电针对急性心肌缺血大鼠海马谷氨酸系统的影响

目的 观察电针对急性心肌缺血(AMI)大鼠海马谷氨酸(Glu)、代谢型谷氨酸受体2/3(mGluR2/3)和凋亡相关蛋白表达的影响,探讨电针抗AMI的作用机制。方法 50只SD大鼠随机分为假手术组、模型组、电针组和抑制剂组,每组10只。除假手术组外,其余各组采用左冠状动脉前降支结扎法建立AMI大鼠模型。电针组于双侧“神门”“通里”予电针刺激,30 min/次,1次/d,连续3 d;抑制剂组于造模后30 min经侧脑室注入mGluR2/3抑制剂LY341459。HE染色观察心肌组织形态,ELISA检测心肌组织胱天蛋白酶-3(Caspase-3)活性和海马组织Glu含量,免疫荧光染色检测海马组织mGluR2/3表达,TUNEL染色检测海马组织细胞凋亡情况,Western blot检测海马组织磷脂酰肌醇3-激酶(PI3K)、蛋白激酶B(Akt)和Caspase-3蛋白表达。结果 与假手术组比较,模型组大鼠心肌细胞稀疏、肿胀,炎性细胞浸润严重;心肌组织Caspase-3活性显著升高,海马组织Glu含量、mGluR2/3阳性表达及凋亡细胞数均显著增加(P<0.01),海马组织PI3K、Akt蛋白表达显著降低,Caspase-3蛋白表达显著升高(P<0.01);与模型组比较,电针组和抑制剂大鼠心肌细胞水肿减轻,炎性细胞浸润减少,心肌组织Caspase-3活性显著降低,海马组织Glu含量、mGluR2/3阳性表达及凋亡细胞数均显著减少(P<0.01),海马组织PI3K、Akt蛋白表达显著升高,Caspase-3蛋白表达显著降低(P<0.01)。结论 电针可改善AMI大鼠心肌损伤,其机制可能与激活PI3K/Akt信号通路,进而抑制海马组织mGluR2/3过度表达、减少Glu蓄积、抑制海马神经细胞凋亡,减轻神经毒性有关。

基于PI3K/Akt信号通路探讨针刺在心肌缺血/再灌注中的研究进展

近年来针灸治疗心肌缺血/再灌注损伤(MIRI)的疗效得到广泛肯定。磷脂酰肌醇-3-激酶/蛋白激酶B(PI3K/Akt)信号通路参与细胞生长、代谢、增殖与分化等过程,与MIRI的发生发展密切相关。大量研究表明,针刺通过调控PI3K/Akt通路,从减轻炎症反应、抑制细胞凋亡等多方面保护受损心肌组织。本研究深入探讨PI3K/Akt信号通路对MIRI的保护机制及针刺的调控作用,为临床治疗心血管疾病提供实验依据。

电针心经穴位对急性心肌缺血模型大鼠内侧隔核白细胞介素-2、JunB蛋白及c-fos表达水平的影响

目的观察电针心经对急性心肌缺血(acute myocardial ischemia,AMI)大鼠内侧隔核白细胞介素(interleukin,IL)-2水平、JunB蛋白及c-fos表达水平的影响,探究内侧隔核在针刺抗AMI中的作用及机制。方法将大鼠分为伪手术组、模型组和电针组,每组6只;结扎冠状动脉左前降支复制AMI大鼠模型;电针组大鼠选取手少阴心经“神门—通里”段进行干预,每次30 min,每日1次,连续电针3 d,刺激电流为1 mA,频率为2 Hz;伪手术组、模型组大鼠不进行电针干预。采用ELISA法检测大鼠大脑内侧隔核IL-2水平,Western blot法检测大鼠大脑内侧隔核区JunB蛋白表达水平,免疫荧光法检测大鼠大脑内侧隔核区c-fos免疫反应阳性神经元表达水平。结果与伪手术组比较,模型组大鼠大脑内侧隔核区IL-2、JunB蛋白水平显著升高(P<0.05),c-fos免疫反应阳性神经元数和平均吸光度(optical density,OD)值显著增加(P<0.05);与模型组比较,电针组大鼠大脑内侧隔核区IL-2、JunB蛋白水平显著降低(P<0.05),c-fos免疫反应阳性神经元数和平均OD值显著减少(P<0.05)。结论内侧隔核参与电针心经抗AMI的作用,其机制可能与电针降低大脑内侧隔核区IL-2、JunB蛋白及c-fos表达水平有关。

