穴位注射通过p38丝裂原活化蛋白激酶通路抑制变应性鼻炎大鼠黏蛋白异常分泌及鼻黏膜炎性反应

目的:观察穴位注射对变应性鼻炎大鼠鼻黏膜p38丝裂原活化蛋白激酶(MAPK)、磷酸化(p)-p38 MAPK、黏蛋白5亚型AC(MUC5AC)及血清相关炎性因子的影响,探讨穴位注射改善变应性鼻炎大鼠鼻黏膜炎性反应的作用机制。方法:SD大鼠随机分为正常组、模型组、穴位注射组和非经非穴组,每组7只。采用卵清蛋白致敏法建立变应性鼻炎大鼠模型,穴位注射组采用双侧“迎香”和“印堂”穴位注射地塞米松和1%利多卡因混合液0.05 mL进行干预,非经非穴组于非经非穴点注射作对照,隔3 d治疗1次,共4次。叠加量化计分法评估大鼠鼻部过敏症状;HE染色法观察鼻黏膜病理形态学变化;ELISA法检测血清组胺(HA)、白细胞介素(IL)-6、IL-8、肿瘤坏死因子α(TNF-α)含量;实时荧光定量PCR法检测鼻黏膜MUC5AC mRNA的表达;Western blot法检测鼻黏膜p38 MAPK、p-p38 MAPK、MUC5AC蛋白的表达。结果:与正常组比较,模型组大鼠鼻部症状积分升高(P<0.01),血清HA、IL-6、IL-8、TNF-α含量,鼻黏膜p38 MAPK、p-p38 MAPK蛋白,MUC5AC mRNA及蛋白表达均明显升高(P<0.01)。与模型组和非经非穴组比较,穴位注射组大鼠鼻部症状积分降低(P<0.01),血清HA、IL-6、IL-8、TNF-α含量及鼻黏膜p38 MAPK、p-p38 MAPK蛋白,MUC5AC mRNA及蛋白表达均明显降低(P<0.01,P<0.05)。结论:穴位注射可减少变应性鼻炎大鼠鼻部过敏症状和MUC5AC的分泌,减轻鼻黏膜炎性反应,其作用机制可能与穴位注射抑制p38 MAPK磷酸化从而减少炎性因子释放有关。

穴位注射通过Toll样受体4/激活蛋白-1信号通路纠正Th1/Th2细胞因子失衡改善变应性鼻炎大鼠炎性反应

目的:观察穴位注射对变应性鼻炎(AR)大鼠血清辅助性T细胞(Th)1/Th2相关细胞因子及鼻黏膜Toll样受体4(TLR4)、髓样分化因子88(MyD88)、激活蛋白-1(AP-1)表达水平的影响,探讨穴位注射治疗AR的作用机制。方法:SD大鼠随机分为正常组、模型组、非经非穴组、穴位注射组,每组8只。用卵清蛋白致敏法建立AR大鼠模型。穴位注射组给予地塞米松和利多卡因混合液注射双侧“迎香”和“印堂”,非经非穴组给予地塞米松和利多卡因混合液注射非经非穴处,两组均每4日治疗1次,共4次。对各组大鼠症状积分进行评定;HE染色法观察鼻黏膜组织病理形态学变化;ELISA法检测血清免疫球蛋白E(IgE)、白细胞介素(IL)-4和干扰素(IFN)-γ含量;免疫荧光染色法检测鼻黏膜组织TLR4、MyD88的表达;Western blot法检测鼻黏膜组织AP-1的表达。结果:与正常组比较,模型组症状积分显著升高(P<0.01),血清IgE、IL-4含量及鼻黏膜TLR4、MyD88、AP-1表达均显著升高(P<0.01),血清IFN-γ含量显著降低(P<0.01)。与模型组和非经非穴组比较,穴位注射组症状积分显著降低(P<0.01),血清IgE、IL-4含量及鼻黏膜TLR4、MyD88、AP-1表达均显著降低(P<0.01,P<0.05),血清IFN-γ含量显著升高(P<0.01)。模型组和非经非穴组可见鼻黏膜上皮大部分脱落,固有层血管扩张,腺体增生,伴有嗜酸性粒细胞和淋巴细胞浸润;穴位注射组上皮病变、腺体增生和炎性反应明显减轻。结论:穴位注射可有效改善AR大鼠鼻部过敏性炎性反应,其机制可能与抑制炎性信号通路TLR4/AP-1的异常激活,进而调节Th1/Th2细胞平衡有关。

