干眼诊断和治疗的研究进展

干眼是多因素造成的一类泪液和眼表异常的疾病。近年来由于电视、电脑和空调的普及,环境污染加重等多方面因素,使得干眼的发病率逐年升高,已严重影响到人们的生活质量,但其诊疗规范目前仍未建立。针对目前现状,本文对干眼的诊断和治疗做一综合阐述。

基于PI3K/AKT信号通路探讨Netrin-1对糖尿病性白内障大鼠晶状体上皮细胞的保护作用

目的基于磷脂酰肌醇3激酶/蛋白激酶B(PI3K/AKT)信号通路探讨Netrin-1对糖尿病性白内障(DC)大鼠晶状体上皮细胞(LEC)的保护作用。方法将80只大鼠随机分为对照组(Control组)、模型组(Vehicle组)、治疗组(Netrin-1组)、PI3K/AKT信号通路干预组(LY294002组)。采用腹腔注射链尿佐菌素(STZ)制作大鼠DC模型,Netrin-1组玻璃体腔注射Netrin-1,LY294002组注射Netrin-1+LY294002,Control组、Vehicle组注射等体积PBS,干预1个月。采用苏木精-伊红(HE)染色观察大鼠晶状体组织病理学改变;免疫组化染色观察晶状体组织E-钙黏蛋白(E-cadherin)、基质金属蛋白酶2(MMP-2)的表达;检测晶状体组织氧化应激指标超氧化物歧化酶(SOD)、丙二醛(MDA)含量;MTT法检测LEC增殖活性;Hochest 33258染色检测LEC凋亡情况;透射电镜观察各组LEC超微结构的变化;Western blot检测晶状体组织p-PI3K、p-AKT、caspase-3蛋白表达。结果与Control组相比,Vehicle组大鼠晶状体变浑浊,条索状、片状的LEC向晶状体成纤维细胞聚集,LEC增殖活力明显降低,凋亡能力明显增加,超微结构损伤明显,E-cadherin、SOD、p-PI3K、p-AKT表达减少,MMP-2、MDA、caspase-3表达增多(P<0.05);与Vehicle组相比,Netrin-1组大鼠晶状体浑浊程度得到明显改善,可见少量LEC向晶状体纤维细胞迁移,增殖活力改善,凋亡细胞减少,细胞形态逐渐改善,E-cadherin、SOD、p-PI3K、p-AKT表达增多,MMP-2、MDA、caspase-3表达减少(P<0.05)。LY294002组晶状体损伤程度明显增加,与Vehicle组差异无统计学意义(P>0.05)。结论Netrin-1通过激活PI3K/AKT信号通路,保护晶状体组织免受高血糖诱导的氧化应激和细胞凋亡,抑制LEC的迁移和EMT,从而起到延缓糖尿病大鼠白内障进展的作用。

超声乳化人工晶状体植入术联合房角分离术治疗闭角型青光眼合并白内障的临床疗效分析

目的:探讨闭合型青光眼合并白内障应用超声乳化人工晶状体植入术与房角分离术联合治疗的临床效果。方法:选择闭角型青光眼合并白内障患者80例,均为我院眼科2015年3月至2017年3月收治,随机分组,就超声乳化人工晶状体植入术与房角分离术联合治疗(观察组,n=40)与超声乳化人工晶状体植入术与小梁切除术联合治疗(对照组,n=40)效果展开对比。结果:两组视力水平和中央前房深度术后均有程度不等的改善,观察组改善幅度较对照组更为显著(P<0.05)。两组治疗前平均眼压无差异(P>0.05),疗后第1d、第7d,观察组眼压水平高于对照组(P<0.05),术后6个月组间对比差异不明显(P>0.05)。观察组并发症率低于对照组(P<0.05)。结论:针对临床收治的青光眼合并白内镜患者,应用超声乳化人工晶状体植入术与房角分离术联合方案治疗,可显著提高视力水平,且具较高安全性。

