家蚕葡萄糖-甲醇-胆碱氧化还原酶家族基因BmGMCβ2的克隆及序列与表达分析

葡萄糖-甲醇-胆碱氧化还原酶(glucose-methanol-choline oxidoreductases,GMC)家族是昆虫体内一大类以黄素腺嘌呤二核苷酸(FAD)为辅酶的氧化还原酶类,家蚕基因组中含有43个GMC家族基因。以家蚕5龄幼虫cDNA为模板克隆到一个家蚕GMC家族基因,命名为BmGMCβ2(GenBank登录号:JQ965926)。该基因cDNA全长1 875 bp,编码624个氨基酸,预测蛋白质分子质量为69.3 kD,pI为6.21,定位于家蚕16号染色体的nscaf3058上,编码蛋白质含GMC家族共有的ADP-bindingβ-α-β折叠结构域。系统发育分析表明该基因是家蚕GMC家族β亚家族基因成员。RT-PCR检测家蚕不同发育时期和5龄第3天幼虫不同组织中BmGMCβ2基因mRNA转录水平,以5龄盛食期最高,并且主要在表皮、脂肪体和气管中转录表达;Westernblotting分析BmGMCβ2蛋白主要在5龄第3天幼虫的脂肪体中表达。将BmGMCβ2克隆到原核表达载体pET-28a(+)中,转化E.coli BL21表达菌株,IPTG诱导表达BmGMCβ2融合蛋白,通过His-亲和层析得到纯化的融合蛋白并制备多克隆抗体,为后续研究该蛋白在家蚕生长发育过程中的功能奠定了基础。

有关达靼族属的若干问题

关于达靼的族属,最早提到它的是北宋初的宋白。《资治通鉴》卷二五三广明元年(880年)七月:“李琢、赫连铎进攻蔚州,李国昌战败,部众皆溃,独与克用及宗族北入达靼。”胡注引宋白曰:“达靼者,本东北方之夷,盖靺鞨之部也。贞元、元和之后,奚、契丹渐盛,多为攻动,部众分散,或投属契丹、或依于渤海,渐流徙于阴山。

我国公立医院融资模式的探究

公立医院是我国医疗服务的主要提供者,但由于其对外融资受到了外部政策、行业特征的双重制约,导致其发展所需的资金不足,亟待构建合规的融资模式。本文对国内外公立医院融资的研究进行了总结,并提出在构建融资模式时,应着重考虑模式合规性、对社会资本的激励约束机制这两个关键因素。在此基础上,本文针对国内实务中最常使用的PPP、租赁加分成、公司现金流这三种融资模式,分别分析了其构建要点、合规性和激励约束机制,并分析了各模式存在的问题。此外,本文针对现有融资模式存在的问题,提出了三种创新性的融资方案及其合规性依据。最后,就如何支持公立医院融资,本文分别从金融机构、卫健委、财政部门和公立医院的角度给出了对策建议。