氯喹对地塞米松抑制急性淋巴细胞白血病细胞增殖的促进作用

目的:研究氯喹对地塞米松抑制急性淋巴细胞白血病细胞增殖的促进作用及其机制。方法:采用CCK-8实验观察氯喹对地塞米松抑制人急性淋巴细胞白血病细胞株CEM-C1增殖的促进作用,并采用Western blotting、实时定量PCR和LysoTracker Red溶酶体染色法验证此种促进作用的机制。结果:氯喹与地塞米松合用对CEM-C1细胞增殖的抑制明显高于正常对照组(P<0.01)。氯喹与地塞米松联用上调糖皮质激素受体(GR)的蛋白质水平并抑制溶酶体功能,而溶酶体抑制剂bafilomycin A1亦可上调GR的蛋白质水平。结论:氯喹与地塞米松联用通过溶酶体介导的机制发挥抑制急性淋巴细胞白血病细胞增殖的作用。

长链非编码RNA HOTAIR对急性淋巴细胞白血病细胞增殖与凋亡的影响

目的:研究长链非编码RNA HOTAIR调控糖皮质激素受体的表达对急性淋巴细胞白血病细胞增殖及凋亡的作用。方法:采用RT-qPCR法检测人正常骨髓基质细胞系HS-5及急性淋巴细胞白血病细胞系MOLT-4、CCRF-CEM和CEM-C1中HOTAIR和糖皮质激素受体的表达。用si RNA沉默CEM-C1细胞中HOTAIR的表达,CCK-8法检测si-HOTAIR对CEM-C1细胞活力的影响; Brd U法检测si-HOTAIR对CEM-C1细胞增殖的影响以及对地塞米松抑制CEM-C1细胞增殖的增效作用; Hoechst 33342染色法和caspase 3/7活性检测法研究si-HOTAIR对CEM-C1细胞凋亡的影响;并采用Western blot法检测糖皮质激素受体的蛋白表达水平。结果:人急性淋巴细胞白血病细胞系MOLT-4、CCRF-CEM和CEM-C1中HOTAIR的表达显著高于人正常骨髓基质HS-5细胞(P <0. 01)。在CEM-C1细胞中干扰HOTAIR表达后,细胞活力降低,细胞增殖被抑制并发生凋亡,地塞米松抑制CEM-C1增殖的作用被增强,糖皮质激素受体表达上调(P <0. 01)。结论:长链非编码RNA HOTAIR增强急性淋巴细胞白血病的活力,促进其增殖并抑制其凋亡,该作用可能与其抑制糖皮质激素受体的表达有关。

卓越医师培养背景下药理学教学模式的改革及探讨

药理学是医学生培养中的核心课程之一。在卓越医师培养背景下,进行了药理学教学模式的改革,从而增进师生互动,激发学生对该学科的学习兴趣及动力,并培养卓越医师班学生的自主学习能力、团结协助能力,促进"卓越医师"培养计划的顺利实施。

药学硕士专业学位研究生药理学案例教学库的建设及应用探讨——以桂林医学院为例

药学硕士专业学位是我国2010年新增专业学位之一,具有职业性与学术性相统一、特定的职业指向性和教育的实践依赖性等特点。药理学课程是药学硕士专业学位研究生必修课——药学专业知识(一)的重要构成部分。从药理学课程案例教学库建设的角度探索药学硕士专业学位研究生的培养手段,以保障药学硕士专业学位研究生的培养质量。

高职药理学课程“传出神经系统药理概论”教学改进措施探索

本文分析高职药理学课程“传出神经系统药理概论”教学的现状,提出采取教学改进措施对“传出神经系统药理概论”章节进行知识梳理及重组,引导学生充分掌握传出神经系统药理,激发其学习兴趣,为后续章节及其他学科的学习打下坚实基础。

