360例住院患者氨基糖苷类抗感染药物使用情况分析

目的:了解氨基糖苷类抗感染药物在住院患者中的使用情况,促进临床合理用药。方法:回顾性分析2023年1月1日至6月1日某院全身性使用氨基糖苷类抗感染药物的住院患者的人口学资料、用药情况、病原学检查、联合用药情况、用药不良反应等,并进行统计分析。结果:共360例住院患者在此期间全身性使用氨基糖苷类抗感染药物,包括阿米卡星、依替米星和庆大霉素;其中男性患者251例,女性患者109例,平均年龄为(60.39±18.11)岁;患者使用氨基糖苷类抗感染药物主要用于治疗革兰阴性菌感染,且多与β-内酰胺类药物联合应用;202例为治疗用药,治疗有效率为91.09%(184/202);共有25例患者(占6.94%)用药后血肌酐水平较前明显升高;133例患者存在不合理用药,包括给药剂量不合理24例(占18.05%)、联合用药不合理39例(占29.32%)、预防用药疗程不合理52例(占39.10%)、围手术期给药时间不合理25例(占18.80%)以及预防用药选择不合理12例(占9.02%)。结论:该院全身性使用氨基糖苷类抗感染药物的临床应用总体较为合理,但仍存在用药剂量不精确、联合用药不合理等问题,应在治疗药物监测的指导下合理用药,并在用药期间密切关注肾功能相关指标的变化。

EP联合方案耐药小细胞肺癌细胞株的构建及机制探讨

目的构建依托泊苷(etoposide,VP-16)联合顺铂(cisplatin,DDP)化疗方案(EP联合方案)耐药的小细胞肺癌(small cell lung cancer,SCLC)细胞株H446/EP,并进行耐药特性鉴定及机制探讨。方法以药物浓度递增法,使用VP-16联合DDP处理NCI-H446细胞构建H446/EP细胞株。以H446/EP与NCI-H446细胞为研究对象,MTT法检测细胞活力,计算H446/EP细胞耐药指数(resistance index,RI);细胞克隆实验、Incucyte细胞增殖(无标记)法检测细胞增殖能力;转录组学测序后,对2种细胞差异表达基因进行富集分析;Western blot检测细胞耐药、DNA损伤修复(repair of DNA damage,DDR)、自噬标志分子的蛋白表达量。结果MTT结果显示,H446/EP细胞对VP-16、DDP与DOX的RI分别为6.14、3.43与1.96;细胞克隆实验与Incucyte细胞增殖(无标记)法结果显示,H446/EP细胞增殖能力显著高于NCI-H446细胞(P<0.01);转录组学测序、通路富集分析显示差异表达基因在肿瘤化疗耐药、DDR、自噬相关通路富集;Western blot结果显示,相比NCI-H446细胞,H446/EP细胞MRP1、BCRP、RAD51、γ-H2AX及LC3-II/LC3-I蛋白表达量显著升高,p62蛋白表达量显著降低(P<0.05)。结论EP联合方案耐药的SCLC细胞株H446/EP构建成功,增殖能力增强;细胞外排转运蛋白表达量增加、DDR及自噬水平升高可能是SCLC对EP联合方案产生耐药的机制。

幽门螺杆菌双亚单位表位疫苗的构建及免疫原性研究

目的构建幽门螺杆菌(Helicobacter pylori,Hp)黏附素(HpaA)和尿素酶B亚单位(UreB)双亚基多表位疫苗,并对其免疫原性进行研究。方法设计引物采用PCR法将黏附素(HpaA)的一个B细胞表位与尿素酶B亚单位的三个TH表位及一个B细胞表位串联起来(HUepi),表位之间用两个赖氨酸(KK)间隔,T-A克隆后构建融合基因表达质粒pET-22b(+)-HUepi,在大肠杆菌BL21(DE3)中表达,重组蛋白采用阳离子和疏水层析进行纯化,经鉴定后皮下免疫BALB/c小鼠,检测细胞免疫应答及体液免疫应答。结果PCR法扩增出了约233bp的目的片段;原核表达质粒pET-22b(+)-HUepi经酶切及测序鉴定,目的基因序列与设计序列一致;重组蛋白HUepi表达率约20.0%,PAGE初步测定目的蛋白的相对分子质量(Mr)约8.38×103Dr,破菌后电泳证实目的蛋白以可溶形式表达,纯化后蛋白纯度大于97.6%,经N端测序证实为设计的表位疫苗蛋白,TH表位多肽、表位疫苗蛋白及rUreB均能够刺激表位疫苗致敏的小鼠淋巴细胞增殖(SI>2),并且此疫苗能够刺激机体产生特异性抗体。结论Hp HpaA、UreB双亚基表位疫苗HUepi经基因克隆获得了较高的表达量,并初步显示了较好的免疫原性。为新一代Hp疫苗的研制奠定实验基础。

