酶类药物现状、问题及展望

随着生物制药的迅速发展,许多酶类药物应运而生,在治疗代谢疾病、心血管疾病、癌症等诸多疾病上发挥着越来越重要的作用。但是酶类药物也存在一些不足,如潜在的免疫原性、较短的体内半衰期,以及较差的组织靶向性,影响了酶类药物的疗效和应用。为克服这些缺点,人们已开发出多种技术,如通过糖基化、聚乙二醇修饰等分子工程技术提升酶蛋白药效,另一方面酶基因疗法也已成功用于多种酶缺陷疾病的治疗。基于酶类药物的迅速发展和广泛的应用前景,本文对酶类药物的现状进行较详细的阐述,并对酶类药物的优势、所存在的问题及未来发展趋势进行分析和评述。

蛋白质的错误折叠与疾病

蛋白质是生物体内一切功能的执行者 .人体内的任何功能 ,从催化化学反应到抵御外来侵略都是蛋白质作用的结果 .蛋白质折叠是生命活动的最基本过程 ,近年发现蛋白质的错误折叠可以导致一些疾病 .蛋白质的错误折叠与疾病的关系已成为分子生物学新的研究前沿 .介绍了细胞内保证蛋白质正常功能的“质量控制”系统 ,重点讨论了翻译后的质量控制。

Prion疾病和“proteinonly”假说

Prion病是指一类由蛋白质错误折叠导致的具有传染性的疾病 .人类的纹状体脊髓变性病、库鲁病、脑软化病 ,和致死的家族性失眠症以及动物的羊瘙痒病和牛海绵状脑炎即疯牛病 ,都是致死性的神经退行性疾病 ,它们都属于传染性海绵状脑炎 ,统称Prion病 .PrPC 是Prion蛋白在细胞内的正常形式 ,PrPSc是其致病形式 .根据“proteinonly”假说 ,PrPC 向PrPSc的转化是致病的关键步骤 .简要介绍了PrP蛋白的结构特征、PrPC 向PrPSc转化的可能机制、影响PrPC 向PrPSc转化的重要因素和PrP在细胞内的生物学过程等方面的研究进展 ,讨论了Prion疾病的诊断和治疗方法 .

ATP合成酶的结合变化机制和旋转催化──1997年诺贝尔化学奖的部分工作介绍

保罗博耶（Ｐ．Ｄ．Ｂｏｙｅｒ）教授为阐明ＡＴＰ酶作用机制所提出的结合变化机制有两个基本要点：一是ＡＴＰ合成所需要的能量原则上是用于促进酶上紧密结合的ＡＴＰ的释放和无机磷、ＡＤＰ的结合；二是在净ＡＴＰ形成过程中，酶上的各催化部位是高度协同地顺序起作用的．γ亚基在Ｆ１ＡＴＰ酶中的旋转运动使三个催化部位构象不对称是实现结合变化的基础．高分辨率牛心线粒体Ｆ１ＡＴＰ酶的晶体结构发表以后。

高等学校毕业生质量模糊综合评价方法

针对我国高等教育大众化和高校普遍扩招、人们日益关注高校毕业生质量的情况,从内外两个角度构建了一套高校毕业生的评价指标体系,通过层次分析法和模糊综合评价方法相结合,提出一种高等教育投资后评估的模糊综合方法。

试析注册会计师的审计风险及对策

审计对象业务的复杂性和范围的扩大,注册会计师的专业素质和道德水平不高、责任心和审计独立性不强,使审计风险不断加剧。要加强注册会计师的责任感和道德修养,运用现代审计技术提高自身素质,从而减少风险的产生,不断提高审计质量。

关于并购中目标企业价值评估方法的探寻

我国目前采取的企业价值评估方法主要是重置成本法,既无法适应企业价值评价的需要,也难以找到能与被评估企业直接进行比较的类似企业或可与之相比较交易的案例。现金流量贴现法、期权定价法可正确地反映企业现实的经营情况和未来的发展趋势,相对真实地反映了企业的价值,提高了评估结果的有用性。

企业资金结构及其优化

作为市场主体的企业能达到生产均衡 ,必须优化资金结构 ,使资金供给双方进入市场 ,达到信息灵敏 ,法规制约完善 。

反相胶束体系中的酶学研究

反胶束是新的酶学研究体系，酶在反胶束体系中的性质与在水溶液中相比有较大区别．评述了反胶束体系的性质及酶在其中的催化活性及构象变化，讨论了影响酶活性及构象变化的各种因素，并简单介绍了反胶束酶学研究及应用的最新进展．

脲梯度电泳方法的技术关键

介绍在应用丙烯酸胺－脲梯度电泳技术进行蛋白质折叠、去折叠研究工作中的实验步骤和技术关键，并在文献方法的基础上作了改进。通过加入１５％～０％的甘油，抵消在凝胶中由于脲浓度不同而引起的溶液粘度变化，保证在凝胶上脲浓度不同的部位对蛋白质保持同样的电泳阻力，防止前沿偏斜．采用核黄素光照催化合脲凝胶的聚合，以防止凝胶在梯度灌制完成前发生聚合．加浓缩胶和样品梳于脲梯度胶上可较好地克服边缘效应，获得好的样品迁移图谱．

