水痘减毒活疫苗生产场地变更质量可比性研究

目的通过可比性研究证明水痘减毒活疫苗生产场地变更后质量的产品一致性。方法从生产用原材料、生产工艺、产品质量和稳定性等几个方面进行可比性分析,比较水痘减毒活疫苗生产场地变更前后产品质量特性。结果确认水痘疫苗生产车间场地变更前后原材料未发生改变;生产工艺未发生变化,部分工艺参数由于设备更新进行了调整但未对工艺控制造成影响;对工艺用水、疫苗质量、疫苗稳定性的关键质量指标进行统计分析,其中新车间生产的原液病毒滴度为5.0 lgPFU/mL、半成品病毒滴度为4.6 lgPFU/mL,成品中水分含量为1.0%~1.4%、病毒滴度为7.8~8.0 lgPFU/mL、热稳定性试验为6.8 lgPFU/mL与老车间同步生产的成品结果(原液病毒滴度为4.9~5.0 lgPFU/mL,半成品病毒滴度为4.5~4.6 lgPFU/mL,成品中水分含量为1.1%~1.3%、病毒滴度为7.8~8.0 lgPFU/mL、热稳定性试验为6.8 lgPFU/mL)相似,且均在2014年老车间相对应检测项目均值±3 SD范围内,新老车间成品中的牛血清白蛋白残留量和乳糖酸红霉素残留量差异均无统计学意义(t=1.50,P>0.05;t=1.00,P>0.05);加速稳定性试验和长期稳定性试验结果显示,新老车间同步生产的各3批水痘疫苗成品的数据稳定性一致,各项检测指标均符合相关规定要求;疫苗安全性均符合相关要求,新老车间同步生产的疫苗试验结果一致。结论水痘减毒活疫苗生产场地变更前后产品质量特性高度相似,场地变更未对产品的安全性和有效性产生不良影响。

细胞工厂在水痘疫苗生产中的应用

目的:提高水痘疫苗产量和厂房的利用率。方法:采用细胞工厂培养MRC-5细胞,以Roux瓶培养作对照,比较两种工艺的细胞生产情况、原液收获量等,并进行各项检定。结果:在同样细胞复苏量的条件下,采用细胞工厂比Roux瓶工艺生产的水痘疫苗产量要高,且各项检测指标均合格。结论:利用细胞工厂制备水痘疫苗,不仅提高了疫苗产量,而且节省了培养空间,降低了污染率,可用于水痘疫苗的大规模生产。

细胞工厂自动化操作系统在水痘疫苗生产中的应用

目的:应用细胞工厂自动化操作系统生产水痘疫苗,从而提高水痘疫苗产量,减少批间差异性。方法:采用细胞工厂及细胞工厂自动化操作系统进行水痘疫苗的传代制备,与人工操作细胞工厂进行传代制备作对照,比较两种操作方式的细胞生长情况、操作时间等,并对制备的原液进行各项检定。结果:在同样细胞复苏量的情况下,采用自动化操作系统比人工操作生产的水痘疫苗产量要高,批间差异小,操作时间短,且各项检测指标均合格。结论:利用细胞工厂自动化操作系统制备水痘疫苗,提高了疫苗批间均一性,降低人工劳动强度,缩短操作时间,可用于水痘疫苗的大规模生产。

疫苗生产中使用的酸性和碱性苯酚对MRC-5细胞生长的影响

目的：观察疫苗生产中使用的消毒剂酸性苯酚和碱性苯酚对M RC‐5细胞生长的影响。方法将酸性苯酚（0．37％）和碱性苯酚（0．74％）分别加入M RC‐5细胞培养瓶中，观察细胞生长形态，绘制细胞生长曲线，测定细胞贴壁率。分别采用 t检验和χ2检验对结果进行比较。结果加入酸性和碱性苯酚后，第7天的细胞数分别为6．65×10^5和7．12×10^5，与对照组（6．93×10^5）相比，差异无统计学意义（t＝0．476，P＝0．654；t＝0．334，P＝0．752）；第8小时的细胞贴壁率分别为88．3％和96．0％，与对照组（90．3％）相比，差异亦无统计学意义（χ^2＝0．765，P＝0．659；χ^2＝0．376，P＝0．585）。结论微量酸性和碱性苯酚对M RC‐5细胞的生长没有显著影响。

水痘疫苗生产工艺变更前后Oka株病毒基因序列及疫苗质量分析

目的 通过对采用细胞工厂工艺进行细胞培养前后的Oka株病毒基因序列和水痘疫苗质量进行分析比较，评价生产工艺变更对水痘疫苗质量的影响。方法 从水痘疫苗原液提取病毒基因组，采用PCR法扩增片段，通过对PCR产物测序或克隆质粒测序并拼接，获得Oka株的病毒全基因序列，并与GenBank中相关序列比对。对工艺变更前后生产的疫苗进行病毒滴度、牛血清白蛋白残留量和抗生素残留量比较。结果 工艺变更前后的疫苗病毒基因序列一致，检测到33个单核苷酸多态性位点为亲本型和疫苗型碱基共存，具有典型的Oka株特征，没有GenBank或文献报道的新突变。工艺变更前后生产疫苗的平均病毒滴度分别为5.00和5.02 lg蚀斑形成单位/ml，两者间的差异无统计学意义（t＝1.1，P＝0.26），且各项关键指标均符合企业标准和药典要求。结论 将细胞工厂引入生产工艺后，水痘疫苗具有与原工艺生产的制品相似的安全性和质量一致性。