ATF3在视神经损伤后大鼠视网膜的表达及作用

目的探讨转录激活因子3(ATF3)表达对视神经损伤后大鼠视网膜神经节细胞存活的影响。方法成年雌性SD大鼠65只,随机选取10只大鼠作为对照组,剩余55只建立大鼠视神经损伤模型作为视神经损伤组。采用实时荧光定量PCR检测两组视网膜中ATF3 mRNA的表达;对照组大鼠、视神经损伤组于感染后3,7,14,35 d采用免疫组织化学检测ATF3的表达,免疫荧光组织化学检测胶质原纤维酸性蛋白(GFAP)的表达。取40只视神经损伤大鼠随机分为4组:NC组、ATF3过表达质粒(pIRES2/ATF3)组、阴性对照(shNC)组和ATF3-shRNA组,各组大鼠分别腹腔注射生理盐水、ATF3过表达质粒转染的复合物、shNC的复合物或ATF3-shRNA表达质粒的复合物,然后感染后0,7,14,35 d,采用OCT扫描测量视网膜神经纤维层(RNFL)厚度,CCK-8法检测视网膜神经节细胞存活情况,流式细胞术检测视网膜神经节细胞凋亡情况,免疫印迹法检测Bcl-2相关X蛋白(Bax)、B淋巴细胞瘤-2(Bcl-2)蛋白的表达。结果视神经损伤组ATF3 mRNA明显高于对照组(P<0.05)。在感染后3,7,14,35 d,视神经损伤组大鼠ATF3和GFAP的表达逐渐增加,并且明显高于对照组(P<0.05)。与NC组比较,在感染后14,35 d,pIRES2/ATF3组RNFL平均厚度显著减少(P<0.05),视网膜神经节细胞存活率降低(P<0.05),pIRES2/ATF3组细胞凋亡率、Bax蛋白水平升高,Bcl-2蛋白水平降低(P<0.05)。与shNC组比较,在感染后14,35 d,ATF3-shRNA组RNFL厚度明显增加,视网膜神经节细胞存活率升高(P<0.05),细胞凋亡率、Bax蛋白水平降低,Bcl-2蛋白水平升高(均P<0.05)。结论ATF3在视神经损伤大鼠视网膜中的表达升高,ATF3能够调控视神经损伤后大鼠视网膜神经节细胞存活和凋亡能力。

二氢杨梅素诱导喉癌Hep-2细胞凋亡的机制研究

目的研究CXC趋化因子受体4(CXCR4)在二氢杨梅素诱导喉癌Hep-2细胞凋亡中的作用。方法喉癌Hep-2细胞分成对照组(0μg·mL^(-1)二氢杨梅素)、低剂量实验组(20μg·mL^(-1)二氢杨梅素)、中剂量实验组(40μg·mL^(-1)二氢杨梅素)、高剂量实验组(80μg·mL^(-1)二氢杨梅素)、高剂量实验+Vector组(80μg·mL^(-1)二氢杨梅素+pcDNA3.1)、高剂量实验+CXCR4组(80μg·mL^(-1)二氢杨梅素+pcDNA3.1-CXCR4)。以蛋白质印迹法检测CXCR4、剪切的胱天蛋白酶3(cleaved caspase-3)、糖调节蛋白78(GRP78)、CCAAT/增强子结合蛋白同源蛋白(CHOP)蛋白表达,以噻唑蓝(MTT)方法检测细胞存活率,以流式细胞术测定细胞凋亡。结果对照组、低剂量实验组、中剂量实验组、高剂量实验组、高剂量实验+Vector组、高剂量实验+CXCR4组喉癌细胞中CXCR4蛋白表达水平分别为0.58±0.04,0.45±0.04,0.36±0.06,0.28±0.03,0.27±0.05,0.53±0.08,细胞存活率分别为(100.00±7.46)%,(80.79±6.07)%,(67.33±5.55)%,(53.10±6.77)%,(52.68±6.37)%,(70.29±8.53)%,细胞凋亡率分别为(7.22±0.85)%,(9.72±0.62)%,(14.85±1.42)%,(20.70±2.17)%,(19.61±1.15)%,(14.77±1.64)%。以上指标,低、中、高剂量实验组与对照组相比,差异均有统计学意义(均P<0.05);中、低剂量实验组相比,高、中剂量实验组相比,差异均有统计学意义(均P<0.05);高剂量实验+CXCR4组与高剂量实验+Vector组相比,差异均有统计学意义(均P<0.05)。结果二氢杨梅素通过下调CXCR4调控内质网应激诱导喉癌Hep-2细胞凋亡。

