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基于行业标准中马和驴成分检测方法用于骡肉检测的分析
1
作者
周藏
项佳林
+4 位作者
刘立兵
王金凤
付琦
孙晓霞
王建昌
《食品科学》
EI
CAS
CSCD
北大核心
2023年第24期346-351,共6页
应用基于线粒体基因的行业标准检测方法SN/T 3730.4—2013《食品及饲料中常见畜类品种的鉴定方法第4部分:驴成分检测实时荧光PCR法》和SN/T 3730.5—2013《食品及饲料中常见畜类品种的鉴定方法 第5部分:马成分检测实时荧光PCR法》检测...
应用基于线粒体基因的行业标准检测方法SN/T 3730.4—2013《食品及饲料中常见畜类品种的鉴定方法第4部分:驴成分检测实时荧光PCR法》和SN/T 3730.5—2013《食品及饲料中常见畜类品种的鉴定方法 第5部分:马成分检测实时荧光PCR法》检测骡肉时,存在马、驴成分均可检出的情况,与线粒体严格母系遗传的理论相左。因此,本研究通过测序法和行业标准中的马、驴成分检测方法对骡肉进行检测,对SN/T 3730.4—2013用于骡肉检测的结果进行分析和讨论。本研究基于线粒体基因和核基因聚合酶链式反应(polymerase chain reaction,PCR)测序、SN/T 3730.4—2013、SN/T 3730.5—2013方法对9份单一肉块样品进行了检测。结合线粒体基因和核基因的检测结果,确定3份骡肉均为马骡肉;采用SN/T 3730.4—2013和SN/T 3730.5—2013方法对3份马骡肉均能检出驴成分和马成分,SN/T 3730.5—2013对马骡肉中马成分检测的循环阈值(cycle threshold,Ct)≤20.00;SN/T3730.4—2013对马骡肉中驴成分检测的Ct值在25.00~35.00范围内,且以SN/T 3730.4—2013中引物进行的普通PCR产物测序结果显示,3份骡肉与马、驴均不同源。分析认为,出现该现象的原因可能是SN/T 3730.4—2013靶序列以核内线粒体DNA片段形式和较低的重复数出现在马骡核基因组中,并且发生了部分碱基的插入、缺失。采用行业标准SN/T 3730.4—2013和SN/T 3730.5—2013对已知来源于单一动物源性成分的样品进行马、驴成分检测时,当马成分检测的Ct值≤20.00,同时驴成分检测的Ct值在25.00~35.00范围内时,应考虑马骡成分存在的可能性。
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关键词
线粒体基因
核基因
马成分
驴成分
骡成分
测序分析
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职称材料
同时检测速冻食品中鸡、鸭、猪和牛源性成分实时荧光聚合酶链式反应方法的建立及应用
被引量:
1
2
作者
周藏
孙晓霞
+4 位作者
王金凤
付琦
王恺睿
刘立兵
王建昌
《肉类研究》
2022年第8期29-32,33,34,共6页
以鸡转化生长因子β-3(transforming growth factor beta-3,TGFB3)基因、猪朊蛋白(prion protein,PRNP)基因和鸭、牛生长激素(growth hormone,GH)基因为靶基因,设计合成特异性引物和TaqMan探针,通过对实时荧光聚合酶链式反应(polymerase...
以鸡转化生长因子β-3(transforming growth factor beta-3,TGFB3)基因、猪朊蛋白(prion protein,PRNP)基因和鸭、牛生长激素(growth hormone,GH)基因为靶基因,设计合成特异性引物和TaqMan探针,通过对实时荧光聚合酶链式反应(polymerase chain reaction,PCR)体系和反应条件的优化,建立同时检测速冻食品中鸡、鸭、猪和牛源性成分的实时荧光PCR检测方法。结果表明:本研究所建立的方法只在鸡、鸭、猪或牛源性成分存在时才产生特异性扩增曲线,表明该方法具有良好的特异性;且对鸡、鸭、猪和牛源性成分的最低检测质量浓度分别可达到10.0、1.0、10.0、10.0 pg/μL,具有良好的灵敏性;应用建立的检测方法对市售34份速冻食品鸡、鸭、猪和牛源性成分进行同时检测,能够实现对速冻食品中4种动物源性成分的有效检测,进一步分析发现,15份速冻食品源性成分测定结果与外包装标注成分不一致。本研究所建立的同时检测速冻食品中鸡、鸭、猪和牛源性成分的实时荧光PCR检测方法具有良好的特异性和灵敏性,且操作简单、适用范围广,能够满足日常检测需求。
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关键词
速冻食品
动物源性成分
实时荧光聚合酶链式反应
同时检测
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职称材料
实时荧光PCR技术检测4种常见高组胺鱼成分方法的建立及初步应用
3
作者
刘立兵
周藏
+5 位作者
付琦
孙晓霞
王金凤
钱云开
艾连峰
王建昌
《中国口岸科学技术》
2023年第3期50-58,共9页
为建立针对常见高组胺鱼成分的实时荧光PCR(real-time PCR)检测方法,本研究以日本鲭的ATP-6基因、金枪鱼的BGH基因、秋刀鱼和沙丁鱼的Cytb基因为靶基因设计特异性的引物和探针,并通过反应体系的优化试验、特异性试验和灵敏性试验,建立...
