基于UPLC-Q-TOF-MS技术分析苯系物在贻贝体内的代谢物

由于苯系物对海洋生态系统的毒性作用,且在生物体内的代谢存在物种差异,为探索典型苯系物在贻贝体内潜在的代谢解毒途径及其代谢物,本文通过室内模拟苯系物暴露实验,采用UPLC-Q-TOF-MS技术,结合Waters UNIFI数据信息系统,对苯、甲苯和二甲苯研究在贻贝体内产生的代谢物进行质谱分析。结果表明,苯、甲苯和二甲苯在贻贝体内分别产生了6种苯代谢物、9种甲苯代谢和8种二甲苯代谢物,代谢途径有水合、还原、去饱和、氧化、硫酸化、二氢二醇、甲基化、葡醛酸结合反应等。其中二甲苯代谢物X-7是DPMA的同分异构体,其他苯系物的代谢产物为首次报道。本研究获得的苯系物在贻贝体内的代谢解毒途径和产生的代谢产物信息、开发的苯系物代谢物UPLC-Q-TOF-MS分析方法,丰富了海洋生态环境监测体系,并为我国近岸海洋生态环境安全评估提供理论依据和数据参考。

超高效液相色谱-串联质谱法测定猪肾中安普霉素的残留量

建立了猪肾中安普霉素残留量的超高效液相色谱-串联质谱(UPLC-MS/MS)测定方法。猪肾样品以磷酸二氢钾溶液提取,经HLB固相萃取柱净化后,采用CAPCELL PAK MGⅡC_(18)(2.0 mm×150 mm,5μm)色谱柱分离,以0.1%甲酸水溶液和甲醇为流动相进行梯度洗脱。采用电喷雾离子源正离子模式扫描,多反应监测(MRM)模式进行检测,基质匹配同位素内标法定量。安普霉素在20~200μg/L质量浓度范围内线性良好,相关系数(r^(2))为0.9993,方法定量下限为10.0μg/kg。在10、20、100μg/kg加标水平下的平均回收率为85.5%~94.6%,相对标准偏差(RSD)不大于5.9%。该方法基于HLB固相萃取柱净化,基质匹配同位素内标法定量,具有操作简单、定性准确、灵敏度高的特点,适用于猪肾中安普霉素残留量的测定。

基于奇异值分解的广义系统迭代学习控制算法

在对广义系统进行奇异值分解的基础上,研究了一类广义系统的迭代学习控制问题。针对快子系统和慢子系统的特点,分别利用状态误差代入输出误差,得到了一类新的广义系统迭代学习控制算法结构,这一算法是全新的。然后从理论上对所提出的算法进行完整的收敛性分析。分析结果表明,满足给定的收敛条件,系统输出可以渐近地跟踪给定的期望轨迹。

考虑公平偏好下洋快餐供应链社会责任绩效分析

为探讨洋快餐供应链的社会责任问题,保证洋快餐原料安全,构建了一个三级供应链收益共享的企业社会责任模型,模型考虑了企业承担社会责任对成本和销量的影响,并进一步考虑了参与者具有公平偏好的情况。数值算例验证了该模型能够实现企业社会责任绩效和供应链总收益最大化的双重目标,并且考虑参与者的公平偏好时,该模型依然能有效协调供应链,并使参与者取得更高的效用。

“杀菌净”对鸡常见细菌病的药效学研究

本文研究了国产兽药新制剂杀菌净对人工感染鸡白痢和大肠杆菌病的药效学。每个治疗试验用雏鸡180只，随机分为杀菌净三个不同剂量组、诺氟沙星对照组、阳性对照组和阴性对照组，每组动物30只。当感染鸡出现典型症状时，杀菌净三个剂量组、诺氟沙星组分别按0．4％。0．2％、0．1％和50mg·L－1混饮药物，均连续5天。结果表明：杀菌净三个剂量组、诺氟沙星组对鸡白痢的治愈率分别为100％、96．7％、80％、80％；对鸡大肠杆菌的治愈率分别为96．7％、90％、83．3％、73．3％。杀菌净按0．4％、0．2％混饮的治愈率显著高于诺氟沙星组。

