钠、钾离子对肌质网囊泡NADH氧化酶和伴生超氧自由基的调控

目的探讨Na+、K+浓度对骨骼肌肌质网囊泡氧化还原系统的调控作用及对Ca2+释放通道的影响。方法提取肌质网囊泡,分别检测其在不同Na+、K+浓度下还原型辅酶Ⅰ(nicotinamideadeninednucleotide,NADH)氧化初速率、超氧产率、[3H]-ryanodine结合率和Ca2+释放速率的变化。结果高浓度的Na+、K+对肌质网NADH的氧化初速率和伴生的超氧自由基产率均有抑制作用;在[3H]-ryanodine结合实验中,高浓度的Na+、K+也压抑了NADH诱导的受配体结合的升高;同样,在Ca2+释放动力学实验中,不同浓度的K+调控了由NADH诱导的Ca2+释放初速率。结论骨骼肌肌质网膜上可能存在具有对Na+、K+浓度敏感并中介超氧自由基产生的NADH氧化还原系统,其参与调节Ca2+释放通道的活性。

50Hz弱磁场诱导离体表皮生长因子受体聚集

利用原子力显微镜(atomic force microscope,AFM)观测到浓度为5滋g/mL离体表皮因子受体(epidermal growth factor receptor,EGFR)蛋白在50Hz磁场作用下发生聚集,其颗粒呈现倍数变大和变高趋势;利用透射电镜(transmission electronic microscope,TEM)也得到类似的蛋白变大趋势。结果表明,在AFM和TEM下观察到,磁场作用后蛋白聚集颗粒的平均半高宽(平均直径)由(21.7±2.2)nm(12.5nm)增大到(33.0±4.0)nm(23nm),最可几高度由(1.42±0.18)nm增加到(3.08±0.17)nm。这种由磁场引起的聚集效应呈时间依赖性。利用Alexa-488-EGF标记EGFR观察了磁场暴露对细胞上EGF受体表达的影响,提示EGF受体的表达可能稍有上调。上述结果提示50Hz磁场信号可能通过影响EGFR的膜上聚集状态来影响下游信号通路。这种对信号通路的影响可能是电磁场生物性效应的一种机制。

50Hz正弦磁场对细胞超氧产率及细胞增殖的影响

中国仓鼠肺成纤维细胞(CHL)和人脐静脉内皮细胞(HUVEC)受磁场辐照后,采用荧光光度法检测细胞的超氧产率和采用噻唑蓝比色分析法检测细胞的增殖情况。50Hz、0.4mT正弦磁场辐照30min引起CHL细胞和HUVEC细胞的超氧产率分别较对照组增加12%和19%;该磁场辐照24h导致CHL细胞和HUVEC细胞的数目分别较对照组上调9%和10%。提示50Hz、0.4mT正弦磁场促进CHL细胞和HUVEC细胞的增殖,可能与超氧自由基产率的上调有关。

0.4mT工频磁场对骨骼肌肌质网囊泡游离钙离子转运的影响

目的探讨工频磁场对骨骼肌肌质网钙转运动力学的影响。方法利用动态光谱法检测0.4mT、50Hz正弦磁场辐照过的骨骼肌肌质网Ca2+转运和钙泵活性,用3H兰尼碱结合实验检测Ca2+释放通道的活性,用荧光偏振法检测肌质网膜的流动性等。结果0.4mT、50Hz正弦磁场辐照导致提取的肌质网囊泡Ca2+摄取初速率由每秒(29.18±3.90)pmol/mg下降到(24.60±3.81)pmol/mg,钙泵的活性由每分钟(0.93±0.05)μmol/mg下降到(0.69±0.07)μmol/mg;导致Ca2+释放初速率由每秒(4.83±0.82)pmol/mg上升到(5.65±0.43)pmol/mg,3H兰尼碱结合度由(1.10±0.12)pmol/mg上升到(1.16±0.13)pmol/mg,分别上升了15%和5%。结论0.4mT工频磁场辐照引起的肌质网Ca2+摄取下调和Ca2+释放上调是由于肌质网钙泵活性降低和Ca2+释放通道活性升高所致。

50Hz正弦磁场对肌质网钙释放通道Ryanodine受体的影响

目的探讨正弦磁场对提取的骨骼肌肌质网（SR）囊泡钙释放通道（RyR1）的影响。方法采用动态光谱法和同位素标记方法，分别检测了正弦磁场对SR囊泡Ca^2＋释放初速率、[3H]-Ryanodine平衡结合度、还原型辅酶（NADH）的氧化初速率和超氧（O^-·2）产率的影响。结果0．4mT、50Hz正弦磁场辐照SR囊泡30min，由1 mmol/L NADH与1 mmol／LNAD调控的Ca^2＋释放初速率Con组为（10．82周贞洁0．89）pmol·mg^-1 pro·s^-1、MF组为（14．69±1．21）pmol·mg^-1pro·s^-1；上调了35％，[^3H]-Ryan—odine平衡结合度上调15％，由（2．13±0．05）pmol／mg pro上升到（2．45±0．07）pmol／mg pro。另外，该磁场辐照SR囊泡30min，导致NADH的氧化速率上调22％，由（0．88±0．11）×10^-4 FI／s上升到（1．07±0．13）×10^-4 FI／s；O^-·2产率上调32％，由（0．99±0．09）×10^-5 Fl／s上升到（1．31±0．06）×10^-5 FI／s。结论0．4mT正弦磁场2在低氧化还原电势环境下对RyR1有显著的激活，且该磁场促进了NADH氧化酶的活力和O^-·2产率的增加。