观赏鱼中真鲷虹彩病毒检测方法比较研究

为了解不同方法对观赏鱼中真鲷虹彩病毒(RSIVD)感染诊断的效果,探索有效的真鲷虹彩病毒检测方法,保证检测结果准确,提高实验室检测能力。本文以观赏鱼为材料,通过扩增曲线和Ct值,对SYBR Green法和荧光探针法进行比较分析;进一步对PCR产物进行毛细管电泳分析和构建发育树。结果表明,SYBR Green法和荧光探针法的扩增曲线均与标准对照曲线重合,Ct值也在阳性判定结果范围内;NCBI数据库blast比对,得到与标准对照品相似的片段。四种方法均能准确检测出观赏鱼中真鲷虹彩病毒病,为观赏鱼中真鲷虹彩病毒检测方法的选择应用提供了参考。

中国4省份葡萄霜霉病菌群体对烯酰吗啉的抗性及适合度

为明确我国山西、山东、河北和云南省葡萄霜霉病菌对烯酰吗啉的抗性以及田间病菌群体的适合度,本研究采用Taqman-MGB技术检测了2020年-2021年采自上述4省份292株葡萄霜霉病菌对烯酰吗啉的抗性频率;采用叶盘法测定了田间抗性菌株与敏感菌株的适合度。结果表明,上述4个地区的平均烯酰吗啉抗性频率及抗性等位基因频率分别为64.0%和74.7%,其中山东省蓬莱区最高(91.2%和96.3%),河北省廊坊市(73.8%和85.0%)和云南省宾川县(75.0%和82.6%)次之,山西省清徐县(16.7%和34.7%)最低。适合度分析发现,田间抗性菌株的产孢能力明显高于敏感菌株,但二者的复合适合度指数无显著差异。上述结果表明,4省份霜霉病菌群体均对烯酰吗啉产生了不同程度的抗性,田间抗性菌株与敏感菌株相比无明显适合度变化。

云南省葡萄霜霉病菌群体遗传结构的SSR分析

为明确云南特色葡萄产区葡萄霜霉病菌的群体遗传结构,本研究采用7对SSR分子标记对采自云南3个地区的155株葡萄霜霉病菌进行了群体遗传多样性研究,并分析了病原菌群体遗传结构与地域之间的关系。7对引物共检测出41个等位基因,114种基因型,病原菌群体的Shannon’s信息指数和Nei’s无偏基因多样性指数分别为0.942和0.600。分子方差分析和群体连锁不平衡分析显示,不同群体间存在相当大的遗传变异。遗传分化系数、基因流以及Structure分析表明,元谋群体与宾川、寻甸两群体之间均具有较高的基因交流,宾川和寻甸两群体间则存在一定的遗传分化。上述结果表明,云南葡萄霜霉病菌群体存在较高水平的遗传多样性,且群体遗传结构与地理距离之间存在一定相关性。

高通量测序技术在海关监管中的应用概述

高通量测序技术被称为新一代测序技术,能够对大量核酸分子进行平行序列测定,具有高效、准确的特点。该技术利用大规模平行信号和焦磷酸测序法,可以同时对数百万个短序列读长进行测序,高通量测序技术的应用日趋广泛和成熟,给不同领域带来深刻影响乃至巨大变革。本文通过综述高通量测序的发展历程及测序原理,总结其在动物检疫、植物检疫、卫生检疫和食品微生物检疫4个领域的应用情况,展现高通量测序技术为海关检验检疫带来的最新成果,探讨高通量测序技术在检验检疫方面应用的新思路,也可为今后的相关研究提供理论基础及借鉴资料。

我国云南、湖北和山东葡萄产区霜霉病菌对甲霜灵的抗性检测

为明确我国云南省宾川县、湖北省公安县和山东省烟台市葡萄产区霜霉病菌对甲霜灵的抗性发生态势,采用叶盘漂浮法测定了这3个产区共127株葡萄霜霉病菌对甲霜灵的抗性频率及抗性水平。结果显示,不同区域间病菌的抗性频率和抗性水平均存在差异。其中,湖北省公安县霜霉病菌的抗性频率和抗性水平均较高,抗性频率达92.0%,高抗菌株占76.0%,低抗菌株占16.0%,敏感菌株占8.0%;山东省烟台市霜霉病菌的抗性频率为74.0%,低抗菌株占64.0%,高抗菌株占10.0%,敏感菌株占26.0%;云南省宾川县霜霉病菌的抗性频率和抗性水平均较低,抗性频率为29.6%,敏感菌株占70.4%,低抗菌株占29.6%,无高抗菌株。