为建立针对常见高组胺鱼成分的实时荧光PCR(real-time PCR)检测方法,本研究以日本鲭的ATP-6基因、金枪鱼的BGH基因、秋刀鱼和沙丁鱼的Cytb基因为靶基因设计特异性的引物和探针,并通过反应体系的优化试验、特异性试验和灵敏性试验,建立了针对4种高组胺鱼成分的实时荧光PCR检测方法。结果显示,该方法特异性强,对其他常见鱼类物种均无特异性扩增,日本鲭、沙丁鱼、秋刀鱼和金枪鱼的灵敏性可分别达到10.0 pg/μL、1.0 pg/μL、1.0 pg/μL、1.0 pg/μL;以人工模拟样品进行检出限分析,建立的实时荧光PCR方法的检出限均可达0.1%;对市售的36份鱼肉制品进行检测,日本鲭、沙丁鱼、秋刀鱼和金枪鱼成分的检出率分别为11.11%(4/36)、5.56%(2/36)、5.56%(2/36)和16.67%(6/36)。本研究建立的针对4种常见高组胺鱼成分的实时荧光PCR检测方法,操作简便、结果可靠,可为我国鱼肉制品进出口检验监管和食品安全监管提供技术支撑。
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关键词
高组胺鱼
实时荧光PCR
鱼肉制品
食品安全
原文传递
题名
基于行业标准中马和驴成分检测方法用于骡肉检测的分析
1
作者
周藏
项佳林
刘立兵
王金凤
付琦
孙晓霞
王建昌
机构
河北医科大学公共卫生学院
石家庄海关技术中心
河北省环境与人群健康重点实验室
出处
《食品科学》
EI
CAS
CSCD
北大核心
2023年第24期346-351,共6页
基金
国家重点研发计划“科技冬奥”重点专项(2020YFF0305004)
河北省省级科技计划资助项目(21375501D)。
文摘
应用基于线粒体基因的行业标准检测方法SN/T 3730.4—2013《食品及饲料中常见畜类品种的鉴定方法第4部分:驴成分检测实时荧光PCR法》和SN/T 3730.5—2013《食品及饲料中常见畜类品种的鉴定方法 第5部分:马成分检测实时荧光PCR法》检测骡肉时,存在马、驴成分均可检出的情况,与线粒体严格母系遗传的理论相左。因此,本研究通过测序法和行业标准中的马、驴成分检测方法对骡肉进行检测,对SN/T 3730.4—2013用于骡肉检测的结果进行分析和讨论。本研究基于线粒体基因和核基因聚合酶链式反应(polymerase chain reaction,PCR)测序、SN/T 3730.4—2013、SN/T 3730.5—2013方法对9份单一肉块样品进行了检测。结合线粒体基因和核基因的检测结果,确定3份骡肉均为马骡肉;采用SN/T 3730.4—2013和SN/T 3730.5—2013方法对3份马骡肉均能检出驴成分和马成分,SN/T 3730.5—2013对马骡肉中马成分检测的循环阈值(cycle threshold,Ct)≤20.00;SN/T3730.4—2013对马骡肉中驴成分检测的Ct值在25.00~35.00范围内,且以SN/T 3730.4—2013中引物进行的普通PCR产物测序结果显示,3份骡肉与马、驴均不同源。分析认为,出现该现象的原因可能是SN/T 3730.4—2013靶序列以核内线粒体DNA片段形式和较低的重复数出现在马骡核基因组中,并且发生了部分碱基的插入、缺失。采用行业标准SN/T 3730.4—2013和SN/T 3730.5—2013对已知来源于单一动物源性成分的样品进行马、驴成分检测时,当马成分检测的Ct值≤20.00,同时驴成分检测的Ct值在25.00~35.00范围内时,应考虑马骡成分存在的可能性。
关键词
线粒体基因
核基因
马成分
驴成分
骡成分
测序分析
Keywords
mitochondrial gene
nuclear gene
horse ingredient
donkey ingredient
mule ingredient
sequencing analysis
分类号
TS207.3 [轻工技术与工程—食品科学]
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职称材料
题名
同时检测速冻食品中鸡、鸭、猪和牛源性成分实时荧光聚合酶链式反应方法的建立及应用
被引量:
1
2
作者
周藏
孙晓霞
王金凤
付琦
王恺睿
刘立兵
王建昌
机构
河北医科大学公共卫生学院
石家庄海关技术中心
河北省环境与人群健康重点实验室
出处
《肉类研究》
2022年第8期29-32,33,34,共6页
基金
