CX3CR1通过调节Ca2+内流介导神经元凋亡影响缺血性卒中小鼠预后

目的观察脑缺血后趋化因子受体1(CX3CR1)在神经元上的表达变化,并探讨其作用及机制。方法将野生型C57/BL6小鼠和CX3CR1基因敲除小鼠,分别设置对照组(假手术组)和小鼠中动脉永久闭塞(pMCAO)模型,用磁共振成像(MRI)检测30 min后脑缺血范围和24 h后梗死面积;免疫荧光三重染色法检测凋亡;Western blot检测CX3CR1蛋白的表达。在体外,培养原代神经元,建立氧糖剥离(OGD)细胞缺血模型;用MTT法检测细胞存活率;免疫荧光检测神经元CX3CR1的表达;激光共聚焦显微镜观察神经元内Ca^2+浓度变化。结果在野生型小鼠中,与对照组和健侧相比,pMACO后,患侧CX3CR1表达显著升高(P<0.05),且CX3CR1与凋亡蛋白caspase-3在神经元上共表达;与野生型小鼠相比,CX3CR1基因敲除小鼠pMACO 30 min后缺血损伤面积相似,但24 h后CX3CR1基因敲除小鼠梗死面积小于对照组(P<0.05);在体外,原代神经元OGD后CX3CR1表达显著升高(P<0.05),敲除神经元上CX3CR1,可减轻谷氨酸介导的兴奋性损伤,细胞存活率显著上升,同时观察到,敲除CX3CR1可降低谷氨酸介导的Ca^2+内流到神经元的速度和总量。结论缺血可诱导神经元CX3CR1的表达,且神经元CX3CR1可以通过调节Ca^2+内流来介导神经元的凋亡。

百日咳毒素减轻脑缺血后神经元钙内流的实验研究

目的探讨百日咳毒素(PTx)对缺血性脑卒中后神经元的保护作用及其可能的机制。方法将C57BL6小鼠用大脑中动脉闭塞(MCAO)法建立卒中模型,随机分为两组,每组12只鼠。实验组卒中后予PTx 1000 ng溶于1 ml生理盐水腹腔注射干预;对照组予1 ml生理盐水腹腔注射。24 h后行TTC染色检测梗死面积,并行免疫组化检测细胞凋亡。在体外培养原代神经元,用谷氨酸兴奋刺激模拟卒中后神经元损伤模型。用MTT及乳酸脱氢酶(LDH)释放实验检测PTx对谷氨酸兴奋刺激后神经元的存活和损伤情况。然后,检测PTx对谷氨酸诱导神经元钙离子内流的影响。结果 PTx治疗可减小卒中后小鼠脑梗死面积,使之由(51±11)%降至(34±8)%(P<0.05)。免疫组化发现PTx可使脑内Caspase-3阳性细胞数由(677.7±117.8)个/mm2减少至(297.5±83.6)个/mm2(P<0.05),且较少细胞凋亡。体外结果提示,PTx可增加谷氨酸刺激后神经元的存活率,使MTT吸光值由(0.618±0.06)提升至(1.1±0.12)(P<0.05);同时,PTx还可减少LDH的释放,使吸光值由(1.31±0.11)降低至(0.76±0.08)(P<0.05)。PTx可减缓和减少钙离子进入神经元,经PTx治疗后钙内流可由基础值的5倍降低至基础值的2~3倍,且钙离子内流达到半峰值浓度的时间也由(18.5±2.5)s延长至(85.4±10.2)s。结论百日咳毒素可减少卒中后钙离子内流到神经元,继而减少神经元损伤,减小梗死面积。