罗美沙星在鸡体内的药物动力学与生物利用度研究

采用反向高效液相色谱法， 研究了罗美沙星在健康鸡体内的药动学与生物利用度。结果表明， 鸡静注罗美沙星后的ｃｉ－ ｔｉ数据符合二室开放模型， 其主要动力学参数如下： ｔｔ／２α０５６±０１２ｈ， ｔ１／β７６９±０７９ ｈ， Ｖｄ２１６±０３５ Ｌ／ｋｇ， Ｃ Ｌ Ｂ０２０±００３ Ｌ／ｋｇ·ｈ， Ａ Ｕ Ｃ ５２１９±８９９ ｕｇ／ｍ Ｌ·ｈ。鸡内服、肌注罗美沙星ｃ１－ ｔ１ 数据， 均符合有吸收因素二室模型， 内服的主要动力学参数如下： ｔ１／２ｋａ１１８±０１４ ｈ、ｔ１／２α２４５±０４６ ｈ、ｔ１／２β１７２１±１５８ ｈ、 Ａ Ｕ Ｃ ３８７８±６３３ ｕｇ／ｍ Ｌ·ｈ、ｔｍａｘ３１６＋ ０２３ ｈ、 Ｃｍ ａｘ２０６±０４３ ｕｇ／ｍ Ｌ、 Ｆ７４３１％ ； 肌注的主要动力学参数是： ｔ１／２ｋａ０６７±０１２ ｈ、ｔ１／２α１３０±０２３ ｈ、ｔ１／２β１１５２±１０２ｈ、 Ａ Ｕ Ｃ ４３１５±２０４ ｕｇ／ｍ Ｌ·ｈ、ｔｍ ａｘ１７６±０２０ ｈ、 Ｃｍａｘ４６０±ｕｇ／ｍ Ｌ、 Ｆ８２６８％ 。本文还就罗美沙星的临床应用进行了药动学评价。

基于气相色谱三重四极杆质谱法分析5种苯系物在贻贝体内的分布、蓄积和消除规律

采用气相色谱三重四极杆质谱(GC-MS/MS)技术,研究了5种苯系物暴露后在贻贝各组织中的分布、蓄积和消除规律.结果表明,贻贝不同组织中对5种苯系物的生物蓄积具有一定的差异,且分布呈组织特异性.暴露试验结束后,贻贝各组织中5种苯系物分布及其含量变化趋势基本相同,消化腺和性腺中的苯系物含量增加比其他组织快,且消化腺和性腺中的峰值比其他4种组织中的峰值较高.消化腺和性腺中的苯系物含量相对较高,有明显的吸收和富集作用.足、鳃、闭壳肌和外套膜中5种苯系物的含量相对较低,约为消化腺中的20%左右.消除阶段贻贝各组织中5种苯系物的含量符合一阶非线性衰减模型,相关系数范围为0.9948~0.9999.暴露组净化1 d后,贻贝对苯、甲苯、间二甲苯、对二甲苯和邻二甲苯的净化率范围分别为98.4%~99.2%、97.3%~98.8%、86.1%~95.8%、90.8%~97.0%和92.1%~96.6%.净化5 d后,暴露组贻贝各组织中苯系物的含量虽趋于空白组水平,但仍有一定的残留.

基于静态模型的五种苯系物在海水和厚壳贻贝中的消除规律

对静态模型中的苯(BZ)、甲苯(TU)、对二甲苯(PX)、邻二甲苯(MX)和间二甲苯(OX)5种苯系物在海水和厚壳贻贝(Mytilus coruscus)中的消除规律进行研究,在(20±0.5)℃环境温度下,以海水和厚壳贻贝为研究对象,分别添加一定浓度的5种苯系物,用顶空进样-气相色谱氢火焰离子化检测器法(HS-GCFID)分析不同时间点的5种苯系物在海水和厚壳贻贝中的残留浓度。结果表明,海水和厚壳贻贝中苯系物各组分浓度随时间变化规律基本相同,海水中5种苯系物的消除速率由大到小依次为MX、PX、TU、BZ、OX,厚壳贻贝中5种苯系物的消除速率由大到小依次为TU、BZ、MX、OX、PX,厚壳贻贝与海水的消除速率不同,其原因可能是厚壳贻贝富含脂肪、蛋白质等复杂基质,苯系物与厚壳贻贝基质的结合程度较强。