华佗《内照图》灸法“灸贵调脏”思路与临床应用

“灸贵调脏”是华佗《内照图》灸治要诀之一,即候脉识病,辨证施灸,选择五脏背俞穴为主制定灸方,根据病情轻重灸药并用,采用综合灸法,注重调脏为先,兼药治六腑,调整五脏六腑平衡。

“赤凤迎源”针法溯源与探究

“赤凤迎源”针法是飞经走气四法之一,首见于明代《针灸大全·金针赋》,其将“提插”“捻转”等单式手法组合成犹如凤凰迎源的复式手法,达到“通经接气”的效用。其后《针灸问对》在延续了分天部、地部而施针的基础上,将人部加入针法中。《医学入门》则继承了《金针赋》,且将《针灸对问》忽略的呼吸进针法补充其中,最终形成了沿用至今的“赤凤迎源”针法,使该针法成为目前针灸临床常用的催气、行气手法。

电针心经对急性心肌缺血大鼠海马CA1区氧化应激及BDNF信号通路相关蛋白表达的影响

目的观察电针心经“神门-通里”段对急性心肌缺血(acute myocardial ischemia,AMI)大鼠海马CA1区超氧化物歧化酶(superoxide dismutase,SOD)、丙二醛(malondialdehyde,MDA)、脑源性神经营养因子(brain-derived neurotrophic factor,BDNF)、酪氨酸蛋白激酶B(tyrosine protein kinase,TrkB)、蛋白激酶B(protein kinase B,Akt)、磷酸化Akt(phosphorylated Akt,p-Akt)等变化的影响,分析电针心经改善AMI引发海马神经细胞损伤的机制。方法将大鼠按照随机数字表法分为伪手术组、模型组、电针组,每组10只。采用冠状动脉左前降支结扎法制备AMI大鼠模型,伪手术组仅穿线不结扎。电针组予以双侧“神门-通里”段电针治疗,电流强度1 mA,频率2 Hz,每次30 min,连续3 d,其余两组不予治疗。用PowerLab 16导生理记录仪采集心电图,并分析ST段电位;苏木精-伊红染色法观察大鼠心肌组织形态;采用ELISA法检测大鼠海马CA1区SOD、MDA含量;尼氏染色法观察大鼠海马CA1区病理形态变化;TUNEL染色法观察大鼠海马CA1区细胞凋亡率;Western blot法检测大鼠海马CA1区BDNF、TrkB、Akt、p-Akt蛋白表达水平。结果与伪手术组比较,模型组大鼠心电图ST段明显抬高(P<0.05);心肌纤维肿胀断裂,间隙扩大;海马CA1区MDA水平增加(P<0.05)、SOD水平减少(P<0.05);神经细胞数量减少,凋亡率增加(P<0.05);BDNF、TrkB蛋白表达水平及p-Akt/Akt均显著降低(P<0.05)。与模型组比较,电针组大鼠心电图ST段明显降低(P<0.05);心肌纤维部分扭曲,排列较整齐,病理改变减轻;海马CA1区MDA含量减少(P<0.05),SOD含量增加(P<0.05);神经细胞数量增加,凋亡率降低(P<0.05);BDNF、TrkB蛋白表达水平及p-Akt/Akt比值均显著升高(P<0.05)。大鼠海马CA1区BDNF、TrkB及p-Akt/Akt水平与ST段电位存在显著负相关关系。结论电针心经能有效改善AMI导致的海马神经细胞损伤,其作用可能与改善氧化应激,激活BDNF信号通路相关蛋白表达有关。