甲状腺激素受体β1在非典型脑膜瘤的表达及其作用研究

目的研究甲状腺激素受体β1(TRβ1)和非典型脑膜瘤的关系及其作用.方法通过real-timePCR和免疫组化分别对良性脑膜瘤和非典型脑膜瘤中的TRβ1进行检测;同时我们在体外进行原代脑膜瘤细胞培养,并通过MTT检测TRβ1对非典型脑膜瘤细胞的影响.结果TRβ1 mRNA在非典型脑膜瘤中的表达低于良性脑膜瘤,没有统计学意义(P>0.05);但TRβ1阳性细胞在非典型脑膜瘤为平均40.75个/mm^2低于良性脑膜瘤93个/mim^2,有统计学意义(P<0.05).而在体外实验中,T3干预可有效抑制非典型脑膜瘤细胞的增殖,在浓度为20 ng/ml时MTTOD值由对照组0.24±0.028下降到0.17-±0.008,抑制作用明显,具有统计学意义(P<0.05),而在siRNA沉默TRβ1蛋白的表达后,可有效减弱T3对细胞的抑制作用.结论TRβ1在非典型脑膜瘤上的表达下降,在被其配体T3激活后可有效抑制非典型脑膜瘤细胞增殖.提示TRβ1可能在非典型脑膜瘤的发生及生长过程中扮演着重要角色.

云南大学生手机依赖与抑郁症状的纵向关联

目的分析手机依赖与大学生抑郁症状的纵向关联,为大学生心理健康教育提供理论依据。方法于2021年11月—2023年6月,采用整群随机抽样方法从云南省2所高校抽取2515名大一年级学生进行问卷调查,包括基线调查(2021年11月,T1)和3次随访(2022年6月,T2;2022年11月,T3;2023年6月,T4)。应用青少年手机使用依赖自评问卷和抑郁-焦虑-压力量表-21(DASS-21)评估大学生手机依赖情况和抑郁症状;采用χ^(2)检验对抑郁症状检出率进行单因素分析,应用广义估计方程进行手机依赖症状与抑郁症状的关联分析。结果云南大学生抑郁症状检出率T1、T2、T3、T4时点分别为23.02%,33.36%,34.79%,35.51%。在时点T1、T2、T3、T4不同自评学习负担,时点T1、T2、T3不同亲密朋友数量,时点T1不同父亲文化程度,时点T2、T4不同母亲文化程度,时点T4不同性别,时点T3、T4不同专业,时点T2、T3、T4不同学历,时点T1、T2不同家庭居住地,时点T1、T2、T4不同自评家庭经济条件的大学生抑郁症状检出率差异均有统计学意义(χ2值分别为59.68,49.38,16.70,39.31;55.35,26.01,16.69;10.22;14.87,11.51;14.90;27.81,50.28;9.75,7.42,24.76;6.06,4.47;15.88,14.58,15.85,P值均<0.05)。在广义估计方程模型控制人口学变量及混杂因素后,手机依赖、手机依赖戒断症状、手机依赖身心影响与抑郁症状均呈正相关(β值分别为0.11,0.14,0.14,P值均<0.01);进一步分性别分析显示,男生和女生的抑郁症状与手机依赖、手机依赖戒断症状、手机依赖身心影响均存在关联(β值分别为0.13,0.13,0.18;0.10,0.13,0.13,P值均<0.01)。结论大学生抑郁症状与手机依赖呈正相关,家庭经济条件、学习负担、亲密朋友数量是持续影响抑郁症状的因素。应引导大学生关注手机过度使用对身心健康的影响,合理使用手机,降低大学生抑郁症状发生率。

云南某县青少年生活行为方式与焦虑症状的关联

目的:研究云南青少年生活行为与焦虑症状的关联。方法:在云南红河州屏边县随机整群选取两所中学的819名在校中学生进行问卷调查,收集生活行为方式数据。使用中文版21条目抑郁-焦虑-压力量表评估中学生的焦虑症状。采用广义线性模型分析云南青少年生活行为方式与焦虑症状的关联,并按性别进行分层分析。结果:54.21%的青少年焦虑症状阳性。有以下不健康行为的青少年焦虑症状阳性率较高:最近1个月喝酒≥7杯(78.95%)、消费零食≥7次(73.33%)、每周7 d吃夜宵(71.79%)和不吃早餐(69.88%)。广义线性模型分析结果显示,控制混杂变量后,学习日视屏时间、零食、甜食、夜宵等生活行为方式与男女生焦虑症状呈正相关;新鲜食物、吃早餐天数等生活行为方式与男女生焦虑症状呈负相关。结论:云南青少年不健康生活行为方式可能增加焦虑症状风险,中学校需要采取有效的健康教育以预防和改善初中生的焦虑症状。