基于“心与小肠相表里”探讨心肌缺血再灌注损伤的防治策略

基于中医“心与小肠相表里”的理论内涵,肠道菌群失调、肠道菌群代谢产物与心肌缺血再灌注损伤(MIRI)的联系,中医药调节肠道菌群防治MIRI,探讨肠道菌群作为防治MIRI潜在靶点的内在机制,旨在为MIRI的防治提供理论依据。

河豚毒素软胶囊的制备工艺及其药效学研究

目的研究河豚毒素软胶囊的制备工艺。方法通过单因素考察确定河豚毒素软胶囊的处方及工艺,并通过小鼠热板法考察河豚毒素软胶囊的镇痛作用。结果最佳制备条件:司盘80为增溶剂,维生素E为抗氧化剂,尼泊金乙酯为防腐剂,搅拌时间为90 min,明胶∶甘油∶水=1.0∶0.3∶1.0。结论制备的TTX软胶囊具有良好的镇痛作用。

肉苁蓉颗粒剂对帕金森病大鼠模型黑质纹状体多巴胺能神经元的保护作用研究

目的:探讨肉苁蓉颗粒剂对帕金森病大鼠模型黑质纹状体多巴胺能神经元的保护作用。方法:采用6-羟基多巴胺单侧双靶点颅内定向注射法制备帕金森病大鼠模型,3周后据阿朴吗啡诱导的不自主运动,筛选造模成功大鼠,随机分为空白组,模型组,假手术组,肉苁蓉颗粒剂低剂量组(1 g·kg-1·d-1)和肉苁蓉颗粒剂高剂量组(3 g·kg-1·d-1),灌胃相应药物共4周。记录阿朴吗啡诱导的大鼠向健侧旋转的圈数;采用免疫组化研究观察黑质内酪氨酸羟化酶(TH)的表达;和免疫印迹法检测(Western-blot)观察纹状体内α-突出核蛋白(α-synuclein)、酪氨酸羟化酶(TH)、多巴胺转运蛋白(DAT)的表达;高效液相色谱-质谱联用(HPLC-MS/MS)法检测定大鼠纹状体多巴胺(DA)、3,4-二羟基苯乙酸(DOPAC)、高香草酸(HVA)的含量。结果:用药4周后,肉苁蓉组向健侧旋转的圈数与模型组比较明显减少(P<0.05),黑质内TH阳性细胞较模型组明显增多,纹状体内α-synuclein表达下调、TH、DAT表达上调。纹状体DA、DOPAC含量明显升高(P<0.05或P<0.01)。高剂量组效果优于低剂量组。结论:肉苁蓉颗粒对帕金森病大鼠模型黑质和纹状体的多巴胺能神经元具有神经保护作用。

超高效液相色谱-质谱联用法测定不同粒径活血散透皮吸收液中4种成分含量

目的比较粒径分别为0.150,0.075,0.048,0.038 mm的活血散透皮吸收前后的大黄素、黄柏碱、小檗碱、药根碱的含量,确定活血散的最佳粒径。方法采用超高效液相-质谱联用技术,对不同粒径活血散透皮吸收液24 h内大黄素、黄柏碱、小檗碱、药根碱的含量进行测定,比较各有效成分的含量,确定活血散的最佳粒径。结果粒径0.075 mm的活血散各有效成分含量较高,透皮吸收后各有效成分含量也较高。结论活血散以粒径0.075 mm的散剂最佳。

活血散的质量标准研究

目的：建立活血散的质量标准。方法：采用显微鉴别法对散剂中天南星、土鳖虫、黄柏、地肤子进行定性鉴别。采用高效液相色谱法对制剂中黄柏碱、虎杖苷、药根碱、小檗碱、大黄素的含量进行测定：色谱柱为ZORBAX Eclipse Plus C18,流动相为甲醇-0.1%磷酸（梯度洗脱）,流速为0.4 ml/min,检测波长为240 nm,柱温为30℃,进样量为5μl。结果：天南星、土鳖虫、黄柏、地肤子的显微鉴别图谱清晰。黄柏碱、虎杖苷、药根碱、小檗碱、大黄素检测进样量线性范围分别为0.159-5.073μg（r=0.997 4）、0.149-4.761μg（r=0.999 9）、0.239-7.649μg（r=0.995 5）、0.165-5.268μg（r=0.997 2）、0.012-0.382μg（r=0.999 9）;精密度、稳定性、重复性试验的RSD〈3.0%;加样回收率分别为98.9%-104.1%（RSD=1.9%,n=6）、96.1%-101.7%（RSD=2.5%,n=6）、99.6%-105.1%（RSD=2.6%,n=6）、90.3%-98.2%（RSD=2.9%,n=6）、92.9%-96.4%（RSD=2.0%,n=6）。结论：该研究所建标准可用于活血散的质量控制。

