比观察

目的比较一期腹腔镜胆囊切除术(LC)联合腹腔镜胆总管探查术(LCBDE)与经内镜逆行胰胆管造影(ERCP)后择期行LC治疗胆囊结石合并胆总管结石的临床效果。方法选取我院2013年1月至2016年12月期间收治的251例胆囊结石合并胆总管结石患者,按手术方式分为LC+LCBDE组(184例)和ERCP+LC组(67例)。观察和比较两组患者的临床效果。结果两组患者的手术成功率、结石残留率和术中转开腹率比较差异均无统计学意义(P>0.05)。LC+LCBDE组的手术时间和住院时间均显著短于ERCP+LC组(P<0.05)。LC+LCBDE组的结石复发率和并发症发生率均显著低于ERCP+LC组(P<0.05)。LC+LCBDE组的术中出血量和住院费用均显著少于ERCP+LC组(P<0.05)。结论与ERCP后择期行LC比较,一期LC联合LCBDE治疗胆囊结石合并胆总管结石的安全性较高,临床效果较好。

经皮肝穿刺胆道镜取石术微创治疗肝内胆管结石的临床效果

目的:探讨经皮肝穿刺胆道镜取石术在肝内胆管结石微创治疗中临床应用价值。方法:选取肝内胆管结石患者100例作为研究对象,随机分为观察组和对照组。观察组采用腹腔镜联合胆道取石术治疗,对照组采用单纯腹腔镜手术治疗,治疗结束后对患者的手术指标改善状况、临床治疗情况、并发症发生率进行比较和分析。结果:与对照组相比,观察组患者的住院时间、手术出血量、术后排气时间、手术时间更少(P<0.05);两组患者的结石取净率组间比较差异无统计学意义(P>0.05);观察组患者出现并发症2例,对照组患者出现并发症11例,组间比较差异具有统计学意义(P<0.05)。结论:腹腔镜合并胆道取石术治疗肝内胆管结石效果好,并发症发生率低,值得临床推广。

旋转生物反应器内微载体大规模扩增肝细胞

目的评估旋转生物反应器(RCCS)内肝细胞微载体大规模培养的可行性。方法为获取足够数量活性良好的肝细胞种子细胞,本实验探索在RCCS内应用微载体技术快速扩增肝细胞的方法。将CL-1细胞和HepFMMU应用Cytodex-3微载体在RCCS内进行动态培养,观测肝细胞的生长情况和细胞代谢率。结果肝细胞在Cytodex-3微载体上生长迅速、生长倍增时间缩短,并保持很高的生物活性。培养至第5天,细胞数量可达最初接种的23倍。细胞的数量在第5天左右达到最高,然后开始下降。功能学检查、倒置显微镜、扫描电镜及MTT均提示细胞功能良好。结论RCCS微载体肝细胞大规模培养是一种可行的细胞快速扩增方法,但对于人工肝庞大的细胞数量和功能需求,应进一步研究,通过优化营养和废物排除,模拟肝脏生理结构,提高细胞培养规模和功能。

胰十二指肠切除术中不同胰肠吻合方式与胰瘘的关系

目的:观察胰十二指肠切除术不同胰肠吻合方式与胰瘘发生的关系。方法:选取2014年1月至2014年12月行胰十二指肠切除术的患者90例,按胰肠吻合方式随机将入组病例分黏膜吻合组(胰管空肠端侧黏膜对位吻合)、套入吻合组(胰腺空肠端侧套入吻合),两组各45例。统计两组术后胰瘘发生率及胰周引流液淀粉酶含量的差异。结果:黏膜吻合组的胰瘘发生率低于套入吻合组(P<0.05);黏膜吻合组胰周引流液量及淀粉酶含量低于套入吻合组(P<0.05)。结论:胰管空肠端侧黏膜对位吻合方式的术后胰瘘发生率更低,更加安全。

腹腔镜手术切除胆囊治疗结石性胆囊炎的疗效观察

目的:探讨和分析腹腔镜手术切除胆囊治疗解释性胆囊炎的临床效果。方法将我院2011年6月至2014年1月收治的80例结石性胆囊炎患者随机分为观察组和对照组,每组40例,对照组给予传统手术治疗,观察组给予腹腔镜切除胆囊手术治疗,对两组患者的治疗效果进行比较。结果两组患者手术时间、术后住院天数、术中出血量及止痛药的使用例数的比较差异显著(P<0.05)。结论腹腔镜下胆囊切除术治疗结石性胆囊炎具有切口小、痛苦少、恢复快、术后止痛药使用少等优势,值得临床推广使用。

