LINC01006靶向miR-331-3p调控多发性骨髓瘤细胞的增殖、凋亡和转移的机制研究

目的:探讨LINC01006靶向miR-331-3p在多发性骨髓瘤(multiple myeloma,MM)进展中的功能。方法:RT-qPCR检测39例MM患者和22例正常对照者骨髓标本来源的浆细胞中LINC01006和miR-331-3p的表达。分别转染si-LINC01006、si-NC、miR-331-3p mimics、miR-NC、si-LINC01006+anti-miR-NC、si-LINC01006+anti-miR-331-3p至MM细胞U266,通过CCK-8、流式细胞术和Transwell法评估U266细胞抑制率、凋亡率和转移数。DIANA Tools网站预测LINC01006与miR-331-3p的相互作用,并通过双荧光素酶报告基因法进一步验证。结果:MM患者骨髓标本来源的浆细胞中LINC01006表达升高,miR-331-3p表达降低。转染si-LINC01006可增加细胞抑制率和凋亡率(P<0.05),减少细胞转移数(P<0.05),并上调miR-331-3p表达(P<0.05)。转染miR-331-3p mimics可增加细胞抑制率和凋亡率(P<0.05),减少细胞转移数(P<0.05)。miR-331-3p与LINC01006直接结合。转染anti-miR-331-3p显著逆转转染si-LINC01006对MM细胞抑制率、凋亡率和转移数的影响。结论:沉默LINC01006通过促进miR-331-3p表达来抑制MM细胞增殖和转移,诱导凋亡,从而抑制MM进展。

急性髓系白血病NRAS基因突变患者临床特征及细胞遗传学分析

目的探讨NRAS基因突变的急性髓系白血病(AML)患者临床特点及细胞遗传学特征。方法选取2020年1月至2022年8月在遵义市第一人民医院初诊的162例AML患者,对其临床资料进行回顾性分析,根据NRAS基因突变情况分为NRAS突变组和NRAS野生组,比较2组临床特征和细胞遗传学差异。结果162例初诊为AML的患者中,NRAS突变28例,NRAS野生134例。其中NRAS突变组外周白细胞计数(53.10×109/L)高于NRAS野生组(24.78×109/L),差异有统计学意义(P<0.05),2组血红蛋白、血小板计数及骨髓原幼细胞数差异无统计学意义(P>0.05)。NRAS突变组中25例出现共存基因突变,突变率为89.3%,最常见的共存突变基因为KRAS,突变率为28.6%,与NRAS野生组比,NRAS突变组更易获得KRAS突变(P<0.05);其他共存突变基因差异无统计学意义(P>0.05)。染色体分型比较发现,NRAS突变组的预后不良核型比例更高,达到23.1%,差异有统计学意义(P<0.05);预后良好核型和预后中等核型占比分别为7.7%和69.2%,差异无统计学意义(P>0.05)。结论AML患者NRAS基因突变发生率为17.3%,其更容易合并KRAS基因突变,在预后不良核型中占比较高。

circ_NEK6/miR-503-5p对多发性骨髓瘤细胞增殖、凋亡及迁移的影响

目的探讨circ_NEK6/miR-503-5p分子轴对多发性骨髓瘤细胞增殖、凋亡及迁移的影响及其可能的作用机制。方法选取2020年2月至2021年7月遵义医科大学第三附属医院收治的30例多发性骨髓瘤患者为研究组,同时选取在该院体检的55例健康志愿者为对照组;qRT-PCR法检测血清中circ_NEK6、miR-503-5p的表达量;体外培养人多发性骨髓瘤U266细胞,分为si-circ_NEK6组、miR-503-5p组和si-circ_NEK6+anti-miR-503-5p组以及相应的对照组(si-NC组、miR-NC组、si-circ_NEK6+anti-miR-NC组);细胞增殖、凋亡及迁移用MTT法、克隆形成实验、流式细胞术与Transwell实验测定;双荧光素酶报告基因实验验证circ_NEK6与miR-503-5p之间的靶向关系;Western blot检测Bax、Bcl-2蛋白表达量。结果与对照组比较,研究组患者血清中circ_NEK6高表达(P<0.05),miR-503-5p低表达(P<0.05);si-circ_NEK6组U266细胞miR-503-5p的表达、细胞增殖抑制率、凋亡率和Bax水平增加(均P<0.05),而克隆数、迁移数和Bcl-2水平降低(均P<0.05);circ_NEK6可靶向结合miR-503-5p;在miR-503-5p组U266细胞,细胞增殖抑制率、凋亡率和Bax水平上升(均P<0.05),而克隆数、迁移数和Bcl-2水平降低(均P<0.05);此外,si-circ_NEK6+anti-miR-503-5p组细胞增殖抑制率、凋亡率和Bax水平降低(均P<0.05),而克隆数、迁移数和Bcl-2水平升高(P<0.05)。结论敲低circ_NEK6可以通过靶向miR-503-5p降低多发性骨髓瘤细胞生长和迁移能力。