垂柳挥发物的GC-MS成分分析

目的:研究垂柳挥发物的化学成分和相对含量,为探索垂柳挥发物吸引天敌的功效及其药用价值提供科学依据。方法:通过动态顶空吸附法收集垂柳挥发物,利用气质联用仪分析鉴定垂柳挥发物的化学成分和相对含量。结果:从垂柳挥发物中共鉴定出41种化学成分,其中健康垂柳挥发物33种,蚜害垂柳挥发物38种。健康垂柳挥发物与蚜害垂柳挥发物在组成和比例上存在显著差异。其中,蚜害垂柳挥发物新增6种烯类物质、1种醛类物质和1种酮类物质。结论:蚜害垂柳挥发物新增烯类、醛类和酮类化合物可能具有吸引天敌的功效,在生态保护垂柳中起着重要作用;垂柳挥发物的一些功能性成分具有良好药用价值,还需深入研究。

同时蒸馏萃取-气质联用法分析鹞落坪自然保护区茶鲜叶挥发性成分

目的:研究鹞落坪自然保护区茶鲜叶挥发物的种类和相对含量,为探索高山茶区的茶叶品质和药用价值提供科学依据。方法:利用同时蒸馏萃取-气质联用法分析茶鲜叶挥发性成分。结果:从石佛香、石佛翠2个茶树品种中共鉴定出挥发物41种,其中,石佛香32种、石佛翠38种。石佛香、石佛翠的主要挥发性成分均为绿叶挥发物,石佛翠的萜烯类化合物种类和相对含量多于石佛香,石佛翠的酮类物质亦多于石佛香,石佛翠还含有1种杂环化合物。结论:石佛香、石佛翠的主要挥发性成分对高山茶独特香气的形成具有重要作用;二者挥发物的组成和比例存在一定差异,有些微量成分可能与茶树不同品种在生长过程中的防御作用相关;茶鲜叶挥发物中的功能性成分具有良好的药用价值,值得深入研究。

光肩星天牛成虫对植物气味的选择反应

利用Y形嗅觉仪测定光肩星天牛成虫在补充营养阶段对多种寄主植物的选择反应.结果表明,天牛成虫对7种植物气味均有一定的趋向性.其中,未交配和已交配的雌虫对旱柳的选择达到极显著水平(P<0.01),对五角枫的选择达到显著水平(P<0.05),未交配和已交配的雄虫对旱柳的选择达到显著水平(P<0.05),为进一步探索植物挥发物调控光肩星天牛的化学生态机理打下基础.

五类内吸性杀菌剂在葡萄上的抗药性研究

生产上防治卵菌引起的葡萄病害最普遍、最有效的措施还是化学防治。然而,化学杀菌剂的大量频繁使用导致卵菌产生抗药性的风险增加,抗药性的出现引发了一系列问题,使农业生产蒙受了巨大的损失。同时,病原菌抗药性的存在也是我国"化学肥料和农药减施增效、农业绿色发展"战略的重大障碍。结合国内外抗药性研究进展,概述了目前生产上常用的五大类内吸性杀菌剂甲氧基丙烯酸酯类(QoI)、羧酸酰胺类(CAAs)、苯基酰胺类(PAFs)、氰基乙酰胺类和磺胺咪唑类杀菌剂的抗性现状、抗性类型和抗性机制以及抗药性检测方法,以期为生产上快速有效防治卵菌病害提供科学指导。

