冠蛋白1参与分枝菌酸诱导巨噬细胞的泡沫化

目的研究巨噬细胞冠蛋白1(coronin-1)与分枝菌酸(MA)诱导巨噬细胞泡沫化的相关性及其可能机制。方法根据冠蛋白1表达水平的差异,实验分为RAW264.7-Cor.Plus、RAW264.7和RAW264.7-Cor.Minus三组。各组细胞经100μg/m L MA包被的聚苯乙烯微球作用24 h后提取总蛋白,用Western blot法检测细胞冠蛋白1的表达水平。分别用(0、25、50、75、100)μg/m L MA包被聚苯乙烯微球作为吞噬颗粒,在2μmol/L松胞菌素D(cty D)处理前、后,分别吞噬24 h^8 d,用总胆固醇(TC)酶法测定试剂盒、游离胆固醇(FC)酶法测定试剂盒分别检测各组细胞TC、FC,再通过胆固醇酯(CE)和CE/TC比值定量评估巨噬细胞泡沫化水平。将cty D处理细胞(RAW264.7-cty D、RAW264.7-cty D-MA)及其对照组分别用异硫氰酸荧光素标记的鬼笔环肽(FITC-phalloidin)染色,计算纤维型肌动蛋白(F-actin)重排率。结果各组细胞受MA诱导后,其冠蛋白1的表达量显著高于相应对照组,其表达量从高至低依次为RAW264.7-Cor.Plus、RAW264.7、RAW264.7-Cor.Minus。表达不同水平冠蛋白1的各组细胞的泡沫化水平与MA包被剂量和MA作用时间呈正比;冠蛋白1表达量最高的RAW264.7-Cor.Plus细胞泡沫化水平最高,冠蛋白1表达量最低的RAW264.7-Cor.Minus细胞泡沫化水平最低;cty D抑制巨噬细胞F-actin显著降低MA诱导的细胞泡沫化水平,但抑制F-actin对冠蛋白1与MA诱导细胞泡沫化的正相关性并无显著影响;经鬼笔环肽染色后,MA诱导组细胞的F-actin重排率显著高于非MA诱导的对照组细胞。结论 MA可诱导巨噬细胞冠蛋白1的表达,其表达水平与MA诱导的细胞泡沫化呈正相关,F-actin参与MA诱导的细胞泡沫化过程,但F-actin并非冠蛋白1调控MA诱导细胞泡沫化的关键和唯一途径。

春性饲草型小黑麦芽期抗旱性鉴定指标的确立

为探讨小黑麦芽期主要性状与抗旱性的关系,运用灰色关联度分析法对20个春性饲草型小黑麦品种(系)在水培与模拟干旱2种条件下芽期主要性状与种子萌发抗旱指数的关联度进行分析,结果表明,模拟干旱条件下,各指标变化值与种子萌发抗旱指数间的关系密切程度依次为:根冠比、芽鞘最大值、最大胚根长、芽鞘存活率、根数。

