目的：研究甘草苷对中波紫外线（UVB）诱导人皮肤角质形成细胞（Ha Ca T）凋亡的影响。方法：以不同浓度的甘草苷作用于Ha Ca T细胞,噻唑蓝（MTT）比色法筛选甘草苷的有效安全浓度;用30 m J·cm-2的UVB作用于Ha Ca T细胞,建立光老...目的：研究甘草苷对中波紫外线（UVB）诱导人皮肤角质形成细胞（Ha Ca T）凋亡的影响。方法：以不同浓度的甘草苷作用于Ha Ca T细胞,噻唑蓝（MTT）比色法筛选甘草苷的有效安全浓度;用30 m J·cm-2的UVB作用于Ha Ca T细胞,建立光老化模型,MTT比色法检测光老化Ha Ca T细胞增殖率;流式细胞术检测各组细胞中活性氧自由基（ROS）含量和总凋亡率;实时荧光定量PCR（Real-time PCR）检测光老化Ha Ca T细胞中半胱氨酸天冬氨酸-3（Caspase-3）,半胱氨酸天冬氨酸-9（Caspase-9）mRNA表达水平;蛋白免疫印记法（Western blot）检测光老化Ha Ca T细胞中B淋巴细胞瘤-2（Bcl-2）,Caspase-3,Caspase-9蛋白表达量。结果：筛选出甘草苷的最佳有效安全浓度为1×10-7,1×10-6,1×10-5mol·L-1。与空白组比较,UVB组细胞增殖率显著降低（P〈0.01）,细胞中ROS含量和总凋亡率显著升高（P〈0.01）,Caspase-3,Caspase-9 mRNA表达水平显著升高（P〈0.01）;Bcl-2蛋白表达量显著降低（P〈0.01）,Caspase-3,Caspase-9蛋白表达量显著升高（P〈0.01）。与UVB组比较,1×10-7,1×10-6,1×10-5mol·L-1甘草苷＋UVB组细胞增殖率显著升高（P〈0.01）;细胞中ROS含量和总凋亡率显著降低（P〈0.05,P〈0.01）,Caspase-3,Caspase-9 mRNA表达水平显著降低（P〈0.05,P〈0.01）;Bcl-2蛋白表达量显著升高（P〈0.05,P〈0.01）,Caspase-3,Caspase-9蛋白表达量显著降低（P〈0.05,P〈0.01）。结论：甘草苷能通过促进抗凋亡因子Bcl-2蛋白的表达,减少促凋亡相关细胞因子Caspase-3,Caspase-9 mRNA和蛋白的表达,从而抑制UVB诱导的Ha Ca T细胞凋亡。展开更多
文摘目的：研究甘草苷对中波紫外线（UVB）诱导人皮肤角质形成细胞（Ha Ca T）凋亡的影响。方法：以不同浓度的甘草苷作用于Ha Ca T细胞,噻唑蓝（MTT）比色法筛选甘草苷的有效安全浓度;用30 m J·cm-2的UVB作用于Ha Ca T细胞,建立光老化模型,MTT比色法检测光老化Ha Ca T细胞增殖率;流式细胞术检测各组细胞中活性氧自由基（ROS）含量和总凋亡率;实时荧光定量PCR（Real-time PCR）检测光老化Ha Ca T细胞中半胱氨酸天冬氨酸-3（Caspase-3）,半胱氨酸天冬氨酸-9（Caspase-9）mRNA表达水平;蛋白免疫印记法（Western blot）检测光老化Ha Ca T细胞中B淋巴细胞瘤-2（Bcl-2）,Caspase-3,Caspase-9蛋白表达量。结果：筛选出甘草苷的最佳有效安全浓度为1×10-7,1×10-6,1×10-5mol·L-1。与空白组比较,UVB组细胞增殖率显著降低（P〈0.01）,细胞中ROS含量和总凋亡率显著升高（P〈0.01）,Caspase-3,Caspase-9 mRNA表达水平显著升高（P〈0.01）;Bcl-2蛋白表达量显著降低（P〈0.01）,Caspase-3,Caspase-9蛋白表达量显著升高（P〈0.01）。与UVB组比较,1×10-7,1×10-6,1×10-5mol·L-1甘草苷＋UVB组细胞增殖率显著升高（P〈0.01）;细胞中ROS含量和总凋亡率显著降低（P〈0.05,P〈0.01）,Caspase-3,Caspase-9 mRNA表达水平显著降低（P〈0.05,P〈0.01）;Bcl-2蛋白表达量显著升高（P〈0.05,P〈0.01）,Caspase-3,Caspase-9蛋白表达量显著降低（P〈0.05,P〈0.01）。结论：甘草苷能通过促进抗凋亡因子Bcl-2蛋白的表达,减少促凋亡相关细胞因子Caspase-3,Caspase-9 mRNA和蛋白的表达,从而抑制UVB诱导的Ha Ca T细胞凋亡。