穴位埋线联合艾灸对溃疡性结肠炎大鼠结肠组织IL-6/JAK/STAT3信号通路的影响

目的:观察“天枢”“大肠俞”“上巨虚”穴位埋线联合艾灸对溃疡性结肠炎(UC)大鼠结肠组织白细胞介素-6(IL-6)含量及酪氨酸激酶(JAK)、信号转导及转录激活因子3(STAT3)表达的影响,探讨穴位埋线联合艾灸治疗UC的可能机制。方法:SD大鼠随机分为正常组、模型组、埋线组、艾灸组、联合组,每组6只。采用三硝基苯磺酸/乙醇灌肠法制备UC大鼠模型。穴位选取双侧“天枢”“大肠俞”“上巨虚”。埋线组予埋线治疗,1次/7d,共2次。艾灸组予艾条温和灸治疗,10min/次,1次/d,共14d。联合组予艾条温和灸治疗,并于6h后进行埋线治疗,方法、疗程同埋线组、艾灸组。HE染色法观察结肠组织形态变化,ELISA法检测结肠组织IL-6含量,免疫组织化学法和Western blot法检测结肠组织JAK和STAT3的表达。结果:正常组大鼠结肠黏膜结构完整,无炎性细胞浸润;模型组大鼠结肠上皮组织结构破损模糊,大量炎性细胞浸润;埋线组、艾灸组和联合组大鼠结肠上皮组织损伤均有不同程度改善,联合组改善最明显。与正常组比较,模型组结肠组织IL-6含量及JAK、STAT3蛋白表达均明显升高(P<0.01)。与模型组比较,埋线组、艾灸组、联合组结肠组织IL-6含量及JAK、STAT3蛋白表达均明显降低(P<0.05,P<0.01)。与埋线组和艾灸组比较,联合组结肠组织JAK、STAT3蛋白表达降低更明显(P<0.01)。结论:埋线联合艾灸干预能有效下调IL-6含量及JAK和STAT3的表达,抑制炎性信号通路IL-6/JAK/STAT3的活化,促进损伤结肠组织的修复。

穴位注射结合不同刺灸方法对变应性鼻炎大鼠鼻黏膜辅助性T淋巴细胞相关细胞因子表达的影响

目的:观察穴位注射基础上艾灸、埋线、针刺对变应性鼻炎(AR)大鼠行为学、鼻黏膜炎性反应及γ干扰素(IFN-γ)和白细胞介素-4(IL-4)表达的影响,探讨不同刺灸方法的增效作用及相关作用机制。方法:SD大鼠随机分为正常组、模型组、穴注组、穴注加艾灸组、穴注加埋线组、穴注加针刺组,每组8只。采用卵清蛋白致敏法制备AR模型。穴位注射组于“印堂”“迎香”进行穴位注射,隔3 d治疗1次,共4次。穴注加艾灸组、穴注加埋线组、穴注加针刺组均在穴位注射基础上于“肺俞”“足三里”分别进行温和灸、埋线、针刺治疗,温和灸和针刺每日1次,共14次,埋线每周1次,共2次。观察其行为学变化并进行症状积分评定,HE染色法观察鼻黏膜组织形态变化,免疫组织化学法和Western blot法检测鼻黏膜组织IFN-γ和IL-4阳性细胞表达及蛋白表达水平。结果:与正常组比较,模型组症状积分和鼻黏膜IL-4阳性细胞及蛋白表达升高(P<0.05),鼻黏膜IFN-γ阳性细胞及蛋白表达降低(P<0.05)。与模型组比较,各治疗组症状积分和鼻黏膜IL-4阳性细胞及蛋白表达降低(P<0.05),鼻黏膜IFN-γ阳性细胞及蛋白表达增加(P<0.05)。与穴注组比较,穴注加艾灸组、穴注加埋线组、穴注加针刺组症状积分和鼻黏膜IL-4阳性细胞及蛋白表达降低(P<0.05)、穴注加艾灸组降低最明显(P<0.05),鼻黏膜IFN-γ阳性细胞及蛋白表达增加(P<0.05)、穴注加艾灸组增加最明显(P<0.05)。结论:穴位注射基础上艾灸、埋线和针刺对AR的治疗有增效作用,艾灸优于针刺和埋线,其作用机制可能是通过下调IL-4表达和上调IFN-γ的表达而实现的。