金樱子对大鼠肝组织脂质抗氧化作用的体外实验

目的:研究金樱子(RLM)水醇提取液的抗脂质过氧化作用。方法:以大鼠肝匀浆为体外实验体系,应用分光光度法检测金樱子对大鼠肝匀浆化学诱导脂质过氧化产物丙二醛(malondialdehyde,MDA)含量的影响。结果:金樱子能抑制大鼠肝组织脂质过氧化产物MDA生成,并呈现出一定的量效关系。结论:金樱子在一定的浓度范围内具有抗氧化活性。

荧光D-葡萄糖同系物2-NBDG示踪和测定肝癌细胞HepG2细胞糖摄入的实验研究

目的以荧光D-葡萄糖同系物(2-NBDG)为示踪探针,建立一种在活细胞中快速、直接检测糖摄入的敏感方法。方法通过培养肝癌细胞株HepG2,使用不同浓度的2-NBDG(0.3 mmol/L、1.0 mmol/L)处理20 min,用荧光显微镜观察细胞荧光强度,用IPP6.0软件分析细胞荧光强度。结果不同浓度2-NBDG(0.3 mmol/L、1.0 mmol/L)处理后,细胞荧光强度随剂量增加而显著增强(P<0.05)。结论 2-NBDG可以作为人源肝癌细胞株HepG2的荧光探测示踪剂进行糖摄入实验测定。本实验在细胞水平建立了简便可行的糖摄入能力评估方法,将有助于糖尿病的研究。

案例分析、翻转课堂联合慕课教学在药理学教学中的应用

传统的教学模式以教师主讲为主导,我们尝试把案例分析、翻转课堂教学法与慕课教学应用于药理学的教学工作中,有助于把课堂的学习主动权交回给学生,将教学模式转变为教师主导,学生主动的新型课堂教学模式。本文根据药理学学科特点,初步探讨案例分析、翻转课堂和慕课教学在药理学教学中的应用和实践。

NMDA受体NR2B亚单位拮抗剂与神经系统退行性疾病

谷氨酸(Glu)是脊椎动物中枢神经系统中的主要兴奋性神经递质,其受体可分为代谢型和离子型两大类。离子型受体由三种组成:AMPA受体,KA受体及NMDA受体。其中NMDA受体被认为是突触可塑性及皮质和海马神经元长时程增强效应(Long-term potentiation,LTP)的主要调控者,构成了中枢神经系统的重要功能如学习和记忆的基础。NMDA受体的过度激活在多种神经系统退行性疾病的发生和发展过程中发挥着重要作用。但是,由于非选择性NMDA受体拮抗剂的选择性较低,故在发挥明显的治疗作用的同时也发生了严重的副反应,影响了其临床应用。而NMDA受体的NR2B亚单位的分布相对较集中,选择性NR2B受体拮抗剂受到了越来越多的关注。本文就近年来NMDA受体NR2B亚单位拮抗剂在神经系统退行性疾病中的研究进展作一综述。

“互联网+”背景下高校创新创业教育中的成果提炼与专利申请

本文讨论了"互联网+"背景下高校教学中对创新技术的成果提炼,并结合实例阐述了信息类专利材料的整理与撰写。

药物制剂专业实践教学模式研究

为满足和解决广西当地对药物制剂应用型人才的需求,体现药物制剂专业的自身特色以及适应和满足社会化、市场化的趋势和要求,在对当地医药企业、医院、研究所等用人单位和市场的调研后,并结合日常的实践教学经验,本文作者提出了"突出技能,以研促教,校企联合"的改革方案,以进一步探索桂林医学院药物专业多样化的人才培养模式。