膜联蛋白A5和CD147在喉癌组织中的表达

目的分别观察膜联蛋白A5(ANX A5)和细胞外基质金属蛋白酶诱导因子(CDl47在癌旁正常组织和喉癌组织中的表达情况,分析喉癌组织中ANX A5和CD147表达的相关性。方法收集2012年1月至2018年2月经川北医学院附属医院耳鼻咽喉-头颈外科手术切除,并经病理学确诊的喉癌组织标本51例和癌旁组织标本35例,运用免疫组化SP法分别检测喉癌组织标本与癌旁组织标本中ANX A5和CD147的表达情况。采用四格表χ~2检验分析不同病理、临床特点喉癌患者中ANX A5、CD147的表达情况,采用Spearman等级相关分析分析喉癌组织中ANX A5和CD147表达的相关性。结果 ANX A5和CD147在喉癌组织中的表达水平均高于癌旁组织中的表达水平(χ~2=6.939,P=0.008;χ~2=14.722,P <0.001)。与TNM分期Ⅰ～Ⅱ期患者、喉癌组织病理学分级为低-未分化患者、无颈淋巴结转移患者相比,TNM分期Ⅲ～Ⅳ期患者、喉癌组织病理学分级为高-中分化患者、存在颈淋巴结转移患者中ANX A5的表达水平更高,差异均有统计学意义(χ~2=5.298,P=0.021;χ~2=3.869,P=0.049;χ~2=8.419,P=0.004);≥60岁和<60岁患者以及不同性别患者中ANX A5的表达水平差异无统计学意义(χ~2=0.003,P=0.957;χ~2=0.082,P=0.775)。与TNM分期Ⅰ～Ⅱ期、无颈淋巴结转移患者相比,TNM分期Ⅲ～Ⅳ期、存在颈淋巴结转移的喉癌患者中CD147具有更高的表达水平,差异具有统计学意义(χ~2=14.009,P <0.001;χ~2=11.004,P=0.001);≥60岁和<60岁患者、不同性别患者以及不同病理学分级患者中CD147的表达水平差异无统计学意义(χ~2=1.546,P=0.214;χ~2=1.373,P=0.241;χ~2=0.002,P=0.964)。Spearman等级相关分析显示喉癌组织中ANX A5与CD147的表达呈正相关(r=0.918,P <0.001)。结论 ANX A5和CD147在喉癌组织中的表达水平均高于癌旁组织,且在具有不同病理、临床特点的喉癌患者中存在表达水平的差异,提示ANX A5与CD147可能参与喉癌的发生、发展。

老年翼状胬肉患者翼状胬肉切除与角膜缘干细胞移植联合治疗的疗效观察

目的:分析评估老年翼状胬肉患者实施翼状胬肉切除与角膜缘干细胞移植联合治疗的临床效果。方法:回顾性纳入的本院2018年08月至2020年07月期间295例翼状胬肉患者(共442只眼)的临床资料,根据术式差异将患者分为联合组(150例,共224只眼)和参照组(145例,共218只眼),参照组病患仅择取翼状胬肉切除手术,联合组病患于以上基础实施角膜缘干细胞移植术,比较两组病患术前及术后各时间点(1周、1个月、3个月)的BUT、SIt、UCVA、CAD、CAA,统计病患术后3个月的复发情况。结果:两组BUT在术后1周较术前显著缩短(P<0.05),而在术后1月和3月较术前显著延长(P<0.05),两组BUT在术后1周对比差别明显(P<0.05),而其他时间点对比没有明显差别(P>0.05)。两组术前术后SIt对比没有明显差别(P>0.05),术后1月和3月的两组UCVA均高于术前(P<0.05),而两组在各时间点UCVA对比没有明显差别(P>0.05),两组术后各时间点的角膜CAD较术前显著性降低(P<0.05),而两组角膜CAD在各时间点无明显差别(P>0.05)。两组术后CAA术后3月与术前比较,WR比例显著降低,AR、OA比例显著增加(P<0.05),而组间对比没有明显差别(P>0.05)。术后复发率联合组(6.67%)与参照组(32.26%)对比有明显差别(P<0.05)。结论:与翼状胬肉切除术比较,老年翼状胬肉病患实施翼状胬肉切除与角膜缘干细胞移植术联合治疗对患者早期眼表无较大影响,两种术式均不影响泪液分泌,且能够改善裸眼视力、散光度及轴向,但联合治疗在降低术后复发率方面优势明显。