疏水性姜黄素和IR780经纳米靶向载药系统改性后的肿瘤细胞联合杀伤性能研究

目的:提高疏水性肿瘤治疗药物的治疗效果。方法:通过VEGF靶向修饰的介孔二氧化硅纳米载药系统装载疏水性化疗药物——姜黄素(Curcumin)和光热剂——IR780,与肿瘤细胞孵育并借助IR780的荧光性能观察纳米载药系统进入细胞的情况,对恶性肿瘤细胞的联合治疗效果进行评估。结果:VEGF靶向修饰的介孔二氧化硅纳米递药系统可提高目标药物的水溶性和细胞摄取效率,同时对姜黄素的药物治疗效果和IR780的光热治疗效果也有明显的增强作用,联合杀伤肿瘤细胞效果达到99%。结论:在纳米靶向载药系统的投递作用下,姜黄素和IR780联合化疗和光热治疗可明显提高对肿瘤细胞的杀伤效果。

疏水性IR780经纳米载药系统改性后的光热治疗性能

目的解决光热试剂——IR780难溶于水而导致细胞摄取效率低,进而影响光热治疗效果的问题。方法通过溴化十六烷基三甲基溴化铵(cetyltrimethyl ammonium bromide,CTAB)模板法合成介孔二氧化硅纳米颗粒,然后装载IR780。最后与肿瘤细胞孵育并观察IR780进入细胞的情况和光热治疗效果。结果 IR780经过介孔二氧化硅纳米颗粒包覆以后可明显提高其水溶性,进而增加肿瘤细胞的摄取量,同时对光热治疗效果也有明显的增强。结论所制得的介孔二氧化硅纳米递药系统可以明显提高IR780的摄取效率和对肿瘤细胞的光热治疗效果。

4株埃博拉病毒核蛋白特异性单克隆抗体抗原结合表位研究

目的 分析鼠埃博拉病毒核蛋白（NP）特异性单克隆抗体抗原结合表位,了解其免疫学特性.方法 经生物信息学分析后,将NP分段重组表达,并分别以之为抗原,通过免疫印迹和竞争ELISA的方法对4株埃博拉病毒核蛋白特异性单抗的抗原结合表位进行分析.结果 经生物信息学表位分析后将埃博拉病毒全长核蛋白分为rNP1-418,rNP419-639和rNP640-739三段进行重组制备,免疫印迹法分析表明4株鼠单抗均识别线性表位,结合位点位于C端100 aa.通过对C端100 aa即rNP640-739 N端连续截短20 aa的方法进行鉴定,4株鼠单抗抗原表位位于埃博拉核蛋白C末端20 aa,但其中2株单抗无明显竞争.结论 明确了具有不同结合位点的埃博拉核蛋白特异性单抗,为免疫学快速检测试剂的研究奠定基础.

抗埃博拉病毒核蛋白NP人-鼠嵌合抗体的研究

埃博拉病毒感染致死率最高可达90%,属烈性传染病,检测诊断对于疫情控制就显得异常重要。目前我国实验室通过实时定量荧光PCR检测埃博拉病毒核酸进行确诊,但耗时相对较长,对检测的人员和仪器要求较高。ELISA法检测血清是病原学诊断的主要指标,该种检测方法简单易操作,能够有效判断患者是否感染埃博拉以及感染程度,可用于流行病学调查,血清学指标的检测可以作为核酸检测的有力补充。由于埃博拉出血热在我国境内尚无病例出现,尤其需要储备血清学检测阳性质控物。通过基因工程抗体技术构建并表达抗埃博拉病毒核蛋白NP人-鼠嵌合抗体,为埃博拉出血热血清学检测做人源阳性对照储备。采用RT-PCR技术,从分泌抗埃博拉核蛋白单克隆抗体的鼠杂交瘤细胞株中分离克隆抗体轻重链可变区基因,对其进行序列分析。根据序列分析的结果,设计特异性引物将鼠源抗体可变区基因VH、VL分别克隆至携带有人抗体轻重链恒定区基因的真核表达载体HL51-14,瞬时转染293T细胞,表达并纯化获得人鼠嵌合IgG抗体,随后对其进行了免疫学检测和功能鉴定。结果表明正确构建抗埃博拉病毒核蛋白人鼠嵌合抗体真核表达载体,成功表达并纯化获得两株人鼠嵌合单抗。

模板法制备高光热性能的新型氧化钨纳米颗粒及其表征

目的制备具有较好形貌和光热转换性能的新型氧化钨纳米复合物,并对其进行表征。方法采用模板法制备介孔二氧化硅(mSiO_2)纳米颗粒,将WCl_6吸附进入mSiO_2中,通过高温水热法一步合成有固定形貌的水溶性氧化钨(WO@mSiO_2)纳米颗粒。采用透射电子显微镜和粒度仪分析纳米颗粒的形貌和大小;初步评价WO@mSiO_2的光热转化情况;MTT法初步考察对其对Hela细胞的毒性作用及808 nm近红外光照射后对肿瘤细胞的光热杀伤效果。结果模板法制备的WO@mSiO_2具有较好的分散性,粒径105 nm。经808 nm近红外光照射后,氧化钨纳米颗粒具有较好的光热转化效果。MTT试验结果表明:氧化钨纳米颗粒具有较好的细胞安全性。经808 nm近红外光照射后,对肿瘤细胞具有较高的光热杀伤效率。结论模板法合成的WO@mSiO_2具有较好的光热性能,有用于肿瘤临床治疗的潜能。