创新驱动“双一流”建设下信息类专利向高校教学转化

本文讨论了在国家创新驱动背景下,高校围绕“双一流”建设的目标,将信息类专利技术向教学环节转化的思想和方法。

穿心莲内酯对急性淋巴细胞白血病细胞的生长抑制及凋亡诱导作用

目的:研究穿心莲内酯(andrographolide,AND)对急性淋巴细胞白血病(acute lymphoblastic leukemia,ALL)细胞生长和凋亡的影响。方法:人ALL细胞株CEM-C1经AND处理12 h、24 h和48 h,应用CCK-8法检测AND对细胞活力的影响;应用Wright-Giemsa染色法观察AND处理24 h对CEM-C1细胞形态及数量的影响;应用流式细胞术+annexin V-FITC/碘化丙啶(propidium iodide,PI)双染色法分析AND作用24 h对CEM-C1细胞凋亡的作用;采用流式细胞术+PI染色法分析AND作用24 h对CEM-C1细胞周期分布的作用;用Western blot法检测AND对CEM-C1细胞凋亡相关蛋白水平的影响;应用JC-1线粒体膜电位(mitochondrial membrane potential,MMP)检测试剂盒检测AND作用24 h对CEM-C1细胞MMP的影响。最后将CEM-C1细胞接种于BALB/c-nu雌性裸鼠右胁腹侧建立裸鼠ALL移植瘤模型,通过检测肿瘤体积及重量观察AND的体内抗ALL作用,并应用免疫组化法检测裸鼠肿瘤组织凋亡蛋白cleaved caspase-3的蛋白水平。结果:CCK-8实验结果表明,AND对CEM-C1细胞活力的抑制作用呈时间及剂量依赖性。Wright-Giemsa染色结果显示,应用AND后CEM-C1细胞缩小、凝聚,细胞染色加深,细胞质呈均质红染并且细胞数减少。流式细胞术检测结果表明,AND处理细胞24 h后,随着AND浓度的增加,凋亡细胞数量增多,且细胞周期被阻滞在G2期,细胞生长被抑制。Western blot结果显示,AND上调活化凋亡蛋白cleaved caspase-3、cleaved caspase-7及促凋亡蛋白Bax的水平,并下调抗凋亡蛋白Bcl-2的表达;且cleaved caspase-3/caspase-3、cleaved caspase-7/caspase-7和Bax/Bcl-2的比值随AND浓度升高而增大。JC-1染色法结果表明,CEM-C1细胞的MMP随AND剂量增大而降低。体内实验结果显示,AND明显抑制荷瘤鼠的肿瘤生长,并上调肿瘤组织cleaved caspase-3的水平。结论:穿心莲内酯在体内外均抑制ALL细胞的生长并诱导其发生凋亡。

儿童急性淋巴细胞白血病的治疗研究进展

儿童急性淋巴细胞白血病(ALL)是一种儿童血液和骨髓的癌症,是指骨髓产生过多的未成熟淋巴细胞(一种不正常的白细胞)。如果不治疗,这种类型的癌症通常会迅速恶化。异常增生的原始和幼稚的淋巴细胞可在骨髓聚集并抑制正常造血功能,同时也可侵及骨髓外的组织,如脑膜、淋巴结、性腺、肝等,甚至可以危害神经系统。在ALL的儿童患者中,大量的干细胞会突变成了淋巴母细胞、B淋巴细胞或T淋巴细胞。这些细胞既不能像正常的淋巴细胞那样发挥作用,也不能抵抗感染。随着科学研究以及医学技术的提高,目前依据ALL不同的生物学特性制定相应的治疗方案已取得较好疗效,大约80%的儿童和30%的成人能够获得长期无病生存,并且有治愈的可能。

穿心莲内酯对人胶质瘤细胞U87-MG的生长抑制及凋亡诱导作用的研究

目的研究穿心莲内酯(andrographolide,AND)对人胶质瘤(Glioma)细胞U87-MG生长和凋亡的影响。方法体外培养人胶质瘤细胞U87-MG细胞株,采用MTT法检测AND对U87-MG细胞活力的影响;Hoechst 33342染色实验观察AND对U87-MG细胞凋亡的影响;JC-1染色实验观察AND处理后细胞线粒体膜电位(mitochondrial membrane potential,MMP)变化;Western blot法检测Bax、Bcl-2、JAK2、p-JAK2、STAT3、p-STAT3蛋白表达水平。结果AND能显著降低U87-MG细胞活力,且具有浓度依赖性和时间依赖性;Hoechst 33342染色实验显示,AND作用于U87-MG细胞24 h后,细胞核明显浓缩,细胞凋亡数量增加;JC-1染色实验显示,随着AND浓度增加,绿色荧光增强,表明细胞线粒体膜电位降低;Western blot法检测结果显示,AND可上调U87-MG细胞Bax蛋白表达,同时下调Bcl-2、JAK2、p-JAK2、STAT3、p-STAT3蛋白表达。结论AND能抑制胶质瘤细胞U87-MG的生长并诱导其凋亡,其分子机制与JAK2/STAT3信号通路有关。

