穴位注射通过p38丝裂原活化蛋白激酶通路抑制变应性鼻炎大鼠黏蛋白异常分泌及鼻黏膜炎性反应

目的:观察穴位注射对变应性鼻炎大鼠鼻黏膜p38丝裂原活化蛋白激酶(MAPK)、磷酸化(p)-p38 MAPK、黏蛋白5亚型AC(MUC5AC)及血清相关炎性因子的影响,探讨穴位注射改善变应性鼻炎大鼠鼻黏膜炎性反应的作用机制。方法:SD大鼠随机分为正常组、模型组、穴位注射组和非经非穴组,每组7只。采用卵清蛋白致敏法建立变应性鼻炎大鼠模型,穴位注射组采用双侧“迎香”和“印堂”穴位注射地塞米松和1%利多卡因混合液0.05 mL进行干预,非经非穴组于非经非穴点注射作对照,隔3 d治疗1次,共4次。叠加量化计分法评估大鼠鼻部过敏症状;HE染色法观察鼻黏膜病理形态学变化;ELISA法检测血清组胺(HA)、白细胞介素(IL)-6、IL-8、肿瘤坏死因子α(TNF-α)含量;实时荧光定量PCR法检测鼻黏膜MUC5AC mRNA的表达;Western blot法检测鼻黏膜p38 MAPK、p-p38 MAPK、MUC5AC蛋白的表达。结果:与正常组比较,模型组大鼠鼻部症状积分升高(P<0.01),血清HA、IL-6、IL-8、TNF-α含量,鼻黏膜p38 MAPK、p-p38 MAPK蛋白,MUC5AC mRNA及蛋白表达均明显升高(P<0.01)。与模型组和非经非穴组比较,穴位注射组大鼠鼻部症状积分降低(P<0.01),血清HA、IL-6、IL-8、TNF-α含量及鼻黏膜p38 MAPK、p-p38 MAPK蛋白,MUC5AC mRNA及蛋白表达均明显降低(P<0.01,P<0.05)。结论:穴位注射可减少变应性鼻炎大鼠鼻部过敏症状和MUC5AC的分泌,减轻鼻黏膜炎性反应,其作用机制可能与穴位注射抑制p38 MAPK磷酸化从而减少炎性因子释放有关。

穴位注射通过Toll样受体4/激活蛋白-1信号通路纠正Th1/Th2细胞因子失衡改善变应性鼻炎大鼠炎性反应

目的:观察穴位注射对变应性鼻炎(AR)大鼠血清辅助性T细胞(Th)1/Th2相关细胞因子及鼻黏膜Toll样受体4(TLR4)、髓样分化因子88(MyD88)、激活蛋白-1(AP-1)表达水平的影响,探讨穴位注射治疗AR的作用机制。方法:SD大鼠随机分为正常组、模型组、非经非穴组、穴位注射组,每组8只。用卵清蛋白致敏法建立AR大鼠模型。穴位注射组给予地塞米松和利多卡因混合液注射双侧“迎香”和“印堂”,非经非穴组给予地塞米松和利多卡因混合液注射非经非穴处,两组均每4日治疗1次,共4次。对各组大鼠症状积分进行评定;HE染色法观察鼻黏膜组织病理形态学变化;ELISA法检测血清免疫球蛋白E(IgE)、白细胞介素(IL)-4和干扰素(IFN)-γ含量;免疫荧光染色法检测鼻黏膜组织TLR4、MyD88的表达;Western blot法检测鼻黏膜组织AP-1的表达。结果:与正常组比较,模型组症状积分显著升高(P<0.01),血清IgE、IL-4含量及鼻黏膜TLR4、MyD88、AP-1表达均显著升高(P<0.01),血清IFN-γ含量显著降低(P<0.01)。与模型组和非经非穴组比较,穴位注射组症状积分显著降低(P<0.01),血清IgE、IL-4含量及鼻黏膜TLR4、MyD88、AP-1表达均显著降低(P<0.01,P<0.05),血清IFN-γ含量显著升高(P<0.01)。模型组和非经非穴组可见鼻黏膜上皮大部分脱落,固有层血管扩张,腺体增生,伴有嗜酸性粒细胞和淋巴细胞浸润;穴位注射组上皮病变、腺体增生和炎性反应明显减轻。结论:穴位注射可有效改善AR大鼠鼻部过敏性炎性反应,其机制可能与抑制炎性信号通路TLR4/AP-1的异常激活,进而调节Th1/Th2细胞平衡有关。