止痒乳膏对豚鼠变应性接触性湿疹模型皮损及组织形态学的影响

目的观察止痒乳膏对豚鼠变应性接触性湿疹的抑制作用。方法采用2,4-二硝基氯苯(DNCB)建立豚鼠变应性接触性湿疹模型,以青鹏软膏为阳性对照,以基质乳膏为阴性对照,评价止痒乳膏对模型动物皮损及组织形态学改变的影响。结果经治疗两周,与模型组比,止痒乳膏大、中、小剂量组皮损症状评分及(病理组织学检查)炎性细胞计数明显降低,各治疗组的疗效指数均大于40%。与模型组比,止痒乳膏各组右耳肿胀值显著降低,且大剂量组与青鹏软膏组比较有显著性差异;病理组织学检查显示,止痒乳膏各组可不同程度使表皮完整性及角质松解程度减轻、真皮层炎性细胞浸润减少。止痒乳膏对以上各指标均显示出良好的量效关系,随剂量增加作用增强。结论止痒乳膏对豚鼠变应性接触性湿疹具有明显抑制作用,其疗效主要表现为抗炎、抗变态反应及减轻皮损。

冠心Ⅴ号颗粒制备工艺优选

目的优选冠心Ⅴ号颗粒的制备工艺。方法采用正交试验法,对冠心Ⅴ号颗粒的醇水双提工艺条件进行优化,并进行制粒工艺研究。结果该颗粒的最佳醇提工艺为加6倍量75%乙醇,回流2 h,最佳水提工艺为加6倍量水,煎煮1.5 h,煎煮2次。稠膏与糊精按1∶3混合,润湿剂为90%乙醇。结论优选的冠心Ⅴ号颗粒制备工艺稳定可行。

高效液相色谱法测定癌痛宁巴布剂中乌头碱的含量

目的建立癌痛宁巴布剂中乌头碱的含量测定方法。方法高效液相色谱（HPLC）法，采用Kromasil C18柱（4．6mm×250mm），流动相为甲醇-0．2％三乙胺（66：34），测定波长为230nm，流速为1．0mL／min，柱温为30℃。结果乌头碱在0．126-0．630μg的范围内的范围内线性关系良好，r=0．9999，平均回收率为97．47％，RSD为1．2％。结论方法简便可行，重现性好．可用于癌痛宁巴布剂的质量控制。

正交试验设计优化超声煎煮法提取丹参中丹参素的研究

目的探讨超声煎煮对丹参提取效果的影响,并筛选出最佳工艺。方法以丹参素含量为指标,对丹参进行超声煎煮正交实验,筛选出最佳提取工艺条件,并与煎煮提取法进行比较研究。结果超声时间和煎煮次数对试验结果有显著影响,而煎煮时间对结果无显著影响。最佳提取工艺为超声10分钟,煎煮20分钟,煎煮3次。结论所筛选出的最佳提取工艺合理、可行,在提取丹参中丹参素时,超声煎煮法优于煎煮法。

HPLC法测定冠心Ⅴ号合剂中丹参酮ⅡA含量

目的：建立测定冠心Ⅴ号合剂中丹参酮ⅡA含量的HPLC方法。方法：采用高效液相色谱法,以甲醇-水（80∶20）为流动相,色谱柱为Kromasil C18柱（4.6mm×250mm,5μm）,柱温为30℃,流速为1.0mL·min-1,检测波长为270nm。结果：丹参酮ⅡA在0.012 5~0.360 0μg范围内呈良好的线性关系,平均回收率为98.06%。结论：本方法简便可行、重复性好,可用于测定冠心Ⅴ号合剂中丹参酮ⅡA的含量。

多指标正交试验优选止痒乳膏提取工艺

目的优选止痒乳膏的最佳提取工艺。方法采用正交试验法,以盐酸小檗碱、芍药苷的含量及干浸膏得率为指标,多指标综合评分法处理数据,优化溶剂用量、提取次数和提取时间3个因素。结果止痒乳膏的最佳提取工艺为加6倍量水,煎煮3次,提取40 min。结论优选得到的止痒乳膏提取工艺稳定合理可行。