铁死亡相关lncRNA在神经胶质瘤的预后价值分析

通过分析癌症基因组图谱(The Cancer Genome Atlas,TCGA)数据库的神经胶质瘤患者的转录组数据与临床数据,应用基因共表达法、单因素Cox回归法筛选与预后有关的铁死亡相关长非编码RNA(long non-coding RNA,lncRNA),根据LASSO Cox回归分析与筛选出的lncRNA在样本中的表达情况,将样本分为高、低风险两组,通过单因素及多因素独立预后分析、受试者工作特征曲线(Receiver Operating Characteristic Curve,ROC Curve)、Kaplan-Meier生存曲线、风险曲线、基因富集分析(Gene Set Enrichment Analysis,GSEA)等方法评估铁死亡相关lncRNA在神经胶质瘤预后中的价值及临床意义,通过TIMER、CIBERSORT、CIBERSORT-ABS等方法分析免疫浸润情况,进一步对免疫功能、免疫检查点以及N6-甲基腺苷(m^(6)A)甲基化差异进行分析。结果获得预后相关的铁死亡相关lncRNA共14个。单因素及多因素独立预后分析、ROC曲线结果表明,铁死亡相关lncRNA可作为独立的预后因子。Kaplan-Meier生存曲线与风险曲线表明,高风险组的生存时间更短。GSEA结果显示,高风险组中同种异体移植排斥、DNA复制、错配修复等显著活跃,而低风险组长程增强效应、磷脂酰肌醇信号系统显著活跃等,此外,基于不同方法高、低风险组的免疫浸润情况也有所差异,高风险组的大部分免疫检查点表达显著高于低风险组,m^(6)A相关基因的表达在高、低风险组中也具有显著性差异。本研究表明,铁死亡相关lncRNA与神经胶质瘤患者的生存密切相关,可作为神经胶质瘤预后新的生物标志物和潜在的治疗靶点。

某院Ⅰ类切口预防用抗菌药物临床药师干预效果分析

目的分析某院的临床药师对Ⅰ类切口围手术期患者预防用抗菌药物的干预效果。方法采用回顾性分析方法,选取某院2019年1~9月间Ⅰ类切口手术患者2168例作为对照组;选取2019年10~11月间Ⅰ类切口手术患者533例作为干预组,比较两组患者预防用抗菌药物的使用率、合理率等,并进行统计学分析。结果干预前,预防性使用抗菌药物比例为37.26%,术前给药时间合理数比例为84.66%,术后停药时间合理数比例为60.61%,抗菌药物品种选择合理数比例为6.69%;干预后,预防性使用抗菌药物比例为35.27%,术前给药时间合理数比例为89.13%,术后停药时间合理数比例为92.71%,抗菌药物品种选择合理数比例为81.72%。结论经过临床药师干预后,显著提高抗菌药物使用的合理性,降低抗菌药物的使用率,但仍未达到我国卫生部的相关规定(<30%),依然存在部分用药不合理的情况,仍需进一步加强我院对抗菌药物合理应用的管理。

真实世界研究对原研药与仿制药药效评价的研究进展

真实世界研究(Real World Study,RWS)是一种在医疗机构等真实世界环境下收集的患者数据,通过分析获得患者所用药品的疗效及不良反应等临床表现的研究方法。RWS也用于原研药与仿制药的安全性与有效性的比较,已成为临床药学领域关注的重点热点问题。近年来,我国已有多个医疗机构应用RWS方法评估仿制药相对原研药的安全性、有效性及依从性,为仿制药的临床应用证据添砖加瓦。