幽门螺杆菌双亚单位表位融合蛋白的构建、表达及鉴定

目的构建和表达幽门螺杆菌(Helicobacter pylori,Hp)黏附素(HpaA)和尿素酶B亚单位(UreB)表位串联体(HUepi)与大肠杆菌不耐热肠毒素B亚单位(LTB)融合蛋白(HUepi-LTB),并对其进行纯化和鉴定。方法采用PCR技术分别扩增HpaA-UreB表位多肽编码基因HUepi和LTB的编码基因LtB,重叠延伸PCR将2段基因拼接起来,T-A克隆后构建融合基因表达质粒pET-22b(+)-HUepi-LtB,经酶切鉴定后转化E.coliBL21(DE3),IPTG诱导表达,采用阳离子和阴离子交换层析进行纯化,PAGE检测、N端测序和westernblotting、ELISA检测、GM1活性检测。结果成功构建表位串联体(HUepi)与LTB融合蛋白的高效表达质粒pET-22b(+)-HUepi-LtB,重组工程菌pET-22b(+)-HUepi-LtB/BL21经IPTG诱导目的蛋白表达率约28%,PAGE初步测定目的蛋白的相对分子质量(Mr)约20.7×103,破菌后电泳证实目的蛋白以包涵体形式表达,纯化后蛋白纯度达97%,免疫学鉴定该融合蛋白与兔抗LTB抗血清可以发生特异性的结合。结论HpHpaA-UreB表位串联体(HUepi)与LTB融合蛋白(HUepi-LTB)经基因克隆获得了较高的表达量,并初步显示了较好的免疫活性。为新一代Hp疫苗的研制奠定基础。

肠道粘膜免疫系统抗原提呈细胞研究进展

肠道粘膜免疫系统持续暴露于大量种类繁多的抗原,是病原体入侵的最大门户,因此抗原识别以及产生迅速有效的免疫反应对机体来说至关重要。免疫反应产生的一个限制性步骤是抗原识别、处理与呈递。参与肠道粘膜抗原提呈的细胞及分子数量多、种类多,相互作用复杂,并且有其特有的性质。

幽门螺杆菌尿素酶表位疫苗的构建、表达及鉴定

目的构建和表达幽门螺杆菌(Helicobacter pylori,Hp)尿素酶B亚单位(UreB)表位串联体(Uepi)与大肠杆菌不耐热肠毒素B亚单位(LTB)融合蛋白表位疫苗,并对其生物学及免疫学特性进行鉴定。方法设计引物,采用PCR法分别扩增UreB表位多肽编码基因Uepi和LTB编码基因,重叠延伸PCR法将两段基因拼接,T-A克隆后,构建融合基因表达质粒pET-22b(+)-Uepi-LTB,经酶切鉴定后转化E.coliBL21(DE3),IPTG诱导表达,并对表达产物进行鉴定。结果PCR扩增出206bp和336bp的目的片段,重叠延伸PCR扩增出524bp的融合目的基因片段。原核表达质粒pET-22b(+)-Uepi-LTB经酶切及测序鉴定,与设计序列一致。重组工程菌pET-22b(+)-Uepi-LTB/BL21经IPTG诱导,目的蛋白表达率约25%,SDS-PAGE分析相对分子质量约20000,目的蛋白以包涵体形式表达,纯化后蛋白纯度达96%,Westernblot鉴定该融合蛋白与兔抗LTB多抗血清可发生特异性结合。结论HpUreB表位串联体与LTB融合蛋白的表位疫苗经基因克隆,可获得高效表达,并显示出较好的免疫活性,为新一代Hp疫苗的研制奠定基础。

