第五版WHO《泌尿和男性生殖系统肿瘤分类》中前列腺肿瘤主要变化解读

2022年出版的第五版WHO《泌尿和男性生殖系统肿瘤分类》较第四版内容上出现了一些变化,包括更新了一些诊断术语、流行病学、发病机制、组织病理学、分子病理学以及预后评估等方面内容。其中,有关前列腺肿瘤的内容也有较多的更新,与第五版WHO其他系统肿瘤分类保持一致,前列腺肿瘤在诊断术语上,使用“亚型”的命名替代“变型”;将淋巴造血系统肿瘤、神经内分泌肿瘤、间叶源性肿瘤、黑色素细胞肿瘤及转移性肿瘤作为独立的章节阐述;鉴于治疗相关的神经内分泌前列腺癌(treatment-related neuroendocrine prostatic carcinomas,t-NEPCs)和特有的间叶源性肿瘤在生物学和临床上的独特特征,仍放在前列腺章节内单独阐述;将前列腺和前列腺尿道的尿路上皮癌归入尿路上皮肿瘤章节进行阐述;对前列腺导管内癌(intraductal carcinoma of the prostate,IDC-P)及腺泡腺癌进行了内容更新,增加了“不典型导管内增生(atypical intraductal proliferation,AIP)”诊断术语。本文就第五版WHO《泌尿和男性生殖系统肿瘤分类》中前列腺肿瘤的一些主要变化内容进行解读。

皮肤富于细胞性Neurothekeoma1例

患者,男,34岁,1年前无意触及头顶部皮肤肿物,质软,无压痛,边界清,较固定,皮肤无红肿,无其他不适。术中包块位于顶部皮下,边界清,与周围组织无粘连,完整切除。本研究已通过上海交通大学医学院附属松江医院医学伦理委员会批准(批准号:2024056)。病理检查①巨检:皮肤组织一块,大小0.6 cm×0.2 cm×0.2 cm,表面见一灰白色隆起,直径0.5 cm,皮肤表面附毛发。

Survivin和Bcl-2蛋白在胃癌细胞中的表达及其与化疗药物耐药性关系的研究

目的:检测Survivin和Bcl-2蛋白在胃癌组织中的表达,探讨Survivin和Bcl-2基因与胃癌化疗药物耐药性的关系。方法:取新鲜胃癌手术标本98例,免疫组化检测Survivin和Bcl-2蛋白在胃癌组织中的表达。同时进行原代胃癌细胞培养,MTT比色法检测原代培养细胞对化疗药物HCPT、CDDP、5-FU、ADM和MMC的敏感性。结果:胃癌组织中Survivin和Bcl-2蛋白的阳性率分别为74.5%和70.4%。Survivin阳性表达者对5-FU和ADM的耐药性显著高于阴性者,差异有统计学意义(P<0.05)。5-FU、ADM和MMC三种药物对Bcl-2阳性表达者的抑制率显著低于Bcl-2阴性表达者(P<0.05),其阳性表达与5-FU、ADM及MMC的体外耐药相关。结论:Survivin和Bcl-2基因与胃癌对化疗药物敏感性相关,Survivin与胃癌细胞原发性化疗耐受有关,检测其表达对选择化疗药物有实用价值。Bcl-2可能参与介导胃癌细胞的耐药,其高表达可能是胃癌多药耐药产生的原因之一。

转录因子碳水化合物反应元件结合蛋白对肝脏糖脂代谢的调节作用

肝脏是体内糖脂代谢的重要器官,转录因子碳水化合物反应元件结合蛋白(ChREBP)是调节肝脏糖酵解及脂肪合成的重要转录因子。ChREBP与Max样蛋白X以异二聚体的形式调控葡萄糖利用及转化为脂肪过程中大量基因的表达。在ob/ob小鼠肝细胞特异性敲除ChREBP基因后能明显改善其脂肪肝及胰岛素抵抗。阐明ChREBP对糖脂代谢的调控机制及其生物学功能,可进一步解释葡萄糖诱导脂肪形成的过程,并有望为脂肪肝等代谢性疾病的干预治疗提供新的思路。本文对ChREBP的结构特征、调控机制、生物学功能及其与疾病的关系等最新进展进行综述。