基于文献及实验探讨急性心肌缺血模型大鼠海马神经元凋亡的研究

目的 通过文献整理分析急性心肌缺血(acute myocardial ischemia, AMI)模型建模特点及表型分析的相关指标,为本文建模提供依据;动物实验研究观察AMI大鼠海马CA1区氧化应激因子及凋亡蛋白的变化,探讨心脑同病的可能机制。方法 文献研究部分以2001年1月~2021年12月为时间范围,“Acute myocardial ischemia”“急性心肌缺血”“动物实验”为主题词,检索Web of Science、中国知网、万方、维普数据库,归纳总结AMI模型建模及表型指标等特点;动物实验部分,40只健康5~6周龄SPF级SD大鼠,雄雌各半,随机分为4个组:假手术雄鼠、假手术雌鼠、LAD雄鼠、LAD雌鼠,每组10只。LAD组大鼠进行左冠状动脉前降支(left anterior descending coronary artery, LAD)结扎,假手术组只穿线不结扎。Powerlab监测心电图(ECG)变化;HE染色观察心肌组织病理改变;ELISA法检测血清心肌酶(CK-MB、cTnI)、海马CA1区氧化应激因子(MDA、SOD、Uch-L1)水平;Western Blot法检测海马CA1区细胞凋亡蛋白(Caspase-3、PARP1及Cleaved Caspase-3、Cleaved PARP1)表达。结果 (1)411篇文献分析发现,目前研究多选择SD和Wistar大鼠进行冠状动脉前降支(LAD)结扎术制备AMI模型,表型分析指标多集中于心脏形态与功能观察,有关心脏与大脑的crosstalk研究偏少;(2)动物实验结果发现,与假手术组相比,LAD雄雌大鼠心电图ST段均明显抬高,心肌细胞水肿,心肌纤维排序紊乱,广泛炎症细胞浸润,血清CK-MB、cTnI、Uch-L1表达显著增加。海马MDA、Cleaved Caspase-3/Caspase-3及Cleaved PARP1/PARP1表达升高,SOD显著降低。结论 AMI可引起海马氧化应激,诱导神经细胞凋亡,为心脑同病提供实验依据。

电针对支气管哮喘小鼠肺功能及孤束核神经元放电的影响

目的 观察孤束核在电针肺经改善支气管哮喘中的作用。方法 45只BALB/c雌性小鼠分为空白组、模型组和电针组3组,每组15只。通过腹腔注射致敏液2次,并利用1%卵清蛋白雾化7 d建立支气管哮喘小鼠模型。电针组选用双侧太渊、列缺电针干预7 d。干预结束后通过苏木素-伊红(hematoxylin-eosin, HE)染色观察各组肺组织和支气管的病理变化。利用酶联免疫吸附测定(enzyme linked immunosorbent assay, ELISA)法测定白细胞介素-1β(interleukin-1β, IL-1β)的含量。应用Ani Res2005动物肺功能分析系统记录呼吸阻力(resistance of lung, RL)和肺顺应性(dynamic compliance, Cdyn)。应用Plexon在体多通道记录系统记录各组小鼠孤束核神经元放电。结果 与空白组比较,模型组HE染色表现为支气管挛缩,肺泡腔塌陷,肺泡隔增厚,上皮细胞部分脱落,肺泡间隙有红细胞渗出和明显炎性细胞浸润,IL-1β含量明显升高(P<0.05),小鼠孤束核神经元平均每秒放电频率增加(P<0.05);与模型组比较,电针组支气管痉挛缓解,肺泡塌陷程度减轻,炎性细胞浸润情况缓解,IL-1β水平明显降低(P<0.05),孤束核神经元平均每秒放电频率较模型组减弱(P<0.05)。以浓度递升的乙酰甲胆碱溶液激发时,与空白组比较,模型组各浓度RL均呈现显著增高(P<0.05)的趋势,且模型组RL呈现剂量依赖性增高的趋势;与模型组比较,电针组RL显著降低(P<0.05)。与空白组比较,模型组各浓度Cdyn均呈现显著降低(P<0.05),且模型组Cdyn呈现剂量依赖性降低的趋势;与模型组比较,电针组Cdyn均改善(P<0.05)。孤束核神经元平均每秒放电频率与IL-1β水平呈正相关(P<0.05),与RL呈正相关(P<0.05)。结论孤束核可能参与电针肺经太渊、列缺改善支气管哮喘作用的过程。电针肺经太渊、列缺通过抑制孤束核神经元平均每秒放电频率改善支气管哮喘,有效改善肺功能损伤,减少机体炎性细胞因子水平。