基于翻转教学模式的药理学教学探析

多媒体技术和互联网的普及以及分子生物学的飞速进展,迫切需要新的药理学教学模式。"翻转课堂(FCM)"被评为2011年影响课堂教学的重大技术变革,该文首先介绍翻转课堂的内涵,对翻转课堂应用于大学药理学教学的可行性进行了分析,并提出翻转课堂应用于药理学教学设计的总体思路,最后对药理学翻转教学的实施提出了可行方案。

肠道黏膜免疫系统抗原提呈通路研究进展

抗原提呈是免疫应答过程中的核心环节,也是一个非常复杂的分子间相互作用的过程。本文以胃肠道黏膜存在的免疫细胞为基础,在细胞水平和分子水平阐述肠道黏膜免疫系统抗原提呈通路的研究新进展。

肿瘤研究的新焦点——外体

外体（exosomes）是细胞分泌的不可溶的膜性囊泡中的一种,是由脂质双层膜包绕形成的扁平半球体,直径30~100 nm,密度1.13~1.21 g/m L[1-5]。由Johnstone等[3]于1987年在网织红细胞培养液中分离并命名,后来发现多种细胞均能以胞外分泌的方式释放外体,如肥大细胞、T淋巴细胞、B淋巴细胞、血小板、肠上皮细胞、星形胶质细胞、树突状细胞、生殖细胞以及肿瘤细胞等[6-8]。

慕课——对现行高等教育的冲击与对策

"慕课"是指大规模开放网络在线课程,其所带来的变化是信息技术诞生以来的重大变革之一。该文首先阐述了"慕课"风潮可能会对我国现行高等教育带来的冲击,随后,有针对性提出相应策略以应对全球化的"慕课"风潮。

兽用中西药结合的药理与应用

从理论上讲,中医和西医有着两套完全不同的理论.中医十分强调整体现念及辨证论治,重在全身阴阳的调整,必须遵循理、法、方、药的准则.而西医是以现代医学理论为基础,利用现代诊断技术和手段对疾病进行诊断和治疗.因此在临床治疗中,西医偏重于局部(微观),注重疾病的局部表现和局部治疗,中医则偏重于整体(宏观),注重疾病的局部现象与整体联系,善于治本.

早期诊断心肌损伤肌球蛋白胶体金免疫层析法研究

目的建立一种简便、快速、准确检测人心肌损伤的胶体金免疫层析法(GICA)。方法制备胶体金标记抗Myosin多肽抗体,抗Myosin单克隆抗体,结合垫和样品垫的处理,组装免疫层析试纸条。检测患者血清中Myosin,进行敏感性和特异性评定。结果测试条灵敏度可达5ng/mL。检测30例急性心肌梗塞(AMI)患者血清Myosin水平,并与Roche肌钙蛋白胶体金免疫层析试剂条比较,符合率达84.2%。结论本方法特异性强、灵敏度高、简便快速、可用于急性心肌损伤的早期诊断。

产志贺毒素大肠杆菌stx2a和stx2b的血清和牛奶抗体检测

于新桥医院采集健康人群血清535份,两个屠宰场采集商品猪血清415份,5家奶牛场和1家奶站采集新鲜牛奶326份,用酶联免疫吸附试验(ELISA)检测血清(牛奶)中的stx2a和stx2b抗体.用P/N>2.1作为阳性判定标准,535份健康人群血清检测到stx2a抗体阳性和stx2b抗体阳性血清各21份(3.93%);415份商品猪血清检测到stx2a抗体阳性血清4份(0.96%),stx2b抗体阳性血清2份(0.48%);326份新鲜牛奶检测到stx2a抗体阳性血清25份(7.46%),stx2b抗体阳性血清21份(6.44%).牛奶中stx2抗体阳性率最高,健康人群血清次之,商品猪血清的阳性率最低.由此表明重庆市STEC菌株中携带stx2基因.