国家重点研发计划“科技冬奥”重点专项(2020YFF0305004)
河北省省级科技计划资助项目(21375501D)。
文摘
以鸡转化生长因子β-3(transforming growth factor beta-3,TGFB3)基因、猪朊蛋白(prion protein,PRNP)基因和鸭、牛生长激素(growth hormone,GH)基因为靶基因,设计合成特异性引物和TaqMan探针,通过对实时荧光聚合酶链式反应(polymerase chain reaction,PCR)体系和反应条件的优化,建立同时检测速冻食品中鸡、鸭、猪和牛源性成分的实时荧光PCR检测方法。结果表明:本研究所建立的方法只在鸡、鸭、猪或牛源性成分存在时才产生特异性扩增曲线,表明该方法具有良好的特异性;且对鸡、鸭、猪和牛源性成分的最低检测质量浓度分别可达到10.0、1.0、10.0、10.0 pg/μL,具有良好的灵敏性;应用建立的检测方法对市售34份速冻食品鸡、鸭、猪和牛源性成分进行同时检测,能够实现对速冻食品中4种动物源性成分的有效检测,进一步分析发现,15份速冻食品源性成分测定结果与外包装标注成分不一致。本研究所建立的同时检测速冻食品中鸡、鸭、猪和牛源性成分的实时荧光PCR检测方法具有良好的特异性和灵敏性,且操作简单、适用范围广,能够满足日常检测需求。
关键词
速冻食品
动物源性成分
实时荧光聚合酶链式反应
同时检测
Keywords
quick-frozen food
animal-derived ingredients
real-time polymerase chain reaction
simultaneous detection
分类号
TS207.3 [轻工技术与工程—食品科学]
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职称材料
题名
实时荧光PCR技术检测4种常见高组胺鱼成分方法的建立及初步应用
3
作者
刘立兵
周藏
付琦
孙晓霞
王金凤
钱云开
艾连峰
王建昌
机构
石家庄海关技术中心
河北医科大学公共卫生学院
秦皇岛海关技术中心
出处
《中国口岸科学技术》
2023年第3期50-58,共9页
基金
国家重点研发计划“科技冬奥”重点专项(2020YFF0305004)
河北省省级科技计划资助项目(21375501D)。
文摘
为建立针对常见高组胺鱼成分的实时荧光PCR(real-time PCR)检测方法,本研究以日本鲭的ATP-6基因、金枪鱼的BGH基因、秋刀鱼和沙丁鱼的Cytb基因为靶基因设计特异性的引物和探针,并通过反应体系的优化试验、特异性试验和灵敏性试验,建立了针对4种高组胺鱼成分的实时荧光PCR检测方法。结果显示,该方法特异性强,对其他常见鱼类物种均无特异性扩增,日本鲭、沙丁鱼、秋刀鱼和金枪鱼的灵敏性可分别达到10.0 pg/μL、1.0 pg/μL、1.0 pg/μL、1.0 pg/μL;以人工模拟样品进行检出限分析,建立的实时荧光PCR方法的检出限均可达0.1%;对市售的36份鱼肉制品进行检测,日本鲭、沙丁鱼、秋刀鱼和金枪鱼成分的检出率分别为11.11%(4/36)、5.56%(2/36)、5.56%(2/36)和16.67%(6/36)。本研究建立的针对4种常见高组胺鱼成分的实时荧光PCR检测方法,操作简便、结果可靠,可为我国鱼肉制品进出口检验监管和食品安全监管提供技术支撑。
关键词
高组胺鱼
实时荧光PCR
鱼肉制品
食品安全
Keywords
histamine-rich fish
real-time PCR
fish products
food safety
分类号
TS254.7 [轻工技术与工程—水产品加工及贮藏工程]
O657.3 [理学—分析化学]
原文传递
题名
作者
出处
发文年
被引量
操作
1
基于行业标准中马和驴成分检测方法用于骡肉检测的分析
周藏
项佳林
刘立兵
王金凤
付琦
孙晓霞
王建昌
《食品科学》
EI
CAS
CSCD
北大核心
2023
0
下载PDF
职称材料
2
同时检测速冻食品中鸡、鸭、猪和牛源性成分实时荧光聚合酶链式反应方法的建立及应用
周藏
孙晓霞
王金凤
付琦
王恺睿
刘立兵
王建昌
《肉类研究》
2022
1
下载PDF
职称材料
3
实时荧光PCR技术检测4种常见高组胺鱼成分方法的建立及初步应用
刘立兵
周藏
付琦
孙晓霞
王金凤
钱云开
艾连峰
王建昌
《中国口岸科学技术》
2023
0
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