巨噬细胞Coronin-1的表达与非Mtb源性自噬相关性的实验研究

目的:研究巨噬细胞Coronin-1与非Mtb源性细胞自噬的相关性及其可能信号通路。方法:分别构建过表达Coronin-1的p EGFP-C1-Coronin-1质粒和干扰Coronin-1表达的p Genesil-1-Coronin-1质粒,通过G418加压筛选其RAW264.7细胞稳定转染株,即Coronin-1高表达细胞株(RAW264.7-Cor.Plus)和Coronin-1低表达细胞株(RAW264.7-Cor.Minus)。将RAW264.7-Cor.Plus组、RAW264.7组和RAW264.7-Cor.Minus组细胞分别采取完全培养基(空白处理对照)、饥饿、雷帕霉素、环孢素A等因素处理后,通过RT-PCR法检测Beclin-1的基因转录水平,Western blot法检测Coronin-1、LC3BⅡ/LC3BⅠ及Beclin-1的蛋白表达水平。结果:Coronin-1过表达质粒和siRNA质粒均构建成功,其细胞稳定筛选株具有过表达或抑制表达Coronin-1特性。1空白处理三组细胞,Western blot法检测LC3BⅡ/LC3BⅠ的比值:RAW264.7-Cor.Minus组>RAW264.7组>RAW264.7-Cor.Plus组;Western blot法检测Beclin-1:RAW264.7-Cor.Minus组>RAW264.7组>RAW264.7-Cor.Plus组;RTPCR法检测Beclin-1转录水平,趋势同Western blot;2饥饿处理三组细胞,LC3BⅡ/LC3BⅠ的比值:RAW264.7-Cor.Minus组<RAW264.7组<RAW264.7-Cor.Plus组;3雷帕霉素处理RAW264.7细胞,其Coronin-1蛋白被显著抑制;雷帕霉素和环孢素A分别处理RAW264.7-Cor.Plus细胞,其LC3BⅡ/LC3BⅠ比值明显较空白处理组高。结论:巨噬细胞Coronin-1与非Mtb源性细胞自噬具有相关性。在营养充足状态下,Coronin-1可抑制细胞自噬;在饥饿状态下,Coronin-1可促进细胞自噬。Coronin-1对自噬的调控可能与m TOR和钙离子信号通路有关。

京津冀一体化下交通运输业碳排放核算及其影响因素研究

碳排放核算是城市低碳发展研究的基础。作为三大城市碳排放源产业之一,交通运输业是重点关注对象。以京津冀交通运输业碳排放核算为起点,采用偏最小二乘法开展驱动因子分析,通过两阶段参数估计评估各影响因素的变化趋势。结果表明:在京津冀城市群中,北京将最先达到碳排放峰值;人口规模、人均GDP、能源强度与货物周转量是城市群交通运输业碳排放的主要影响因素,且具有两阶段变化特征;在一体化背景下,京津冀地区需开展加快产业结构升级、支持新能源汽车的研发与发展智能交通建设等交通运输领域的减排举措。

携爱前行

1997年，通过招考，我从月薪3000元的银行工作者转行当了一名月薪300元的普通教师。我被分配在醴陵老城区的一所有600个学生的完小任教。一段时间之后，我们局长问我：银行和教育这两个行业，你喜欢哪个？我笑笑，爽朗地说：孩子比钱可爱!

美的校园,美的生活——小学生社团活动开发策略探究

10年来,小学生社团活动从无到有,再到遍地开花,只因社团活动能更好地提升学生综合素养,增强学生生活技能,培养学生自主学习能力,具有课堂教学不可替代的意义和价值。但由于地域条件、学校资源的限制,以及缺乏课堂教学的严密科学体系和成文的组织管理,小学生社团至今仍处于时冷时热、此起彼伏的尴尬状态。为适应社会主义新时代培育创新型人才的需要,以“科学、创新、发展、自主”为宗旨的学生社团活动也应当持续推进。为此,笔者仅以株洲市天元区银海学校为例,对小学生社团活动的开发策略作探讨。

话说备课

周末的晚上，才送走亲戚，得片刻独处，但我还得备点课，明天有检查，需要备那种中规中矩的课。而实际上，我早就想脱离常规的备课，去尝试建立自己独特的适应美术教师真实教学现状的备课模式——或许也可以称为有特色的个案。这样的尝试，并不能节省我的时间，不能令我偷懒。要知道，如果要真有创新和价值，往往就需要投入更多的精力和时间。这需要一个空间，够包容的空间。因学校统一规范，所以自己每期的备课恰恰都是很合常规的。而这样的想法，只是一个我们在QQ群里聊的话题的延续。