叶下珠水提物的体外抗炎作用研究

目的:运用网络药理学方法研究叶下珠水提物(Aqueous Extract of Phyllanthus urinaria L.,AEP)抗炎作用的机制,并研究其对脂多糖(LPS)刺激的RAW264.7巨噬细胞抗炎作用。方法:通过HERB和Genecards数据库检索获得叶下珠抗炎的相关靶点,使用STRING数据库进行蛋白互作网络(PPI)分析并筛选关键核心靶点,通过Hiplot数据库进行基因本体(GO)功能富集分析、基因组百科全书(KEGG)通路富集分析;应用四甲基偶氮唑蓝(MTT)法检测AEP对RAW264.7细胞活力的影响;通过酶联免疫吸附法(ELISA)观察AEP对LPS刺激后细胞炎性因子一氧化氮(NO)的分泌情况;通过免疫蛋白印迹法(Western blot)检测胞浆内核转录因子-κB p65(NF-κB p65)蛋白表达。结果:通过网络药理学研究,获得叶下珠抗炎的相关靶点49个,进而筛选出10个关键核心靶点,GO功能和KEGG通路富集分析结果显示叶下珠可参与细胞生物过程与NF-κB等信号通路发挥抗炎作用。MTT结果表明当AEP浓度≤0.125mg/mL时对RAW264.7细胞无明显毒性;AEP作用于RAW264.7细胞24h后,显著降低LPS刺激下NO分泌及胞浆内NF-κB p65蛋白的表达。结论:AEP对LPS诱导的RAW264.7细胞炎症具抑制作用,其抗炎机制与对NO及NF-κB通路的调控有关。

穿心莲内酯对人神经胶质瘤U251细胞的抑制作用及机制研究

目的:应用网络药理学、生物信息学方法,结合体外实验,研究穿心莲内酯(Andrographolide,AND)对人神经胶质瘤U251细胞的抑制作用及机制。方法:通过网络药理学手段,根据AND的结构预测其神经胶质瘤相关靶点。应用生物信息学方法,筛选出枢纽基因进行基因本体(Gene Ontology,GO)分子功能及基因组百科全书(Kyoto Encyclopedia of Genes and Genomes,KEGG)富集分析以确定与其相关的信号通路,再进行分子对接,研究AND与上述靶点的结合活性,最后进行基因富集分析(Gene Set Enrichment Analysis,GSEA),通过神经胶质瘤样本和正常样本的比较,分析枢纽基因的表达差异并获得其Kaplan-Meier生存曲线。在上述基础上,在人源神经胶质瘤细胞U251观察AND对其生长的影响及形态变化,并检测AND在蛋白质水平对PI3K/AKT通路的影响。结果:通过网络药理学手段获得AND的40个神经胶质瘤相关靶点,并应用生物信息学方法筛选出10个枢纽基因,AND与其有较强的结合活性。GO、KEGG富集分析结果显示,上述枢纽基因参与神经元凋亡过程的调控、活性氧代谢等生物过程,且与PI3K/AKT等信号通路有关。GSEA富集分析提示PI3K/AKT-mTOR等信号通路在神经胶质瘤干细胞中显著上调。枢纽基因中HSP90AA1、HSP90AB1、RHOA、CDK2、MET在神经胶质瘤样本与正常样本间存在显著差异,Kaplan-Meier生存曲线显示低表达的枢纽基因BCL2L1、CDK2、SOD2、MET有较高的生存率。体外研究发现,AND时间、浓度依赖性地抑制U251细胞的生长。在AND的作用下,U251细胞出现变圆、皱缩,并显著降低PI3K/AKT通路相关蛋白p-PI3K、p-AKT、p-PI3K/PI3K、p-AKT/AKT蛋白的表达。结论:AND可抑制人神经胶质瘤U251细胞增殖,其作用机制与PI3K/AKT信号通路相关。