桑蒺颗粒的制备工艺及质量研究

目的筛选和优化桑蒺颗粒中原药材的提取工艺及制备工艺进行。方法采取正交试验,以芦丁的含量及醇提浸出物的得率作为醇提工艺的评价指标,以绿原酸的含量及水提浸出物的得率作为水提工艺的评价标准,以颗粒的成型率作为制备工艺的评价参数。结果桑蒺颗粒中醇提工艺最优加乙醇量为10倍,乙醇浓度为70%,且回流1 h;水提工艺最优为加8倍量水,且煎煮3次,提取时间为60 min;选择糊精作为桑蒺颗粒的辅料,乙醇浓度为65%制备工艺为最优,且颗粒成型率较高。结论优选桑蒺颗粒中原药材的最佳提取工艺及制剂成型工艺稳定可行。

UPLC-MS/MS法同时测定止痒乳膏中10个成分的含量

目的:建立超高效液相色谱-串联质谱法(UPLC-MS/MS)同时测定止痒乳膏中10个主要成分(氧化苦参碱、黄柏碱、芍药苷、升麻素苷、药根碱、小檗碱、巴马汀、大黄素、大黄酚、大黄素甲醚)的含量。方法:采用ZORBAX Eclipse Plus C18色谱柱(2.1 mm×50 mm,1.8μm),以甲醇(A)-0.1%甲酸水溶液(B)为流动相,梯度洗脱(0~4 min,5%A→28%A;4~10 min,28%A→30%A;10~11 min,30%A→73%A;11~16 min,73%A→75%A),流速0.4 m L·min^(-1),柱温30℃;采用电喷雾离子源(ESI),多反应监测模式(MRM),正负离子同时检测。结果:氧化苦参碱、黄柏碱、芍药苷、升麻素苷、药根碱、小檗碱、巴马汀、大黄素、大黄酚、大黄素甲醚的线性范围分别为4.526~452.6μg·m L^(-1)(r=0.999 2)、1.625~32.50μg·m L^(-1)(r=0.999 0)、7.500~150.0μg·m L^(-1)(r=0.998 7)、3.626~181.3μg·m L^(-1)(r=0.998 9)、0.155 0~3.100μg·m L^(-1)(r=0.999 3)、3.376~168.8μg·m L^(-1)(r=0.996 4)、0.015 50~15.50μg·m L^(-1)(r=0.999 6)、0.122 5~24.50μg·m L^(-1)(r=0.999 8)、0.069 00~1.380μg·m L^(-1)(r=0.996 8)和0.016 30~0.815 0μg·m L^(-1)(r=0.998 9);平均加样回收率(n=6)均在96.53%~100.2%范围内,RSD均小于2.04%。3批样品中氧化苦参碱、黄柏碱、芍药苷、升麻素苷、药根碱、小檗碱、巴马汀、大黄素、大黄酚和大黄素甲醚含量测定结果分别为2.98~3.17、0.24~0.25、1.69~1.75、0.19、0.003 6~0.004 3、0.30~0.31、0.004 0~0.004 3、0.023~0.026、0.018~0.020和0.000 9~0.001 1 mg·g^(-1)。结论:该测定方法测定结果可为止痒乳膏的质量控制提供依据。

UPLC法同时测定止痒洗剂中盐酸小檗碱、芍药苷和大黄素的含量

目的采用超高效液相色谱（UPLC）方法,同时测定止痒洗剂中盐酸小檗碱、芍药苷和大黄素的含量。方法采用Aglient ZORBAX Eclipse Plus C18色谱柱（2.1×50 mm,1.8μm）,流动相为甲醇-0.1%磷酸水溶液,进行梯度洗脱,流速为0.4 m L·min-1,检测波长为240 nm,柱温为30℃。结果盐酸小檗碱、芍药苷和大黄素分别在0.0346-0.4152μg,0.3190-3.8280μg,0.0250-0.3000μg范围内呈良好的线性关系;平均回收率分别为96.44%,95.62%和96.48%。结论该方法简便、准确、重复性好,可为制定止痒洗剂质量标准及产品质量控制提供依据。

HPLC法同时测定冠心Ⅴ号颗粒中丹参素和丹参酮ⅡA的含量

目的建立同时测定冠心V号颗粒中丹参素和丹参酮ⅡA含量的HPLC方法。方法采用高效液相色谱法，以甲醇一0．5％醋酸水溶液梯度洗脱，色谱柱为KromasilC18柱（4．6×250mm，5μm），流速为1．0mL·min－1，检测波长为281nm，柱温为35℃。结果丹参素和丹参酮ⅡA分别在0．1～0．8μg和0．02-0．16μg范围内呈良好的线性关系；平均回收率分别为100．17％和99．35％。结论本方法简便可行、重复性好，可用于同时测定冠心V号颗粒中丹参素和丹参酮ⅡA的含量。