磷酸丙糖异构酶的折叠及稳定性研究

从鸡胸肌中纯化出磷酸丙糖异构酶(triosephosphateisomerase,TIM),通过蛋白质内源荧光,圆二色性,紫外吸收二阶导数光谱等多种研究溶液构象的方法,对TIM被盐酸胍和热变性过程进行了详细的研究.结果表明,用不同测量方法得到TIM的变性过程均高度协同,没有观察到折叠中间态,应用单分子二态去折叠模型计算了TIM去折叠的热力学参数.通过圆二色光谱在222nm处的变化监测的TIM热变性过程也是高度协同的二态过程,天然态TIM的表观Tm为64.6℃.在低浓度盐酸胍存在下,TIM的热稳定性降低.讨论了二体蛋白质的可能去折叠机制,证明在使用的实验条件下磷酸丙糖异构酶去折叠过程中二级结构与三级结构的变化是同时发生的,其去折叠遵循观察不到二体解离的表观二态过程.

一种丙烯酰胺凝胶的新型光聚合法

以亚甲基蓝为引发剂，甲苯亚磺酸钠为还原剂，二苯氯化碘为氧化剂的丙烯酰胺凝胶光聚合方法，具有试剂配制简单，适用范围广，方法稳定性和重现性好，且聚合速度快，操作易于控制等特点，是一种不同于最为广泛使用的过硫酸铵／四甲基乙二胺和核黄素／四甲基乙二胺法的新型光聚合法．用这一方法做了ＳＤＳ和在酸性缓冲体系中的尿素变性梯度胶电泳。

乳酸脱氨酶DAB－环己烷反胶束溶液中的活性

研究了兔肌乳酸脱氢酶Ｍ４（ＬＤＨ）在十二胺丁酸盐（ＤＡＢ）－环己反烷胶束溶液中的催化活性。发现ＬＤＨ在ＤＡＢ反胶束中的催化转换数（Ｋｃａｔ）同水溶液中的相近。ＬＤＨ在ＤＡＢ反胶束中的活性随增溶水量的增加而增加，随ＤＡＢ浓度的增加而降低，文中还提出了ＬＤＨ在ＤＡＮ反胶束中的增溶方式。

二氢叶酸还原酶结合底物的去除

分析了应用氨甲蝶呤（ＭＴＸ－Ａｇａｒｏｓｅ）亲和层析法提纯的鸡肝二氢叶酸还原酶的组成和性质建立了用平面粒度胶等电聚焦法去除与酶紧密结合底物的方法．讨论了结合底物对酶构象研究的影响，并指出，用未完全去除结合底物的酶研究酶在变性过程构象变化会得到错误的结论．

独立董事制度与完善公司治理结构

针对我国公司治理结构的现状 ,提出我国上市公司建立独立董事制度的必要性 ,逐步建立适合我国国情的上市公司独立董事制度 。

巯基修饰对中华仓鼠二氢叶酸还原酶的激活

脊椎动物二氢叶酸还原酶（ＤＨＦＲ，Ｅ．Ｃ．１．５．１．３）可被多种因素激活，如中性无机盐［１］、蛋白质变性剂［１～４］、巯基修饰剂［１，４～７］等．来源于鸡肝［５］、猪肝［６］、鼠肝［７］及鼠Ｌ１２１０细胞［４］二氢叶酸还原酶的巯基修饰激活已有报道．...

铁蛋白的电子显微镜研究

铁蛋白的电子显微镜研究＊刘维１董汉民１周筠梅２李林１（１．中国科学院物理研究所和中国科学院凝聚态物理中心，北京１０００８０）（２．中国科学院生物物理研究所，北京１００１０１）＊国家自然科学基金资助项目铁蛋白是一种常见的水溶性蛋白。分子量为４５万道尔顿...

对开展企业合同审计的几点建议

开展企业合同审计,审计人员要多领域化,做到合同审计有组织保障,要找准关键点,做到事前控制;审计组织人员必须具备独立性并走法制化和规范化的道路。

中华仓鼠二氢叶酸还原酶的酶学性质研究

测定中华仓鼠二氢叶酸还原酶（ＤＨＦＲ，Ｅ．Ｃ．１．５．１．３．）催化反应的各个动力学常数，对其反应机制进行了研究。测定了不同浓度脲溶液中酶与底物的解离常数Ｋｄ和表观米氏常数Ｋｍ，结果表明酶与底物二氢叶酸（ＤＨＦ）和还原型尼克酰胺腺嘌呤二核苷酸磷酸（ＮＡＤＰＨ）的结合能力相差很小，都随脲浓度增加而减弱，而且一种底物的结合会削弱酶与另一底物的结合能力。研究了ＤＨＦＲ在脲变性过程中活力和构象的变化，结果表明低浓度脲可使稳态酶活力增强，此时酶的内源荧光发射光谱和ＣＤ谱变化很小；随脲浓度的增加，酶逐渐失活，同时荧光光谱的最大发射峰位红移，荧光强度和椭圆率也明显下降，说明酶活力的变化先于酶分子整体构象的变化，酶活性部位位于比酶分子整体更易受变性剂影响的有限区域。