不同处理下菘蓝苗中IAA和靛玉红含量分析及合成部位研究

自然干旱、20mmol/K ABA、4℃低温处理培养30d的菘蓝组培苗，不同时间内取样，用高效液相色谱法测定其中IAA的含量。结果表明：干旱处理菘蓝组培苗在12h内能提高其IAA含量242．04％～262．87％；ABA处理与干旱处理有相似结果；低温胁迫处理24h也能提高IAA含量503．87％。此外用高效液相色谱法测定了生长一个半月的菘蓝实生苗中IAA和靛玉红含量。结果为：花中IAA含量大干根中，叶中没有；靛玉红则在叶中最多，花中次之，根中最少；初步表明菘蓝中IAA和靛玉红虽然具有类似的分子结构，且逆境胁迫处理都可使其含量增加，但在植物体中的产生部位有差异。

逆境胁迫对菘蓝幼苗靛玉红含量的影响

培养30d的菘蓝无菌幼苗经250mmol／L NaCl、自然干旱、20mmol／L ABA、4℃低温等不同方式逆境处理，不同时间内取样，用高效液相色谱法对其中靛玉红的含量进行测定。结果表明：盐、干旱、ABA处理12h内能提高菘蓝幼苗中靛玉红含量59.05％～161．67％，低温胁迫处理24h也能提高靛玉红含量141．4％，说明适当逆境胁迫处理能有效提高菘蓝幼苗体内靛玉红的累积量，其中250mmol／L NaCl胁迫处理效果最为显著。

小鼠IL-4重组质粒的构建及目的蛋白的表达和纯化

目的构建重组小鼠白细胞介素-4(rmIL-4)原核表达载体,在大肠杆菌BL21(DE3)中诱导表达,纯化目的蛋白并鉴定。方法将优化后的小鼠IL-4cDNA片段克隆到原核表达载体pET-32a(+)上,获得重组质粒pET32/rmIL-4,转入BL21(DE3)中经IPTG诱导表达得到包涵体。经复性处理后,依次用阴离子交换柱和分子筛纯化蛋白。对纯化得到的蛋白用Western blot检验免疫学特异性,用mIL-4生长依赖性细胞株CTLL-2增殖实验和动物实验测定其生物学活性。结果经酶切和测序证实重组质粒pET32/rmIL-4构建成功。诱导得到的包涵体用3mol/L盐酸胍溶液洗涤后溶于加有β-巯基乙醇的7mol/L盐酸胍溶液中变性,在pH9.5的条件下梯度透析复性。纯化出的蛋白经Western blot鉴定,能与抗小鼠IL-4抗体特异性结合;经细胞和动物实验鉴定,rmIL-4蛋白具有生物学活性,能刺激mIL-4生长依赖性细胞株CTLL-2增殖,使小鼠体内细胞因子发生从TH1到TH2的漂移。结论成功制备了高纯度、具有生物学活性的小鼠IL-4,为进一步研究其生物学功能提供了条件。

经典瞬时受体I型电位通道(TRPC1)免疫调节作用机制研究进展

瞬时受体电位通道(Transient receptor potential channel 1, TRPC1)是位于细胞膜上的一类非电压依赖性的阳离子通道蛋白,其主要参与细胞内Ca2+稳态的调节。近年研究证明,TRPC1在细胞增殖、分化、凋亡等生物学行为方面起着重要的作用,与多种生理病理过程密切相关。本文主要对TRPC1的免疫调控效应及其机制做一简要综述。

抗EGFR单链抗体融合Gelonin免疫毒素与紫杉醇协同抗肿瘤作用及机制研究

目的:研究抗EGFR单链抗体融合gelonin免疫毒素(E/rG)与紫杉醇是否具有协同抗肿瘤作用,进一步探讨两种药物联合作用产生协同效应的机制。方法:在体外实验中,利用MTT方法研究两种药物联合抑制EGFR阳性癌细胞的生物学效应;在体内试验中,建立人肺癌A549细胞裸鼠移植瘤模型,两种药物联合治疗评价两者的协同抗肿瘤作用。利用ELISA检测紫杉醇单独给药治疗后小鼠血清和肿瘤ECF中的EGFR水平。结果:在体外未检测到E/rG免疫毒素与紫杉醇的协同作用,在体内检测到两种药物具有显著的协同作用。ELISA检测结果显示紫杉醇治疗能够降低小鼠血清和肿瘤ECF中的EGFR水平。结论:在体外实验中,未发现两种药物协同抑制肿瘤细胞生长的作用,而在体内实验中,两种药物具有显著的协同抗肺癌肿瘤作用,其作用机制是紫杉醇给药后降低了小鼠血液中和肿瘤组织间隙液中的游离EGFR含量,减少了游离EGFR对免疫毒素的靶向抗肿瘤作用的影响。为抗EGFR单链抗体融合gelonin免疫毒素临床使用方案具有重要的指导意义。

