分子印迹固相萃取-高效液相色谱法测定蜂蜜中三种氟喹诺酮类抗生素残留

采用沉淀聚合法,以诺氟沙星为模板分子,合成了对氟喹诺酮类(FQs)抗生素特异性识别的分子印迹聚合物(MIPs),其印迹因子为3.17,亲和位点总数为3.27μmol/g。以该MIPs做为固相萃取柱填料,建立了分子印迹固相萃取-高效液相色谱检测蜂蜜中三种FQs抗生素残留的方法。与Oasis HLB固相萃取柱相比,该分子印迹固相萃取柱(MISPE)具有更好的净化能力和更高的富集效率。最佳条件下,三种FQs抗生素的线性范围为0.125～12.5mg/kg,相关系数均大于0.999。方法的检出限(S/N=3)为9～12μg/kg,三种FQs抗生素的加标回收率为96.5%～104.1%,相对标准偏差不高于6.2%(n=5)。该方法有望用于蜂蜜中FQs抗生素残留的常规检测。

分子印迹固相萃取-高效液相色谱法测定猪肉中红霉素残留

采用沉淀聚合法，以红霉素（ erythromycin，ERY）为模板，甲基丙烯酸（ methacrylic acid，MAA）为功能单体，乙二醇二甲基丙烯酸酯（ethyleneglycoldimethacrylate，EGDMA）为交联剂，甲醇/乙腈（1∶4，v/v）为致孔剂制备了ERY分子印迹聚合物（ molecularly imprinted polymers，MIPs）。通过扫描电镜、平衡吸附实验等对制备的印迹和非印迹聚合物进行表征和测定，结果表明所制备的 MIPs 对 ERY 具有特异性吸附作用。Scatchard 分析证明MIPs对 ERY的吸附存在两类不同结合位点，最大表观结合量（ Qmax ）和平衡解离常数（ Kd ）分别为 Qmax1＝45.24 mg/g，Kd1＝0.028 g/L；Qmax2＝87.53 mg/g，Kd2＝0.20 g/L。以制备的 MIPs为吸附剂的分子印迹固相萃取柱，结合高效液相色谱法能够快速检测猪肉样品中的 ERY 残留，线性范围为0.5~50 mg/L（ r2＝0.9994），检出限（ S/N＝3）为0.2 mg/kg。猪肉样品中不同添加水平下 ERY的加标回收率为95.2％~104.2％，相对标准偏差（ RSD）小于5％。该方法选择性好，灵敏、可靠，可用于猪肉等复杂食品样本中 ERY残留的检测。

分子印迹固相萃取-高效液相色谱法用于奶粉样品中痕量三聚氰胺的残留检测

目的以三聚氰胺为模板分子,制备一系列三聚氰胺分子印迹聚合物(molecularly imprinted polymers,MIPs),将MIPs作为固相萃取吸附剂,与高效液相色谱联用检测奶粉样品中残留的痕量三聚氰胺。方法采用沉淀聚合法依次优化致孔剂种类、功能单体与模板分子之间的摩尔比、交联剂的用量,得到对三聚氰胺具有特异性识别能力和高吸附容量的分子印迹聚合物,对60mL奶粉样品提取液中痕量三聚氰胺进行净化和富集。结果萃取回收率为85.1%～99.7%,固相萃取过程不但可以避免繁琐的样品浓缩过程,缩短了样品前处理时间,而且降低了二次污染。方法的加标回收率为89.7%～100.6%,相对标准偏差(RSD)不高于3.1%。与国家标准方法(GB/T 22388-2008)所用的萃取柱(MCX)相比,MIPs萃取柱表现出更好的净化和富集效果。结论建立了一种奶粉样品中痕量三聚氰胺的残留检测方法,为监控食品样本中痕量三聚氰胺残留检测提供有力的技术支持。

高灵敏特异性红霉素印迹传感器用于血样中红霉素的测定

目的构建一种高灵敏特异性分子印迹电化学传感器用于血样中红霉素（erythromycin，ERY）的检测。方法采用沉淀聚合法，以ERY为模板分子，优化模板分子与功能单体之间的摩尔比和交联剂的用量，制备一种分子印迹聚合物（molecularly imprinted polymers，MIPs），并利用其特异识别能力与乙炔黑（acetylene black，AB）高催化活性相结合，构建一种分子印迹电化学传感器，用于血样中ERY的检测。结果该传感器对ERY具有良好的选择性以及较高的灵敏度，印迹因子为3．6。检测线性范围为1．0×10^-8～5．0×10^-6mol／L（r^2=0．9978），检出限为4．3×10mol／L。该法用于人血清中ERY的测定，加标回收率为82．0％～119．8％。结论建立了一种高灵敏特异性分子印迹电化学传感器，能用于血样中ERY的快速检测，为指导ERY的使用和保护人体健康提供有力的技术支持。