冠蛋白-1不同表达水平对巨噬细胞iNOS、TLRs表达以及凋亡的影响

冠蛋白-1(Coronin-1)在真核细胞中广泛表达,涉及钙离子稳态、细胞骨架动力学、免疫及炎症反应等多种细胞功能。该研究探讨了冠蛋白-1不同表达水平对巨噬细胞诱导性一氧化氮合酶(inducible nitric oxide synthase,iNOS)、Toll样受体(Toll-like receptors,TLRs)表达和凋亡的影响并探讨其分子机制。根据冠蛋白-1表达水平的差异,实验细胞分为RAW264.7-Cor.Plus、RAW264.7、RAW264.7-Cor.Minus 3组。各组细胞分别经4μmol/L钙调磷酸酶抑制剂环孢素A(cyclosporin A,Cs A)处理24 h或2μmol/L肌动蛋白聚合抑制剂松胞菌素D(cytochalasin D,cyt D)处理48 h,同时设未处理对照,再分别用Real-time PCR法检测iNOS m RNA水平,Western blot法检测细胞TLR2、TLR4、TLR9及钙调磷酸酶(calcineurin,Ca N)的蛋白质水平,流式细胞术检测细胞凋亡百分率。各组细胞用四甲基异硫氰酸荧光素标记的鬼笔环肽(TRITC-phalloidin)染色后,计算纤维型肌动蛋白(F-actin)重排率。结果显示,冠蛋白-1过表达细胞相对于冠蛋白-1正常表达细胞,其iNOSm RNA水平以及TLR2、TLR4、TLR9蛋白表达水平和细胞凋亡率均显著降低(P<0.05);Cs A作用后,RAW264.7-Cor.Plus的iNOS m RNA水平以及TLR2、TLR4、TLR9蛋白质水平和细胞凋亡率均较未处理对照细胞显著增加(P<0.05),RAW264.7和RAW264.7-Cor.Plus细胞的Ca N水平较未处理对照细胞显著降低(P<0.05);cyt D作用后,与未处理对照细胞相比,iNOS m RNA水平及细胞凋亡率无显著性差异(P>0.05),但TLRs的表达显著降低(P<0.05);经鬼笔环肽染色后,RAW264.7-Cor.Plus细胞F-actin重排率显著高于RAW264.7细胞(P<0.05)。以上结果表明,冠蛋白-1过表达不仅促进了巨噬细胞F-actin重排,而且下调了iNOS、TLRs水平并且抑制细胞凋亡,其分子机制与冠蛋白-1促进钙调磷酸酶调控的Ca^(2+)信号通路有关。

氢吗啡酮复合纳布啡用于胃肠道手术后PCIA的效果

目的评价氢吗啡酮复合纳布啡用于胃肠道手术后病人自控静脉镇痛(PCIA)的效果。方法择期行胃肠道手术病人600例,年龄18~80岁,BMI≤35 kg/m2,ASA分级Ⅰ~Ⅲ级。按随机数字表法将病人分为2组(n=300):氢吗啡酮组(H组)和舒芬太尼组(S组)。术后48 h内采用PCIA,H组配方为氢吗啡酮10 mg+纳布啡40 mg;S组配方为舒芬太尼100μg+纳布啡40 mg。2组药物均加生理盐水稀释至100 ml,背景剂量1 ml/h,单次剂量0.5 ml。记录病人术后48 h内VAS评分、镇痛有效按压次数、镇痛泵用药量、不良反应及术后恢复情况。结果2组术后48 h内VAS评分、镇痛泵用药量和镇痛泵有效按压次数比较差异无统计学意义(P>0.05)。与S组比较,H组术后48 h内头晕、恶心、呕吐发生率降低,首次下床时间缩短(P<0.05)。结论氢吗啡酮复合纳布啡用于胃肠道手术后PCIA的效果优于舒芬太尼复合纳布啡。

染出来的生活

本案例属于将小学美术湘版教材《色彩ABC》、《花手帕》、《彩云衣》和高中《工艺》教材《染出来的生活》进行整合．作为了解天然染料的开发．进行扎染美术作品创作．并将扎染作品加以应用等为内容的一个单元的设计应用课。因其具有一定的深度和广度．适合不断探究学习。在技能技巧上．适用于小学五、六年级，初中，高中阶段的所有学生。其弹性较大，可根据学生对染缬工艺的兴趣和接触多少进行调整。本校主要应用在美术扎染社团的教学活动中。