杭州市规模化养殖场湖羊芽囊原虫的PCR检测与基因亚型鉴定

[目的]掌握杭州市规模化养殖场中湖羊芽囊原虫的感染情况和基因亚型分布。[方法]从杭州市4个规模化养殖场采集167份湖羊的新鲜粪便样本,提取粪便全基因组DNA;基于小亚基核糖体RNA(SSU rRNA)基因,对粪便DNA样本进行PCR扩增,对阳性产物进行测序;经序列比对鉴定芽囊原虫基因亚型,构建系统进化树解析其遗传进化关系。[结果]167份样本中,检测出芽囊原虫阳性样本18份,感染率为10.78%(18/167);3个养殖场呈芽囊原虫阳性,感染率依次为21.43%(3/14)、21.21%(14/66)和2.13%(1/47),1个养殖场未检测出芽囊原虫;不同养殖场之间湖羊芽囊原虫的感染率存在极显著(P<0.01)差异。鉴定出7个芽囊原虫基因亚型,分别为ST7(n=1)、ST10(n=9)、ST21(n=3)、ST23(n=1)、ST24(n=2)、ST26(n=1)、ST30(n=1),以ST10亚型为优势感染亚型(9/18,50.00%);基于芽囊原虫SSU rRNA基因的系统进化树分析发现,6种基因亚型序列聚类形成1个大群,其中ST10和ST23聚类形成亚群,ST21、ST26和ST30聚类形成亚群,ST24聚类形成亚群;而ST7聚类形成另外1个群。[结论]杭州市湖羊芽囊原虫感染较常见,其基因亚型存在遗传多样性。研究结果为我国绵羊芽囊原虫的感染情况调查提供了基础数据。

谷维素对饲用米糠油酸价测定的影响

为研究谷维素对饲用米糠油酸价测定的影响,试验选用4种商品化或从饲用米糠中提取的饲用米糠油,采用高效液相色谱法测定饲用米糠油中谷维素含量。分别采用百里香酚酞指示法、碱性蓝6B指示法、电位滴定法测定饲用米糠油酸价。以食用米糠油和饲用大豆油作为对照。在饲用米糠油中和空白溶剂中定量添加谷维素,分别用百里香酚酞指示法和电位滴定法测定酸价。结果表明:①碱性蓝6B指示法不能用于测定饲用米糠油酸价。②百里香酚酞指示法测定的表观酸价与谷维素含量呈显著的线性关系。③谷维素含量对电位滴定法测定的酸价无明显影响。④谷维素会导致电位滴定过程中在pH为12左右产生第二次突跃点。⑤两种方法中谷维素含量与消耗的滴定液体积均呈显著的线性关系。⑥以添加相同含量谷维素的溶剂作为空白对照,用百里香酚酞指示法测定的酸价与电位滴定法差别不大。⑦电位滴定法测定的酸价精密度高于百里香酚酞指示法。综上,饲用米糠油的酸价测定应首选电位滴定法,百里香酚酞指示法需要以含相同含量谷维素的溶剂作为空白对照。

动物源细菌耐药性评估在兽用抗菌药使用减量化行动中的应用

动物源细菌耐药性已引起广泛关注,全国正在逐步推进兽用抗菌药使用减量化行动。为更好地推动减量化行动的实施,浙江省在耐药性的评估及应用方面进行探索。研究分析了耐药性评估在减量化行动中的作用,建立了耐药系数评估模型与应用方法,研判了目前耐药性监测可能存在的问题,以期更好地推进兽用抗菌药使用减量化行动。

饲料霉菌污染与霉菌总数检测方法

霉菌是目前饲料安全的主要危害菌。本文就饲料霉菌污染对饲料产生的危害以及其计数检测方法作一综述,以期为霉菌检验工作提供参考。

HPLC法测定盐酸左旋咪唑片的含量研究

建立盐酸左旋咪唑片中盐酸左旋咪唑含量测定的高效液相色谱法。采用Agilent Eclipse XDB-C18(250mm×4.6mm),5μm色谱柱,Agilent 1260DAD检测器,流动相为0.05mol/L磷酸二氢钾溶液(三乙胺调节pH值至7.0)-乙腈(80∶20,v/v);进样量为20μL;柱温为30℃;流速为1.0mL/min;检测波长为214nm。结果表明:盐酸左旋咪唑在1.024~102.398μg/mL范围内线性关系良好(r=1.0000),高、中、低浓度回收率分别为97.4%、99.7%、99.3%。该方法定性、定量准确,适用于盐酸左旋咪唑片中盐酸左旋咪唑的含量测定。