PBL教学法在心血管药理模块教学中的体会

药理学是联系医学与药学、基础医学与临床医学的桥梁课程,其中心血管系统药理内容历来是药理学教与学中的重点和难点。为提高心血管系统药理模块教学效果,将目前国际上广泛流行的PBL教学法在药理学教学实践中进行了大量的尝试,并将运用PBL教学法在药理学心血管药理模块教学中的尝试与体会进行总结。

拓展PBL教学模式改革八年制医学生药理学双语教学的思考

传统的双语教学模式不利于八年制学员思维方式的培养,也不利于发挥学员学习的主观能动性。针对存在的问题,我们思考,建立一种综合利用CBL、PBL、网络等模式和工具的全新的药理学双语教学模式,改革八年制医学生药理学双语教学,为八年制药理双语教学带来全新的气象,为培养具有创新性和国际视野的高素质、高层次人才奠定厚实的基础。

耐甲氧西林金黄色葡萄球菌IsdB活性片段的克隆、表达及抗原免疫保护性初步研究

目的探讨耐甲氧西林金黄色葡萄球菌(MRSA)抗原IsdB活性片段(IsdB2)免疫保护作用。方法利用生物信息学技术预测分析出IsdB活性片段(IsdB2),PCR扩增编码IsdB2的基因片段,亚克隆至GST标签融合表达的原核表达载体pGEX-6P-2中,将载体转化入大肠杆菌XL-1 blue,通过IPTG诱导表达IsdB2/GST融合蛋白,利用GST亲和层析初步纯化获取IsdB2蛋白。用IsdB2蛋白抗原辅以氢氧化铝佐剂对小鼠进行免疫实验,统计小鼠存活率对IsdB2抗原的免疫性进行初步研究。结果重组质粒经过BamHⅠ和NotⅠ双酶切鉴定、核酸序列测定和IPTG诱导表达IsdB2/GST及酶切获取IsdB2蛋白的SDS-PAGE分析表明,IsdB2蛋白相对分子质量大小约72 000,GST标签相对分子质量大小约26 000,与预期相符合。用IsdB2蛋白对小鼠进行3次疫苗免疫实验,IsdB2对小鼠的保护率分别为84.6%、50%和60%。结论成功构建重组表达载体pGEX-6P-2-IsdB2,利用大肠杆菌表达系统、GST亲和层析和酶切方法获得IsdB2蛋白抗原,通过3次动物疫苗免疫实验结果表明IsdB2具有免疫保护性,为研制新型有效的MRSA疫苗奠定实验基础。

加强药理学基础理论与临床相结合的教学实践

药理学是基础医学与临床医学和药学的桥梁学科,但目前基础药理学教学过程中存在与临床脱节等问题,给药理学教学带来很大困难。针对药理学教学中出现和存在的问题,进行了药理学基础理论和临床应用结合的实践研究,对改进药理学教学方法,提高药理学教学水平做出了尝试和创新。

基于主讲教员制度的药理学教学设计

教学课程设计依据不同专业人才培养方案、课程标准,选择最佳教学手段和途径,达到教学目标要求.主讲教员制度的实施使得教学课程设计更能体现教学理念,保证教学设计的实践,达到最优教学效果.

浅谈在药理学教学中实施“以学生为中心”的教学策略

以学生为中心是现代国际教育界的一个重要理念，在药理学教学中，实施以学生为中心的教学模式是培养新型医药学人才的有效方法。在药理学教学过程中怎样做到“以学生为中心”？文中提出了培养学生学习兴趣，重视学生学习需求和个性化教学，营造民主和谐、寓教于乐的课堂教学，树立全面的考试观，创造良好的课外教学环境等有效策略。

药理学实验教学多元化的探索与实践

药理学是基础与临床、药学与医学间的重要桥梁学科,其理论与实践的联系非常紧密。因此,药理学教学需强调理论与实践的有机结合,以理论教学为主,辅以实验教学验证理论知识,加强对理论知识的理解掌握。然而,传统的药理学实验教学模式存在诸多弊端,内容陈旧,形式单一,难以发挥实验教学的辅助作用。该文按照多元化创新教学理念,从药理学实验教学内容、教学方法、教学形式以及实验考核等多个层面探讨如何提升药理学实验教学水平和质量。