黑龙江和云南葡萄产区灰霉病菌对多菌灵和异菌脲的抗性检测

为明确黑龙江省和云南省葡萄灰霉病菌对多菌灵和异菌脲的抗性频率,从两省分别采集、分离到葡萄灰霉病菌Botrytis cinerea 39株和38株,利用菌丝生长速率法测定其对多菌灵和异菌脲的敏感性,并分别检测上述菌株两种药剂靶标基因β-tubulin和Bos1的突变情况。结果表明,黑龙江省葡萄灰霉病菌对多菌灵和异菌脲的抗性频率以及对两种杀菌剂的多药抗性频率分别为100.0%、51.3%和51.3%;云南省葡萄灰霉病菌对多菌灵和异菌脲的抗性频率以及对两种杀菌剂的多药抗性频率均为97.4%。两地区的多菌灵抗性菌株的β-tubulin基因上均发生了E198A或E198V突变。异菌脲抗性菌株的Bos1基因存在I365N、I365S、Q369P+N373和Q369P等4种突变类型。研究结果表明,在上述两个地区不宜单独使用多菌灵和异菌脲防治葡萄灰霉病,应使用其他作用机制不同且抑菌效果好的杀菌剂。

我国葡萄灰霉病菌对四霉素和啶酰菌胺的敏感性测定

灰霉病是葡萄生产上的重要病害之一,严重影响葡萄果实的品质和产量。为明确葡萄灰霉病菌对四霉素和啶酰菌胺的敏感性,本研究分别采用菌丝生长速率法和孢子萌发法测定了四霉素和啶酰菌胺对采自云南省宾川县、湖北省武汉市和辽宁省北镇市60株葡萄灰霉病菌的有效抑制中浓度EC,建立了敏感性基线,并分析了二者之间的交互抗性。结果显示,葡萄灰霉病菌对四霉素和啶酰菌胺的敏感基线分别为0.245和1.115μg/mL;上述葡萄灰霉病菌均对四霉素敏感,而11.7%的菌株表现为啶酰菌胺抗性。并且四霉素与啶酰菌胺之间不存在交互抗性(r=-0.040,P>0.05)。因此,四霉素可作为防治葡萄灰霉病的候选药剂,研究结果对两种杀菌剂的科学使用以及葡萄灰霉病的可持续防控具有重要的理论和实践意义。

山东蓬莱葡萄灰霉菌对7种杀菌剂的抗药性检测

为了明确葡萄灰霉菌对啶酰菌胺、多菌灵、咯菌腈、异菌脲、腐霉利、嘧霉胺的抗药性和对抑霉唑的敏感性,本试验采用菌丝生长速率法和孢子萌发法检测了采自山东蓬莱地区的69株葡萄灰霉菌对上述前6种杀菌剂的抗药性、对抑霉唑的敏感性及抑霉唑与其他6种杀菌剂的交互抗性关系。结果表明,抑霉唑对这69株葡萄灰霉菌的EC_(50)分布在0.403～28.76μg/mL之间,平均值为(9.34±10.34)μg/mL;葡萄灰霉菌菌株中抗啶酰菌胺(BosR)、多菌灵(CarR)、咯菌腈(FluR)、异菌脲(IprR)、嘧霉胺(PyrR)、腐霉利(ProR)的比例分别为100%、100%、9.47%、97.18%、100%、89.20%,测试菌株的抗药性均为多抗类型,没有单抗菌株,其中对3种杀菌剂(啶酰菌胺、多菌灵、嘧霉胺)、对4种杀菌剂(啶酰菌胺、多菌灵、异菌脲、嘧霉胺)、对5种杀菌剂(啶酰菌胺、多菌灵、异菌脲、嘧霉胺、腐霉利或啶酰菌胺、多菌灵、咯菌腈、异菌脲、嘧霉胺)和对6种杀菌剂(啶酰菌胺、多菌灵、咯菌腈、异菌脲、嘧霉胺、腐霉利)的抗性频率分别为2.33%、9.30%、79.07%、2.33%、6.97%,表明啶酰菌胺、多菌灵、嘧霉胺对测试葡萄菌株完全丧失防效,建议在该葡萄产区停止使用这些药剂,测试菌株对腐霉利、异菌脲的抗性频率高,建议采取限制使用、禁止单独使用等措施,测试菌株对咯菌腈的抗性频率较低,可以继续使用但需按照科学使用规则进行。抑霉唑与其他6种杀菌剂间不存在交互抗性关系,说明其可以和其他药剂同时使用但建议减少使用。