水产品鲐鱼(Pneumatophorus japonicus)细菌多样性及优势微生物分析

为研究鲐鱼(Pneumatophorus japonicus)在不同冻藏时期的优势微生物,并且得到一个较全面的细菌群落组成结构,采用16SrDNA基因克隆文库及克隆子分析等方法,分别对冻藏1d、8d和20d条件下鲐鱼鳃体系中的细菌种群多样性、优势微生物及其中产组胺菌的变化进行分析。结果表明,不同时期鲐鱼鳃内的细菌多样性均较强;冻藏1天的鳃体系中不动杆菌属(Acinetobacter)占优势为总数的77.5%,产组胺细菌如泛菌属(Pantoea)和肠杆菌属(Enterobacter)较少;第8天优势细菌种群是梭杆菌属(Fusobacteria bacterium)和希瓦氏菌属(Shewanella),而产组胺菌如发光杆菌属(Photobacterium)和弧菌属(Vibrio)较前期数量有所增加;冻藏到第20天的优势种群为哈夫尼菌属(Hafnia)和沙雷菌属(Serratia),它们均是产组胺的菌群。鲐鱼中细菌多样性及其优势微生物的变化等全面信息可为了解鲐鱼水产品组胺发生的微生物机制及其控制方法提供重要依据。

鲐鱼中产组胺菌的分离筛选与生物学特性初步研究

利用产组胺菌鉴别培养基,对鲐鱼内脏中产组胺菌进行初步筛选,结合高效液相色谱分析方法对分离菌株的产组胺能力进行了确认;并通过菌株的生理生化、形态和16SrDNA基因序列分析对分离得到的菌株进行鉴定;研究了温度和pH对菌株生长和产组胺的影响。结果表明,从鲐鱼中初步分离的4株菌(T4、T5、T6和T9)在组胺发酵培养基中能够产生164.1～466.1μg/100mL组胺;经生理生化特性及16SrDNA序列测定为相同菌种,对其中T4菌株进行进化树分析,发现菌株T4与产粘液变形杆菌相似性最高。T4菌株生长和产组胺的最适温度均为20℃,最适pH均为7。

出口金枪鱼罐头中组胺及微生物控制的HACCP应用技术研究

以金枪鱼(Skipjack Tuna)罐头生产加工过程为例,分析了生产原料及罐头生产流程各环节物料微生物变化情况,部分工艺参数对细菌总数及组胺产生的影响;确定了原料验收、解冻清洗、预蒸煮和配料封罐为主要关键控制点,并制定HACCP计划,建立相应的监控程序和纠偏措施。经HACCP计划实施前后细菌总数与组胺质量分数对比分析,结果表明解冻阶段细菌数减少约30%,成品细菌总数减少49%,成品中组胺质量分数也从3.5 mg/kg降至1.5 mg/kg,同时提高了水产制品卫生品质及保质期。

急性力竭性运动后日本黄姑鱼乳酸、糖原和葡萄糖水平变化

研究日本黄姑鱼力竭性运动后不同时间段(0、5、10、30 min)乳酸、糖原和葡萄糖含量的变化规律。结果表明,血乳酸在力竭性运动后迅速升高达到(4.497±0.503)mmol/L;肌乳酸在力竭性运动后迅速升高到达(272.041±5.760)μmol/g。血糖通过力竭运动后迅速下降,但在较短时间内恢复到静止水平。肝糖原在力竭运动后呈先下降再上升的趋势。血蛋白在力竭性运动后基本上没有明显变化,只是稍有下降。

质谱检测泰乐菌素的方法研究进展

广泛应用于医学和兽医学领域的泰乐菌素具有中谱抗菌功能和动物生长促进作用,在各种介质中的污染状况和环境行为备受关注,质谱检测技术由于具有高效、稳定、高灵敏度等特点,成为泰乐菌素检测的主要手段。重点介绍2011年以来不同基质中泰乐菌素的样品前处理方法,以及LC-ESI-MS/MS、LDTD-APCI-MS/MS、LC-SALDI-MS、LC-Q-Orbitrap等各种质谱检测技术的研究进展,以期为同类研究提供一定的参考。

超高效液相色谱-四极杆飞行时间质谱法非靶向快速筛查进口粮谷中未知的农药残留

利用快速提取农药(fast pesticide extraction,FaPEx)方法前处理样品,并结合超高效液相色谱-四极杆飞行时间质谱(UPLC-Q-TOF)技术建立了非靶向快速筛查进口粮谷中未知的多种农药残留方法。采用1%(v/v)醋酸乙腈溶液提取粮谷中未知的农药残留,FaPEx固相萃取柱净化、浓缩,UPLC-Q-TOF检测。利用目标化合物特征离子的精确质量数、同位素匹配、二级碎片信息和保留时间进行数据库匹配,筛查可疑未知农药。结果表明,该方法无需对照标准品即可快速筛查进口粮谷中的农药残留,能够应用于进口粮谷样品的实际筛查。该方法快速、准确、分析通量高,可以为进口粮谷中农药残留的快速筛查和质量控制提供重要的方法依据。