伴TdT阳性淋巴母细胞增生的Castleman病1例报道

Castleman病于1956年Castleman等-（[1]）首次描述并报道,又称血管滤泡性淋巴组织增生或巨大淋巴结增生症,病因尚不明确,临床较少见。Td T全称是末端脱氧核苷酸转移酶,其主要在胸腺皮质细胞和少数骨髓淋巴细胞表达,在淋巴结及脾等成熟淋巴细胞中不表达,在T淋巴母细胞淋巴瘤中阳性率较高。

纤维母细胞/肌纤维母细胞肿瘤病理诊断及新进展

WHO(2020)软组织和骨肿瘤分类(简称第五版WHO分类)变化和更新内容较多。在第五版WHO软组织肿瘤分类中增加了新的肿瘤类型,调整了部分肿瘤的分类归属,并补充了许多分子遗传学方面的新进展。在纤维母细胞和肌纤维母细胞肿瘤章节,主要增加了3种肿瘤类型,包括EWSR1-SMAD3阳性纤维母细胞肿瘤、软组织血管纤维瘤、浅表性CD34阳性纤维母细胞性肿瘤;重新命名了乳腺型肌纤维母细胞瘤为肌纤维母细胞瘤,重新归类了肢端纤维黏液瘤和隆突性皮肤纤维肉瘤为纤维母细胞/肌纤维母细胞肿瘤。此外,第五版WHO分类中纤维母细胞/肌纤维母细胞肿瘤有较多内容给予了补充和更新,本文主要总结纤维母细胞/肌纤维母细胞肿瘤新进展以及病理诊断思路。

转录因子ChREBP-α增强小鼠原代肝细胞的脂质合成能力

目的构建含转录因子ChREBP-α基因的重组腺病毒载体,检测其在小鼠原代肝细胞中的表达及其对脂质合成的调节作用。方法将ChREBP-αcDNA克隆到穿梭质粒pShuttle-CMV载体,与pAdEasy质粒在大肠杆菌BJ5183中同源重组,获得腺病毒载体pAd-ChREBP-α,在293A细胞中进行病毒的包装和扩增,检测病毒的滴度;将腺病毒Ad-ChREBP-α感染小鼠原代肝细胞,用实时荧光定量PCR及蛋白质印迹法检测ChREBP-α的表达,实时荧光定量PCR检测ChREBP-α靶基因LPK mRNA的表达。用核素14 C示踪法测定肝细胞的脂质合成速率。结果成功制备了ChREBP-α重组腺病毒,利用其在原代肝细胞过表达ChREBP-α,可显著上调靶基因LPK的表达,并增强肝细胞的脂质合成速率。结论成功制备了具有生物学活性、能在原代肝细胞中过表达的ChREBP-α重组腺病毒,为研究ChREBP-α的糖脂代谢调控作用奠定了基础。

利用分叶顺次肝切除术建立小鼠肝脏大部切除后再生模型

目的:利用肝部分切除术,建立可准确量化和易于操控的小鼠肝脏再生模型,为研究肝脏再生的细胞和分子生物学机制及其病理学意义提供技术平台。方法:正常成年C57BL/6小鼠经心脏灌注固定后,逐叶分离肝脏、称重,计算各肝叶所占肝重的百分比;麻醉状态下,分叶顺次无菌切除小鼠肝脏的左外叶、左中叶和右中叶,建立肝脏大部切除的再生模型;利用RT-PCR方法动态检测术后肝脏甲胎蛋白基因的激活表达特征。结果:肝左外叶、左中叶和右中叶合计约占小鼠肝脏总重量的68%,分叶顺次切除上述3个肝叶,术后动物恢复和存活状态良好,RT-PCR结果证实甲胎蛋白基因在小鼠肝脏再生中的激活表达。结论:利用分叶顺次肝切除术,成功建立了小鼠的肝大部切除后再生模型,该方法可准确量化肝脏切除的程度,具有可控性强、简便易行和成功率高等优点,为小鼠肝再生的研究奠定了基础。