旋转生物反应器内微载体共培养CL-1肝细胞与人肝星形细胞

目的评估cL-1肝细胞跟人肝星形细胞（HSC）的微载体微重力共培养来提高CL-1肝细胞的活力与功能的可行性。方法实验分为两组：CL-1肝细胞微载体微重力单培养组和CL-1肝细胞、HSC微载体微重力共培养组。通过倒置显微镜观察、细胞计数、MTT染色及扫描电子显微镜比较两组肝细胞的形态、细胞活力差异，并通过、培养上清中ALT、白蛋白浓度等功能指标测定，比较两组肝细胞活力和功能差异。结果共培养组较单培养组细胞生长迅速，细胞从24h贴壁后开始增长，到第5天进入高峰。共培养组1～7d的肝细胞密度明显高于单培养组的细胞密度（P〈0．05）。两组肝细胞ALT、白蛋白从第1天开始不断分泌增加，第5天达到峰值，第6、7天有所下降。ALT功能比较，共培养组明显低于单培养组（P〈0．05）。白蛋白功能比较，共培养组明显高于单培养组（P〈O．05）。倒置显微镜、扫描电镜及MTT均提示共培养组肝细胞形态、活力优于单培养组。结论人肝细胞、HSC微载体微重力共培养研究有利于维持及增强旋转生物反应器的肝细胞活力及功能，对人工肝的培养模式发展具有重要意义。

在线微载体肝细胞荧光示踪研究

目的拟探讨SYTO/EB在微载体细胞培养中活体细胞原位示踪的应用价值。方法采用活细胞核酸染色剂(SYTO13)和溴化乙啶(EB)2种核酸染色剂对微载体生长的细胞进行双重染色,荧光显微镜下通过颜色不同判断细胞的活力状态并计算出活力百分比。以间接活力测定的四氮唑盐法同时对肝细胞进行活力的检测,并将结果进行比较。结果 2种方法测定的结果均可显示微载体生长的肝细胞。但SYTO/EB法更灵敏,可精确计数。结论 SYTO/EB测定微载体肝细胞的活力快速、灵敏且简便,并可原位观察细胞的活力,不失为一种可取的微载体活力检测方法。

胰腺损伤的诊断与治疗—附33例临床分析

目的总结胰腺损伤的诊断、手术方式、并发症诊治体会。方法对我院1997年至2013年间收治的33例胰腺损伤的患者临床资料进行回顾性分析。结果 33例患者共治愈26例(79%),死亡7例(21%)。21例行手术治疗,术后9例胰瘘,1例小肠瘘,2例腹腔出血,1例多器官功能衰竭,1例消化道出血。术中死亡2例,为腹腔开放性损伤合并下腔静脉破裂大出血无法止血;术后死亡5例:2例死于脓毒血症,2例死于腹腔出血,1例死于多器官功能衰竭。I^II级胰腺损伤患者有1例死亡,Ⅲ~V级胰腺损伤有6例死亡的。结论胰腺损伤并发症高,处理棘手,伴有胰管损伤者死亡率高,早期诊断、有效的手术探查及方法是胰腺损伤治疗的关键。

灌注式RCCS生物反应器CFD模拟分析微载体旋转对细胞氧供的影响

目的:探讨利用微重力旋转细胞培养系统(RCCS)生物反应器仿真模拟分析微载体旋转对细胞氧供的影响。方法:联立不可压缩牛顿流体连续性方程和动量守恒方程、微载体内以及流动空间中氧的传递和反应方程,设置参数并求解;以Gamb it建立RCCS网格模型,并用F luent软件在欧拉多相模式下进行生物反应器数值模拟及流体力学分析。结果:以微载体直径及RCCS旋转速度作为自变量,基于欧拉-欧拉多相模型和氧运输公式成功建立RCCS数值分析模型。微载体直径和旋转速度均影响细胞培养效率,直径200、300、400μm的微载体旋转速度分别为10、12、14 r/m in;旋转1 h后直径600μm的微载体RCCS中间区平均氧浓度增加85%。结论:CFD可以定量模拟分析影响微载体及氧供的相关因素,为优化培养条件提供参数。

天地一体化网络无缝切换和跨域漫游场景下的安全认证增强方案

由多种异构网络融合而成的天地一体化网络受到了研究者的广泛关注,但是其由于拓扑复杂、用户规模庞大而面临诸多安全威胁,容易出现链路切换和用户跨域漫游的情况。针对天地一体化网络的特点,提出了一种适用于天地一体化网络无缝切换和跨域漫游场景下的安全认证增强方案,基于安全凭证(Token)与散列链的结合,实现了用户与拜访域的双向快速认证,同时支持用户在拜访域中的合理计费。此外,针对天地一体化网络中卫星接入点频繁切换问题,提出了2种无缝切换机制以确保用户通信的连续性。安全性分析结果表明,所提方案不仅满足跨域漫游所必备的安全特性,还能够实现用户在拜访域的合理计费。