弥漫性大B细胞淋巴瘤组织Livin和Caspase-3表达变化及意义

目的探讨组织凋亡抑制蛋白Livin和天冬氨酸特异性半胱氨酸蛋白酶3(Caspase-3)在弥漫性大B细胞淋巴瘤(DLBCL)发生、发展中的作用。方法选择DLBCL患者69例(DLBCL组)、反应性增生性淋巴结炎(RHL)患者30例(RHL组),分别取两组病变淋巴组织标本,采用免疫组化法检测Livin、Caspase-3表达。分析DLBCL组织Livin、Caspase-3阳性表达与患者临床病理参数和预后的关系。结果 DLBCL组病变淋巴组织Livin阳性表达率高于RHL组,Caspase-3阳性表达率低于RHL组,两组比较P均<0. 05。GCB型DLBCL患者病变淋巴组织Livin阳性表达率低于非GCB型DLBCL患者,Caspase-3阳性表达率高于非GCB型DLBCL患者(P均<0. 01);Ann Arbor分期为Ⅰ、Ⅱ期者病变淋巴组织Livin阳性表达率低于Ⅲ、Ⅳ期者,Caspase-3阳性表达率高于Ⅲ、Ⅳ期者(P <0. 05)。DLBCL病变淋巴组织Livin阳性表达与Caspase-3阳性表达呈负相关关系(r=-0. 308,P <0. 01)。DLBCL患者Livin阴性表达者生存率高于Livin阳性表达者,生存时间长于Livin阳性表达者(P均<0. 01); DLBCL患者Caspase-3阳性表达者生存率高于Caspase-3阴性表达者,生存时间长于Caspase-3阴性表达者(P均<0. 01)。结论 DLBCL病变淋巴组织Livin表达上调、Caspase-3表达下调,二者表达变化共同参与DLBCL的发生、发展,并与患者不良预后密切相关。

Pim-3基因在急性髓系白血病中的表达及意义

目的:探讨Pim-3基因的异常表达在急性髓系白血病发展过程中的作用。方法:使用半定量RT-PCR法检测47例初诊未经治疗的急性白血病患者骨髓及18例经化疗治疗后急性白血病患者骨髓标本Pim-3基因的表达,同时采集非恶性血液病患者骨髓组织10例作为正常对照组,比较3组骨髓组织Pim-3基因表达量的差异。结果:RT-PCR检测结果显示,化疗前急性髓系白血病患者骨髓Pim-3基因表达量相对非恶性血液病骨髓表达量明显降低(P<0.01)。经化疗治疗后的骨髓Pim-3基因表达量与非恶性血液病骨髓表达量无明显差异(P>0.05),而化疗前急性髓系白血病患者骨髓Pim-3基因表达量明显低于化疗后急性髓系白血病患者(P<0.01)。缓解组急性髓系白血病患者化疗前后对比显示,化疗前比化疗后骨髓Pim-3基因表达量明显降低(P<0.01),而未缓解组中急性髓细胞白血病(AML)患者化疗前与化疗后骨髓组织Pim-3基因表达量无明显差异(P>0.05),化疗后未缓解的急性髓系白血病患者骨髓Pim-3基因表达量亦明显低于缓解后患者(P<0.01)。结论:Pim-3基因在化疗前后急性髓系白血病中有异常表达,该基因可能参与了急性髓系白血病的发生发展。

Pim-3的研究进展

随着肿瘤发病学研究的深入,丝/苏氨酸蛋白激酶pim-3越来越受关注。Pim-3作为Pim家族的新成员,与Pim-1、Pim-2相似能磷酸化众多特异性底物,在细胞周期和细胞凋亡进程中起重要调控作用。随着对Pim-3作用机制的深入研究,将有助于为临床上众多疾病治疗提供一个新的作用靶点。