应激性心肌病动物模型的研究进展

应激性心肌病(stress cardiomyopathy,SC)是一种由强烈精神刺激或躯体应激所致的急性心肌病。目前,在SC的急性或慢性阶段,能够有效降低死亡率、改善预后或预防复发的干预措施极少。因此,通过建立一种可靠、有效的SC动物模型来研究SC的发病机制及其防治方法,尤为重要。本文梳理了国内外现有SC模型的制备方法和评价指标,并展开综述,即论述了儿茶酚胺类激素注射法、束缚法、束缚联合电击法、束缚联合脱水法、迷走神经电刺激等造模方法的操作细节,以及利用旷场实验、心超、心电图、ELISA等方法对相关指标进行评价,以期为研究SC时的模型选择和建立提供有益参考。

电针心经不同经脉段对急性心肌缺血家兔心功能的影响

目的 :比较电针心经腕段、心经肘段和心经肩段对急性心肌缺血家兔心功能的影响。方法 :将动物随机分为对照组、模型组和心经腕段组、心经肘段组、心经肩段组 ,以左心室内压峰值(LVP)、左心室内压变化上升最大速率 (LVPdp/dtmax)、心力环面积 (ACFL)、心肌收缩成分最大缩短速度 (Vmax)为指标 ,观察静脉注射脑垂体后叶素造成家兔急性心肌缺血心功能各指标的变化及电针对其的干预作用。结果 :电针心经腕段、心经肘段和心经肩段均能显著性地调节心功能 ,尤以心经腕段最为显著 ,而心经肩段的调节作用似较心经肘段为强 ,但两者比较差异不显著。结论 :心经腕段作为心经经脉一特定的经脉段 ,其调节心功能作用最具代表性。

针刺心经干预急性心肌缺血大鼠心脏基因表达谱研究

目的:从基因水平揭示针刺心经干预心肌缺血的作用机制。方法:采用结扎冠状动脉前降支法复制大鼠急性心肌梗死模型。比较肺经组与模型组、心经组与模型组的心脏基因表达谱变化。结果:与模型组比较,肺经组中大于2倍的差异表达基因(包括EST)有20个下调和14个上调,主要是免疫和炎性反应相关基因,细胞信号和传递蛋白相关基因等;心经组中有70个下调和20个上调,主要是离子通道和运输蛋白相关基因,细胞凋亡和应激反应蛋白相关基因,代谢相关基因,细胞信号和传递蛋白相关基因,DNA结合、转录和转录因子类基因,免疫和炎性反应相关基因等。结论:心经组、肺经组中大于2倍的差异表达基因的数目和类型有较大差异,提示针刺心经干预心肌缺血作用有相对特异性。

电针心经、小肠经干预心肌缺血作用及机制探讨

目的观察电针心经、小肠经对急性心肌缺血模型大鼠心功能的影响,并探讨其作用机制。方法采用静脉注射脑垂体后叶素复制大鼠急性心肌缺血模型,予电排针刺激其心经“神门-通里”或小肠经“养老-支正”段经脉主干,观察其心功能变化及心率变异性改变情况。结果电针心经、小肠经可明显改善心功能,且以电针心经为著;电针心经、小肠经均可使模型大鼠心率下降,速率减慢,降幅减小,总心率变异性比值显著减小,自主神经系统动态平衡比值明显增大,与对照组比较差异有显著性。结论电针心经、小肠经均对急性心肌缺血具有保护作用,可明显促进自主神经系统动态平衡的恢复及明显提高交感神经系统兴奋性。

不同经脉电针对半结扎家兔小肠所致心脏损害的保护性影响

半结扎小肠可引起心脏的变化，肉眼可见轻度或中等度充血，部分出现心腔轻度扩大；镜下出现间质瘀血、心肌变性及灶性坏死。电针小肠经和心经均能明显减轻国半结扎小肠所致的心脏损害，与电针非经和对照组比较差异显著或非常显著，表明小肠经和心经与心脏有相关性以及小肠经与心经相关。