桑蒺颗粒中陈皮、枳壳挥发油的提取及β-环糊精包合工艺

目的:优选桑蒺颗粒中陈皮、枳壳挥发油的最佳提取及包合工艺。方法:采用正交试验法,以挥发油提取量为评价指标,优化加水量、浸泡时间和提取时间3个因素,优选挥发油提取工艺;以挥发油包合率和包合物收率为评价指标,优化挥发油︰β-环糊精(β-CD)、包合温度和包合时间,优选挥发油包合工艺;采用显微镜、薄层色谱及加速试验对所得包合物进行表征。结果:桑蒺颗粒中陈皮、枳壳挥发油的最佳提取工艺为加8倍量水,浸泡0.5 h,提取6 h;最佳包合工艺为挥发油与β-CD比例1∶10,在40℃下包合0.5 h;3项表征试验均证实挥发油已包合于β-CD内。结论:优选的桑蒺颗粒中陈皮、枳壳挥发油的最佳提取及包合工艺稳定可行。

HPLC法测定河豚毒素原料药的含量及有关物质

目的建立以高效液相色谱法测定河豚毒素原料药含量及其有关物质的方法。方法色谱柱为PhecdaDiol柱（4．6mm×250mm，5μm），流动相为乙腈-0．3％甲酸[／10mmol甲酸铵溶液（83：17）（v／v），流速为1．0mL·min-1，检测波长为196nm，柱温为30℃。结果主峰能与相邻杂质峰较好分离，TTX检测浓度的线性范围为60～40μg·mL-1（r=0．9999），检测限为10ng（S／N=3）。结论该方法简便、准确、专属性强，可用于河豚毒素的含量测定和有关物质的检查。

冠心Ⅴ号合剂HPLC指纹图谱研究

目的建立冠心Ⅴ号合剂的HPLC指纹图谱分析方法。方法采用Diamonsil C_(18)柱(4.6 mm×250 mm,5μm),检测波长:270 nm;以甲醇(A)-0.1%甲酸水溶液(B)为流动相,梯度洗脱;柱温:30℃;流速:1.0mL·min^(-1)。采用中药色谱指纹图谱相似度评价系统软件(2004A版),确定共有峰,计算相似度,并对其色谱峰进行了指认和归属。结果通过10批样品的测定,建立冠心Ⅴ号合剂HPLC指纹图谱,得到16个共有峰,相似度均在0.98以上。所建立的指纹图谱可用于冠心Ⅴ号合剂的定性鉴别。结论所建立方法专属性强、准确可靠、重复性好,为冠心Ⅴ号合剂的质量控制提供了有效方法。

基于“异类相制”理论的雷公藤复方配伍对CYP450酶系的影响

目的:以"异类相制"理论为指导,观察雷公藤不同中药复方配伍后对雷公藤肝脏毒性的影响,并探讨其机制。方法:将SD大鼠随机分为8组,分别为:空白组、雷公藤单药组、清络通痹复方组、雷公藤多苷片组、雷公藤+生地黄组、雷公藤+三七组、雷公藤+青风藤组、雷公藤+僵蚕组,灌胃给药30d。以生化和病理检查综合评估肝毒性,并采用"Cocktail"底物探针法评价雷公藤的不同配伍对大鼠肝微粒体体外温孵体系中细胞色素P450酶(CYP450)各亚型的影响。结果:雷公藤单药组、雷公藤多苷片组、雷公藤+青风藤组、雷公藤+僵蚕组与空白组比较可见多项生化指标明显差异,服用清络通痹复方、配伍三七或生地黄可较单药组降低ALT、AST指标(P<0.01,P<0.05)。病理检查回示,雷公藤和不同配方组合应用后,肝细胞损伤程度减轻。各用药组较空白组CYP3A、CYP2C9、CYP2C19的特异性底物终浓度增高,其羟基化代谢产物终浓度下降(P<0.05,P<0.01),提示服用雷公藤可导致肝内CPY3A、CYP2C9,CPY2C19酶活性的下降。和单药组对比,雷公藤经配伍后均可改善单药对CYP3A和CYP2C19的抑制。其中,三七对改善雷公藤单药对CYP3A的抑制作用比较明显(P<0.05),而生地黄对改善雷公藤单药对CYP2C19的抑制作用比较明显(P<0.05)。结论:清络通痹复方配伍可明显减轻雷公藤的肝毒性。经一一拆方与雷公藤配伍后,发现雷公藤与生地黄和三七配伍后可减轻其肝毒性,其减毒机制可能与生地黄和三七缓解了雷公藤对CYP3A和CYP2C19的抑制相关。