肾综合征出血热患者发热期淋巴细胞亚群和病毒载量的研究

目的探讨青岛市肾综合征出血热(HFRS)患者发热期淋巴细胞亚群和病毒载量的变化特点。方法 25例HFRS发热期患者设为HFRS发热期组,30例无偿献血者设为正常对照组。通过胶体金法检测HFRS发热期组的汉坦病毒免疫球蛋白M(Ig M)抗体;通过荧光定量聚合酶链反应(PCR)和流式细胞仪测定两组的淋巴细胞亚群和病毒载量。结果 HFRS发热期组血清中Ig M抗体阳性,其病毒载量为(69.8±27.4)copies/μl。HFRS发热期组总T细胞(CD3+)和T抑制/细胞毒细胞亚群(CD3+CD8+)百分比显著高于正常对照组,T辅助/诱导细胞亚群(CD3+CD4+)百分比和CD4/CD8 T细胞比值(CD4+/CD8+)及自然杀伤细胞(CD16+56+)百分比明显低于正常对照组,差异有统计学意义(P<0.01),但B细胞(CD3-CD19+)百分比与正常对照组比较差异无统计学意义(P>0.05)。结论总T细胞和T抑制/细胞毒细胞亚群百分比增高有利于HFRS患者早期的免疫应答。

重症监护室鲍曼不动杆菌感染及药敏试验研究

目的了解重症监护室(ICU)患者鲍曼不动杆菌感染及耐药情况,指导临床医师选择有效抗生素进行抗感染治疗,控制院内感染的发生。方法 2008年1月至2010年1月期间自重症监护室患者分离鲍曼不动杆菌,细菌鉴定用VITEK-GNI+,药敏试验采用K-B法。结果分离出172株鲍曼不动杆菌,主要来自呼吸道感染患者痰液,占87.21%,以综合性重症监护室鲍曼不动杆菌的检出率为最高。药敏结果显示鲍曼不动杆菌对米诺环素、亚胺培南、头孢哌酮/舒巴坦、哌拉西林/他唑巴坦及左氧氟沙星的耐药率低,分别为1.32%,5.88%、4.71%、17.65%和23.53%,而对其他抗生素有较强的耐药性。结论鲍曼不动杆菌是重症监护室呼吸道感染的常见菌,且耐药性高,建议选用米诺环素、亚胺培南、头孢哌酮/舒巴坦、哌拉西林/他唑巴坦和左氧氟沙星治疗鲍曼不动杆菌的感染。

疑似新生儿溶血病961例筛查结果与分析

目的:探讨新生儿溶血病(HDN)的检出情况及血清学检测分布。方法:对961例疑似HDN新生儿血液样本,进行ABO、Rh血型鉴定及溶血三项血清学检测。结果:疑似标本中共检出ABO-HDN 249例、Rh-HDN 12例。其中A型血中ABO-HDN检出率显著高于B型血(P<0.05),各血型Rh-HDN检出率差异无统计学意义(P>0.05)。女性疑似HDN新生儿中ABO-HDN检出率显著高于男性(P<0.05),而不同性别疑似HDN新生儿Rh-HDN检出率差异无统计学意义(P>0.05)。随出生时间延长,ABO-HDN新生儿检出率逐渐减少,释放+游离试验阳性率逐渐减少,但释放单项试验阳性率逐渐增加。结论:HDN以ABO-HDN为主,出生3d内检出率最高,随出生时间的延长HDN检出率逐渐降低,但仍具有送检意义。

血清G和GM试验对侵袭性肺曲霉菌病的诊断价值

目的探讨血清1,3-β-D-葡聚糖(G)和半乳甘露聚糖(GM)试验对侵袭性肺曲霉菌病(IPA)的诊断价值。方法回顾性分析2017年6月—2018年12月我院68例IPA住院患者(IPA组)及同时期128例非IPA住院患者(非IPA组)的血清G和GM试验结果,绘制受试者工作特征(ROC)曲线,并计算曲线下面积(AUC)、cut-off值,以及G试验和GM试验诊断IPA的灵敏度和特异度等。结果IPA组和非IPA组血清中G的含量分别为(203.03±56.26)和(29.42±4.71)μg/L,血清中GM的含量分别为(1.14±0.62)和(0.32±0.07)μg/L,IPA组均显著高于非IPA组,差异有统计学意义(t=3.537、5.308,P<0.05)。G试验和GM试验ROC曲线的AUC分别为0.637和0.756,各自相应的cut-off值分别为35.60和0.46μg/L。在该cut-off值下,G试验和GM试验诊断IPA的灵敏度分别为82.35%、55.47%,特异度分别为61.76%、80.47%,两者诊断IPA的灵敏度和特异度比较差异均有统计学意义(χ^2=7.16、18.37,P<0.05)。结论G试验和GM试验对IPA有较高的诊断价值,两者作为辅助诊断IPA的重要检测技术,优势互补;确定合适的诊断IPA的G试验和GM试验的cut-off值,将有助于提高IPA的诊断率。

新生儿非ABO溶血病的血清抗体分析

目的探讨新生儿非ABO溶血病的血清抗体情况,为其治疗和预防提供参考依据。方法对30例非ABO溶血病新生儿血清抗体进行检测,25例病儿母亲有生产史,22例有流产史,2例为第一胎。结果抗-D者16例,抗-D联合抗-E者1例,共17例,占56.7%;抗-E者5例,抗-E联合抗-c者5例,抗-E联合抗-Jkb者1例,共11例,占36.7%;抗-C者1例,MNS血型系统抗-M抗体1例,各占3.3%。结论临床应重视对孕妇进行产前不规则抗体的筛查,尤其是有生产史或流产史的孕妇,应加强对E抗原的检测。