基因芯片技术在经脉脏腑相关研究中的应用思考

目的:探讨基因芯片技术在经脉脏腑相关研究中可能存在的应用思路及前景。方法:采用文献分析方法,回顾与分析基因芯片在生物学和医学领域中的应用现状及有关经脉脏腑相关研究成果。结果:基因芯片在生物学和医学领域中可应用于高通量基因表达平行分析、大规模基因发现及基因分析、基因多态性分析和基因组研究等,特别在表达谱中有重大应用价值;经脉脏腑相关研究须从多学科、多系统、多方位、多环节、多水平进行立体交叉研究,使之更具系统化、序贯化,而基因芯片技术应用特点可适应这一需求。结论:基因芯片技术的广泛应用将全面推动经脉脏腑相关研究工作的深入。

针刺小肠经干预急性心肌缺血大鼠心脏基因表达谱研究

目的从基因水平揭示小肠经干预心肌缺血作用分子心脏学机制。方法随机将SD大鼠分为模型组和小肠经组,采用结扎冠状动脉前降支法复制急性心肌梗死动物模型,电针手太阳小肠经“养老(SI5)-支正(SI7)”段。对两组动物心脏基因表达谱变化进行比较分析。结果与模型组比较,小肠经组共有848个差异表达基因(包括表达序列标签),其中347个表达下调,501个表达上调,表达差异大于2倍的分别有26个和18个。小肠经组差异表达大于2倍的基因主要是离子通道和运输蛋白相关基因,代谢相关基因,细胞信号和传递蛋白相关基因,DNA结合、转录和转录因子类基因,免疫和炎性反应相关基因等。结论电针小肠经可能是通过影响上述基因,从而对急性心肌缺血发挥保护作用。

心主二经论

目的 :提出“心主二经”假说。方法 :从中医、针灸古代文献及现代研究成果入手 ,分析心经、心包经与心脏之间的关系。结果 :中医藏象学说、经络学说及现代针灸经络研究成果中蕴含着丰富的“心主二经”的思想和内容。结论 :手少阴经和手厥阴经均当为心所主 ,即心主二经。

针刺心经、小肠经干预急性心肌缺血下丘脑基因表达

目的:探讨下丘脑在电针干预急性心肌缺血中的作用。方法:将SD大鼠随机分为模型组、肺经组、心经组和小肠经组。采用结扎冠状动脉前降支法复制大鼠急性心肌梗死模型。比较肺经组与模型组、心经组与模型组、小肠经组与模型组的下丘脑基因表达谱变化。结果:与模型组比较,肺经组中大于2倍的差异表达基因(包括EST)有26个下调和57个上调,心经组中有34个下调和190个上调,小肠经组中有97个下调和122个上调。就大于2倍的表达基因而言,仅仅在心经组和小肠经组出现促甲状腺激素释放激素(Trh)基因表达的明显上调和促肾上腺皮质激素释放激素(Crh)基因表达的明显下调。结论:下丘脑差异表达基因特别是Trh和Crh基因表达,可能参与了电针心经、小肠经对急性心肌缺血的保护作用。

从肺与脑关联探讨经脉脏腑脑相关的研究思路

经脉脏腑相关理论在经络理论中处于核心地位,经脉循行分布与生理病理的关系,既对临床治疗有理论指导,对于阐发古代医学思想,亦具有极其重要的作用。经脉脏腑与脑的有关研究,是中西医理论相结合的一个突破口。“肺脑轴”的发现,开启了神经免疫系疾病发展和治疗的新篇章。

基于知识模块的中医基础理论多样化教学方法探讨

中医基础理论具有中医学哲学基础、藏象理论、病因病机、防治原则四大知识模块。应针对各个教学模块的知识特点,将自主演讲式教学法、问题与课时目标相结合教学法、学习迁移法、课堂设问法、案例教学法、实验教学法、多媒体教学法等教学方法与相应的知识模块相结合,以培养学生的自主学习能力和综合素质。