社会生活是艺术的源泉

奥地利的精神病医生、精神分析学说的创立者——弗洛依德说:文艺是人的性本能的升华。他把艺术的功能和梦的功能相比拟,断言"一篇作品就象一场白日梦一样"。法国的存在主义者萨特把人视为与其它人和事无关的、纯主观纯个人的、孤立的自我存在。他把这种"自我存在"视为"

阳离子脂质体介导IL-15基因治疗小鼠肺转移模型的实验研究

目的:用阳离子脂质体(CL)包裹pcDNA3.1-IL15制备阳离子脂质体质粒DNA复合物CL-IL15,观察其抗小鼠B16-F10肺转移瘤的治疗作用,并初步探讨其作用机制。方法:构建hIL-15真核表达载体,测定脂质体-质粒DNA复合物的最佳包封率;将该复合物转染CHO-K1细胞株,West-ern blott检测体外转染条件下IL-15蛋白的表达情况,MTT法检测细胞转染上清对CTLL-2细胞株的增殖刺激作用;建立B16-F10小鼠黑色素瘤肺转移模型,尾静脉给药,每隔1 d给药1次,共6次,治疗结束24 h后观察各组肿瘤肺转移情况;LDH释放法(乳酸脱氢酶释放法)检测脾淋巴细胞的杀伤作用,冰冻切片免疫荧光法观察NK细胞对肿瘤组织的浸润。结果:成功构建hIL-15表达载体,并验证其与阳离子脂质体的质量比为1∶5时,包裹后形成的复合物具有较好的包封率;可以在体外有效转染并表达具生物活性的分泌型IL-15蛋白;CL-IL15复合物治疗小鼠肿瘤肺转移模型,可以显著减少肿瘤肺转移结节数目,提高脾细胞对肿瘤细胞杀伤活性(P<0.05),增加NK细胞在肿瘤组织中的浸润比例。结论:阳离子脂质体质粒DNA复合物CL-IL15可有效地抑制小鼠B16-F10肺转移瘤,其作用机制可能与IL-15诱导脾细胞对肿瘤细胞的杀伤、激活NK(natural killer)细胞对肿瘤组织的浸润等机制有关。

历史决定论和主体选择论

历史决定论是唯物主义决定论原则在社会历史领域中的运用,它有两种基本类型:一种是机械的历史决定论.这种决定论,虽然坚持社会历史的存在和发展具有客观规律性,但是,对社会规律的理解是机械的,它否定人的主观能动性.另一种是马克思主义历史决定论.这种决定论,是在承认社会历史发展具有客观规律性的基础上,又肯定人的实践活动在改造社会中的积极意义,也就是肯定人的自觉能动性,而马克思主义历来认为,能动性包含着选择性.我们把这种决定论叫做辩证的历史决定论.我们要坚持的也就是这种决定论.

抗EGFR单链抗体融合gelonin毒素的原核表达载体的构建及其生物活性研究

目的构建表达抗表皮生长因子受体(EGFR)单链抗体融合gelonin毒素的原核表达载体,并初步验证其功能。方法以抗EGFR单链抗体基因为模板,通过PCR及酶切连接将该基因定向克隆入含gelonin毒素的原核表达载体pET32a中,将该质粒转入BL21(DE3)中经异丙基疏代半乳糖苷(IPTG)诱导表达得到包涵体,通过变性、复性并进行阳离子交换层析得到较纯的目的蛋白(重组免疫毒素rEG蛋白)。对纯化的rEG蛋白用Westernblot检测其免疫学特性,用细胞免疫组化实验及MTT实验测定其靶向性及生物学活性。结果经酶切及测序证实重组质粒pET32a-rEG构建成功。诱导得到的包涵体经变性、复性后使用阳离子交换层析而纯化得到rEG蛋白。纯化的rEG蛋白经Western blot鉴定,可以与兔抗gelonin血清特异性结合。经细胞免疫组化实验鉴定,rEG蛋白可以有效靶向EGFR阳性细胞,MTT实验也证实纯化的rEG蛋白能特异性抑制EGFR阳性表达的肺腺癌A549细胞的生长。结论成功制备了高纯度、具有生物学活性的rEG免疫毒素,为进一步研究其生物学功能提供了条件及基础。

miR-302/367家族研究进展

MicroRNAs(miRNAs)是一类长度约为22 nt的内源性小分子非编码RNA,几乎参与了机体生命活动的所有过程。Micro RNA-302/367(miR-302/367)家族,包括miR-302a/b/c/d和miR-367等成员。近些年,人们对miR-302/367家族在胚胎干细胞的自我更新与多能干细胞的诱导机制进行较为深入的研究。此外,该家族在肿瘤和炎症反应等方面调控作用也日益受到关注。现就miR-302/367的功能研究进展作一综述。