益肾祛痹通络方对肾虚寒湿痹阻型CIA大鼠miR-150-5p/SOCS1轴的调控作用

目的探究益肾祛痹通络方对肾虚寒湿痹阻型胶原诱导关节炎大鼠的治疗作用及对miR-150-5p、细胞因子信号抑制因子1(suppressor of cytokine signaling,SOCS 1)的影响。方法20只SPF级SD大鼠,随机选取6只为正常对照组,另外14只构建肾虚寒湿痹阻型胶原诱导关节炎大鼠模型,成功10只,随机分为模型组、治疗组,各5只。治疗组予益肾祛痹通络方(0.2g/ml)灌胃治疗,每日1次,共2周。模型组及对照组均予生理盐水灌胃处理。HE染色观察踝关节软骨组织病变情况;免疫组化检测踝关节中vimentin的表达水平;qPCR检测踝关节组织中的miR-150-5p、SOCS1 mRNA表达水平;ELISA检测血清中TNF-α、IL-6的表达水平。结果与对照组比较,模型组关节炎指数明显升高(P<0.05),HE染色表明踝关节明显狭窄,软骨损伤明显,滑膜组织增生,炎症细胞浸润;踝关节中vimentin、miR-150-5p水平升高(P<0.05),SOCS1 mRNA的表达水平无明显变化(P>0.05);血清中TNF-α、IL-6的表达水平明显升高(P<0.05)。与模型组比较,治疗组关节炎指数明显降低(P<0.05),HE染色表明关节腔未见明显狭窄,滑膜组织增生现象减少,软骨表面光滑,炎症细胞浸润降低,踝关节损伤明显改善。踝关节vimentin、miR-150-5p水平明显降低(P<0.05),SOCS1mRNA水平明显升高(P<0.05);血清中TNF-α、IL-6水平明显降低(P<0.05)。结论益肾祛痹通络方可能通过调控miR-150-5p/SOCS1通路,抑制细胞因子表达,改善关节炎症。

温肺化纤汤对系统性硬化症相关间质性肺病模型小鼠肺组织纤维化及内质网应激的影响

目的探讨温肺化纤汤治疗系统性硬化症相关间质性肺病(SSc-ILD)肺纤维化的作用机制。方法将60只C3H/He雌鼠随机分为对照组、模型组、吡非尼酮组及温肺化纤汤低、中、高剂量组。除对照组外,其余各组小鼠予博来霉素溶液0.04 mg/d背部皮下连续注射28天建立SSc-ILD小鼠模型。造模成功后,吡非尼酮组予吡非尼酮胶囊300 mg/(kg·d)灌胃,温肺化纤汤低、中、高剂量组分别给予温肺化纤汤7.81、15.62、31.24 g/(kg·d)灌胃,对照组及模型组予生理盐水0.1 ml/10 g灌胃,共21天。干预结束后采用HE染色和Masson染色观察小鼠皮肤及肺组织的病理变化;检测小鼠皮肤及肺组织的羟脯氨酸含量;Western blot法测定小鼠肺组织中的内质网应激相关蛋白葡萄糖调节蛋白78(BIP)和C/EBP同源蛋白(CHOP)及核因子κB(NF-κB)通路中p65的蛋白表达水平;ELISA测定小鼠血清中的γ干扰素(IFN-γ)、白细胞介素6(IL-6)和肿瘤坏死因子α(TNF-α)的表达水平。结果HE染色、Masson染色结果显示,与对照组比较,模型组小鼠皮肤组织表皮棘层肥厚,胶原纤维明显增粗、膨大,数量增多,炎性细胞明显增多;肺组织出现明显的炎性细胞反应,大量胶原纤维增生,并伴有炎性细胞浸润。与模型组比较,吡非尼酮组和温肺化纤汤各剂量组皮肤组织和肺组织胶原纤维增生明显减少,炎性细胞浸润减少,且吡非尼酮组和温肺化纤汤中、高剂量组效果基本相当。与对照组比较,模型组小鼠皮肤组织和肺组织羟脯氨酸含量,血清IFN-γ、IL-6、TNF-α含量,肺组织BIP和CHOP蛋白表达水平均升高(P<0.05)。与模型组比较,吡非尼酮组和温肺化纤汤低、中剂量组皮肤组织羟脯氨酸含量降低,温肺化纤汤中剂量组肺组织羟脯氨酸含量下降,吡非尼酮组和温肺化纤汤高剂量组小鼠血清IFN-γ、IL-6、TNF-α含量及肺组织BIP、CHOP和p65蛋白表达水平降低(P<0.05)。温肺化纤汤中剂量组肺组织羟脯氨酸含量明显低于温肺化纤汤低、高剂量组,温肺化纤汤低、中剂量组小鼠血清IFN-γ、IL-6、TNF-α含量高于温肺化纤汤高剂量组,温肺化纤汤高剂量组BIP蛋白表达水平明显低于温肺化纤汤低、中剂量组(P<0.05)。结论温肺化纤汤可改善SSc-ILD模型小鼠皮肤组织及肺组织纤维化,其作用机制可能是通过抗炎、抑制NF-κB通路,进而抑制内质网应激,最终阻抑纤维化进程。