HS/GC-MS/MS法检测海产品中二甲苯

建立了顶空进样/气相色谱-串联三重四极杆质谱(HS/GC-MS/MS)检测海产品中3种二甲苯同分异构体的方法。海产品经90℃温育和振荡平衡40 min顶空进样,HP-INNOWax色谱柱分离,程序升温,在多反应监测(MRM)模式下进行GC-MS/MS检测,外标法定量。结果表明,3种二甲苯同分异构体在5.0~100.0μg/kg范围内呈良好线性,相关系数均在0.99以上,方法检出限为2.5μg/kg,定量下限为5.0μg/kg。黄鱼样品在6.0、15.0、50.0μg/kg加标水平下的平均回收率为89.6%~112.4%,相对标准偏差(RSD)不大于11.5%。采用建立的方法测定了不同海产品中二甲苯同分异构体的含量。该法操作简单、定性准确、灵敏度较高,适于海产品中二甲苯残留量的测定。

力竭性运动对日本黄姑鱼SOD和AKP酶活性的影响

[目的]研究力竭性运动前后日本黄姑鱼血清、鳃丝和肝脏中SOD酶活性、AKP酶活性和蛋白质水平的变化规律。[方法]以日本黄姑鱼为研究对象,采用超氧化物酶(SOD)测试盒和碱性磷酸酶(AKP)测试盒和考马斯亮蓝结合法分别对其SOD酶、AKP酶活性和蛋白含量进行测定。[结果]力竭性运动后,日本黄姑鱼SOD和AKP活性都急剧下降,血清、鳃丝和肝脏中SOD酶活性大小顺序是血清>肝脏>鳃丝,AKP酶活性的高低顺序为鳃丝>肝脏>血清,蛋白含量变化不显著。[结论]该研究为日本黄姑鱼的疾病防治提供理论依据和实践基础。

HPLC法快速检测记忆缺失性贝毒软骨藻酸

采用高效液相色谱法测定贝类食品中的记忆缺失性贝毒软骨藻酸。软骨藻酸经适当甲醇水提取,经过阴离子柱净化,用高效液相色谱仪进行检测,外标法定量方法。方法定量限为200μg/kg,回收率大于88.0%。该方法操作简单、快速、准确、灵敏、适用性强,能满足贝类食品中软骨藻酸的测定。

培养液组胺的检测及鲣鱼产组胺菌的生物活性评价

通过直接将培养液中的组胺经丹酰氯衍生化生成稳定的物质,以1,7-二氨基庚烷为内标,建立高效液相色谱-紫外检测器(HPLC-VWD)方法检测培养液中的组胺;并研究了温度和pH对产组胺菌生长和组胺产生的影响。结果表明,培养液中组胺的检测方法定量限为0.5μg/mL,回收率在100%～107%,满足方法培养液中组胺的检测。经分离得到的2株产组胺菌分别记为J2和J4,2株菌在添加L-组氨酸的胰酶大豆肉汤里均能够产生组胺;菌株J2和J4最适生长温度均为30℃,最适pH分别为7和6,菌株J2和J4产组胺的最适温度分别为25℃和30℃,最适pH均为5,在适宜的实验条件下组胺产生量最大值为12.47 mg/L。

基于肝脏代谢组分析研究低聚硒化氨基多糖对黑鲷的免疫调节作用

采用基于液相色谱-飞行时间质谱联用(LC-TOF-MS)技术的代谢组学方法,分析黑鲷肝脏内源性代谢物的变化,研究硒化氨基多糖增强黑鲷的免疫调节机制。采用XCMS plus 软件非靶向分析质谱采集数据,筛选潜在生物标志物,并通过MetaboAnalyst3.0网站分析相关代谢通路。结果表明,饲喂硒化氨基多糖组中的代谢物明显区分于空白组,发现并鉴定了32个有差异的生物标志物。代谢通路分析结果表明,硒化氨基多糖可通过氨基酰基-转运脱氧核糖核苷酸(tRNA)生物合成、氨基酸代谢、核苷酸代谢、氮代谢等代谢通路增强黑鲷自身的免疫机能。该研究为阐明硒化氨基多糖的免疫增强机制提供了科学依据。