恩诺沙星、氟苯尼考和泰万菌素在鸡蛋中残留消除规律研究

目的评估恩诺沙星、氟苯尼考和泰万菌素在鸡蛋中的残留消除规律。方法将80羽高产海兰褐蛋鸡随机等分成4组,对照组饲喂基础日粮,恩诺沙星组、氟苯尼考组和泰万菌素组分别经混饲给予相应药物,每日1次,连续给药5 d,停药19 d,检测各枚鸡蛋中相应药物及其主要代谢产物的残留量。结果恩诺沙星及其主要代谢产物环丙沙星与氟苯尼考及其主要代谢产物氟苯尼考胺可迅速残留于鸡蛋中,残留物分别以恩诺沙星原型和氟苯尼考原型为主,且其残留蓄积期都超过19 d。泰万菌素及其主要代谢产物3-乙酰胺基泰万菌素在鸡蛋中的残留总量低于最大允许残留限量,且平均残留蓄积期为7 d,3-乙酰胺基泰万菌素占总残留量的50%以上。结论恩诺沙星和氟苯尼考在海兰褐品系鸡蛋中残留消除周期超过19 d,在对后备蛋鸡、肉蛋兼用鸡给药时需严格控制用法用量。在适用情况下,可优先选择平均残留消除周期相对较短的泰万菌素。

HPLC法测定喹乙醇预混剂中喹乙醇的含量

建立并验证了喹乙醇预混剂中喹乙醇含量的高效液相色谱测定法。试验采用十八烷基硅烷键合硅胶色谱柱(250 mm×4.6 mm,5μm),以0.02 mol/L磷酸二氢钾溶液(用三乙胺调节pH值为6.0)-乙腈(92∶8,V∶V)为流动相,流速为1.0 mL/min,柱温为30℃,检测波长为262 nm。试验结果表明喹乙醇在5~100μg/mL范围内线性良好,R^2=1.0000,平均回收率100.2%(n=6),RSD为0.2%。建立的方法简便、准确、可靠,可更好地控制喹乙醇预混剂的质量。

三种抗生素替代物的研究进展

抗生素的使用极大地提高了人类和动物的健康。作为促生长剂,在养殖业上发挥了巨大的作用。但随着抗生素的大量使用,细菌耐药性问题日益严重,为了遏制细菌耐药性问题,养殖场抗生素减量化势在必行。本文对微生态制剂、中药、噬菌体3种作为养殖业中抗生素替代物的研究进展进行总结,为进一步深入研究提供参考。

动物源肠球菌耐药性研究进展

肠球菌是目前主要的人畜共患条件致病菌,具有天然耐药、获得性耐药及多重耐药等特点。随着抗生素在畜牧养殖业上的大量应用,动物源肠球菌的耐药性日趋严重。本文从肠球菌的分离鉴定、药敏实验、耐药机制几方面对当前的研究进展进行综合阐述。

莫西菌素在养殖业中的应用与研究综述

莫西菌素（Moxidectin）是一种新型抗寄生虫药。是由链霉菌发酵产生、半合成的、成分单一的大环内酯类药物，是奈马菌素（Nemadectin）的衍生物，分子式为C37H53N08．分子量为639．83，属于第三代阿维菌素类药物。莫西菌素是单一成分，有着更高的驱虫活性、长效和安全等特性。

兽用双黄连注射液中非法添加解热镇痛类药物的高效液相色谱检测法

建立了高效液相色谱法测定兽用双黄连注射液中非法添加4种解热镇痛类药物的方法。采用Waters Symmetry C18(4.6 mm×250 mm,5.0μm)色谱柱分离4种解热镇痛类药物,以磷酸盐缓冲液(p H值7.0)-甲醇(65∶35)为流动相,流速1.0 mL/min,进样量10μL,采用二极管阵列检测器进行检测,采集的波长范围190~400 nm,分辨率为1.2 nm,记录260 nm处的色谱图。结果显示,4种解热镇痛类药物的浓度在1~100μg/mL范围内的线性良好,相关系数r均为0.999 9,回收率在97.8%~100.8%,相对标准偏差在0.9%~4.0%,检测限1.0 mg/mL。本方法快速、准确,可用于兽用双黄连注射液中非法添加解热镇痛类药物的定性和定量检测。

我国猪源和鸡源大肠杆菌抗生素耐药性相关基因研究进展

大肠杆菌作为一种条件致病菌和重要的耐药性指示菌,国内外已有大量猪源、鸡源大肠杆菌耐药性相关基因的研究报道。受动物种属、地域等来源性差异,以及耐药机制、亚型等因素的影响,研究中涉及很多种不同的耐药性相关基因,且检出率也不尽相同。根据耐受抗菌药物种类,对这些基因作用机理及分布情况等方面综述,以期为研究大肠杆菌耐药性产生机制提供依据及参考。

动物布鲁氏菌病抗体补体结合试验与cELISA检测结果比较

依据GB/T18646-2018建立布鲁氏菌病补体结合试验(CFT)方法,对43份牛、羊血清样本进行检测,并以同一批血清样品的竞争酶联免疫吸附试验(cELISA)结果为参照进行比较。结果表明:CFT与cELISA结果一致性Kappa值为0.3499,CFT敏感性(M)为65.22%,特异性(T)为70.00%,准确性(Z)为67.44%。

