猪塞尼卡病毒VP2 ELISA抗体检测方法的建立及初步应用

猪塞尼卡病毒(SVA)是影响我国生猪产业的一种新的重要病原,临床上主要引起猪口腔和蹄冠部水泡,与口蹄疫临床症状十分相似。为建立快速、敏感和特异的SVA血清抗体检测方法,本研究采用原核表达系统表达该病毒VP2蛋白,证实其以包涵体形式表达,纯化后获得了VP2重组蛋白。经过反应条件优化,建立了SVA VP2间接ELISA抗体的检测方法。该方法与口蹄疫病毒、猪繁殖与呼吸综合征病毒、猪圆环病毒2型、猪瘟病毒和猪伪狂犬病毒阳性血清均无交叉反应;敏感性为91.6%,批内和批间重复系数分别为11.1%和9.67%。上述结果表明该方法特异性、敏感性和重复性较好。符合率试验结果显示,该方法与血清中和抗体试验符合率为91.9%。利用本实验建立的间接ELISA抗体方法检测2016年~2019年华东地区5个省份2070份猪血清,结果显示,江苏、安徽、浙江、山东和江西省SVA抗体阳性率分别为73%、67%、69%、74%和73%;且各年度抗体阳性率均较高,其中2016年最高达86.9%。本研究为我国SVA检测和流行病学调查提供了有效方法。