气相色谱法测定香味剂中桉油精肉桂醛百里香酚及香芹酚的含量

为建立气相色谱法测定饲料香味剂中桉油精、肉桂醛、百里香酚及香芹酚的方法,试样经无水乙醇提取后,用GC测定桉油精、肉桂醛、百里香酚及香芹酚。桉油精、肉桂醛、百里香酚及香芹酚在浓度为20~200g/kg添加水平时,平均回收率分别在97.6%~98.3%、97.8%~98.7%、97.4%~98.8%和97.4%~98.8%,相对标准偏差(RSD)分别在0.5%~0.7%、0.4%~1.0%、0.4%~0.6%和0.5%~0.8%。方法定量限为100mg/kg。本方法对饲料香味剂中桉油精、肉桂醛、百里香酚及香芹酚的检测分析准确性高、重现性好。

新冠肺炎疫情对兽医公共卫生事件应急处置的启示

随着金融往来的全球化和畜牧业的规模化、集约化发展,因动物疫病或人畜共患病而造成的公共卫生风险不断增加。SARS、H5N1流感、布鲁氏菌病、非洲猪瘟等疫病一次次地冲击着公共卫生安全,呈现出新病频现、旧病卷土重来的特点。自2019年年末新冠肺炎疫情爆发以来,中国政府和人民采取了很多积极有效的应对措施,在疫情发展不同阶段所采取各项举措,为兽医公共卫生事件的应急处置提供了宝贵经验。本文拟按疫情发展阶段,简要分析此次新冠肺炎疫情的应对措施与结果对兽医公共卫生事件应急处置的启示。

高效液相色谱法测定鸡肌肉中地克珠利、妥曲珠利及其代谢物的残留量

建立了一种高效液相色谱法同时测定鸡肌肉中地克珠利、妥曲珠利、妥曲珠利砜及妥曲珠利亚砜残留量的方法。试样经乙腈涡旋提取，正己烷脱脂，经碱性氧化铝小柱净化，浓缩，流动相定容，高效液相色谱分离，紫外检测器检测，以保留时间定性，以峰面积定量。结果表明：该方法在0．05～5μg／mL浓度范围内线性关系良好，相关系数r均大于0．999。在50～500μg／kg添加浓度范围内，方法回收率在70％～110％之间，批内和批间变异系数均小于15％。方法简便、灵敏度高、稳定性好。

生物发酵床腐熟垫料的资源化利用及安全性评价

生物发酵床技术已成为养殖业处理畜禽粪污的重要方式,发酵床腐熟垫料中的病虫害、重金属和盐分有对农田生态环境造成污染的风险。该文简述了发酵床垫料的组成和腐熟垫料的营养肥效,着重从生物安全性、重金属污染风险、土壤盐渍化三个方面分析了腐熟垫料的安全性,最后提出了降低腐熟垫料安全性风险的建议,以期为农业种养结合提供参考。

氟喹诺酮类药物粉剂中非法添加四种喹噁啉类药物的UPLC检测方法研究

建立了超高效液相色谱法测定氟喹诺酮类药物粉剂中非法添加喹乙醇、乙酰甲喹、卡巴氧及喹烯酮的方法。采用purospher RP－18色谱柱（2．1 mm×100 mm，粒径2．0μm ）分离四种喹噁啉类药物，以磷酸溶液和甲醇－乙腈（7．5∶7．0）为流动相进行梯度洗脱，流速0．3 mL／min，二极管阵列检测器检测，采集波长范围为200～400 nm，分辨率为1．2 nm，记录光谱图和365 nm波长处的色谱图。结果显示，四种喹噁啉类药物的浓度在0．2～100μg／mL范围内的线性良好，相关系数r均为0．9999，回收率在98．0％～100．2％范围内，RSD在0．27％～0．89％之间，检测限200 mg／kg。本方法快速、准确，可用于氟喹诺酮类粉剂中非法添加喹噁啉类药物的定性和定量检测。

超高效液相色谱法在检测饲料中非法添加物中的应用研究进展

超高效液相色谱是一种新型的液相色谱技术。本文综述了该技术在检测饲料中非法添加物中的应用。

HPLC-MS/MS检测双黄连注射液中非法添加13种喹诺酮类药物的研究

建立了高效液相色谱-串联质谱法检测兽用中药制剂双黄连注射液中非法添加13种喹诺酮类药物的方法。样品经0．2％甲酸溶液溶解后稀释，以0．2％甲酸溶液与甲醇作为流动相进行梯度洗脱，采用多反应监测模式进行测定。13种喹诺酮类药物检测限（LOD）为0．1—0．5mg／mL，定量限（LOQ）为1～5mg／mL，在5．0～200ng／mL范围内线性关系良好，相关系数均大于0．99，在5、10、20mg／mL三个添加浓度下，平均回收率为90．9％～101．9％，相对标准偏差为0．6％～3．8％．