脂肪肝小鼠的肝脏脂质代谢相关基因表达特征分析

目的分析ob/ob肥胖小鼠脂肪肝中脂质代谢相关基因的表达特征。方法 18周龄雄性ob/ob及其同窝对照小鼠各4只,禁食16h后处死。检测小鼠体质量、肝脏湿质量/体质量、肝脏三酰甘油(TG)水平;用H-E和油红O染色观察肝脏的形态结构和脂质沉积情况;用实时荧光定量PCR方法检测肝脏脂质代谢相关基因的mRNA表达情况。结果 Ob/ob小鼠体质量、肝脏湿质量/体质量和肝脏组织TG水平均高于对照小鼠(P<0.05),H-E和油红O染色显示ob/ob小鼠发生肝脏脂质沉积;肝脏脂肪酸转位酶(CD36)、脂肪酸结合蛋白1(FABP1)、脂肪酸合酶(FASN)、乙酰辅酶A羧化酶1(ACC1)、极长链脂肪酸延长酶6(ELOVL6)和硬脂酰辅酶A去饱和酶1(SCD1)等mRNA表达水平在ob/ob小鼠肝脏均高于对照小鼠(P<0.05),而过氧化物酶体增殖剂激活受体α(PPARα)、软脂酸辅酶A氧化酶1(ACOX1)、载脂蛋白B(ApoB)和微粒体TG转移蛋白(MTP)mRNA在两组小鼠肝脏中的mRNA表达水平差异无统计学意义。结论 Ob/ob小鼠肝脏的脂肪酸摄取和从头合成相关基因的mRNA表达水平升高,而脂肪酸氧化及脂质向肝外转运的相关基因的mRNA表达水平无明显改变。

高活力原代小鼠肝细胞的分离与纯化

目的建立一种稳定的能获得高活力和高纯度原代小鼠肝细胞的分离和纯化方法。方法对传统的两步原位胶原酶灌注法进行4个方面的优化,主要包括选择逆向灌流、将持续灌注法改为间断灌注后夹闭门静脉法、严格控制胶原酶消化时间和将分离的肝细胞悬液进行低速Percoll单密度离心纯化。分离后的肝细胞进行体外培养。肝细胞活力和得率用台盼蓝染色法检测。结果新鲜分离的小鼠原代肝细胞活力能稳定达到87%±3%,平均活细胞总数为8×105每克小鼠体重,绝大部分细胞在体外培养2h后贴壁生长。结论优化后的肝细胞分离方法更为稳定、有效,分离到的肝细胞具有高活力的优点。

Bcl-2和p16蛋白在胃癌组织中的表达及意义

目的:观察癌基因Bcl-2和抑癌基因p16相关产物蛋白在胃癌组织中的表达,探讨Bcl-2和p16基因与胃癌发生的关系。方法:用免疫组化法检测Bcl-2和p16蛋白在不同类型胃癌组织中的表达,并以胃黏膜异型增生和肠上皮化生作对照。结果:Bcl-2蛋白在胃癌和异型增生组织中的阳性率无显著性差异(P>0.05),但是显著高于肠上皮化生(P<0.01);p16蛋白在胃癌、异型增生和肠上皮化生组织中的表达有非常显著的差异(P<0.01)。结论:在胃癌组织中Bcl-2表达显著增高,而p16表达显著减低,提示两种蛋白表达变化可能与胃癌相关,Bcl-2可能是胃癌发生的早期指标,p16基因的缺失可能与细胞异型性有密切关系。

睾丸原发性神经内分泌肿瘤临床病理研究(附7例报告)

目的:观察睾丸原发性神经内分泌肿瘤的组织学、免疫表型,探讨其临床病理特征、诊断、鉴别诊断及治疗预后。方法:运用组织学、免疫组化技术对7例睾丸原发性神经内分泌肿瘤进行光镜观察及免疫标记,并结合相关文献对其临床表现、组织形态和免疫组化特点及治疗和预后等进行综合分析。结果:7例男性患者均以睾丸无痛性肿块就诊,平均40.6岁。均不伴有类癌综合症。组织学上,肿瘤排列呈岛状、梁状,可见实性片状及大的不规则腺管样结构,瘤细胞大小较一致,呈圆形、多角形,胞质略嗜酸,胞界不清。核单一,圆形,染色质细颗粒状,核分裂象计数<2个/10HPF。免疫表型,瘤细胞均弥漫性表达Syn、CgA、NSE和CK,Ki-67阳性细胞数<2%。结论:原发于睾丸的神经内分泌肿瘤非常罕见,通常不伴有类癌综合症,早期手术切除预后较好。免疫组化染色有助于该肿瘤诊断,鉴别诊断包括睾丸畸胎瘤合并类癌、转移性神经内分泌肿瘤、精原细胞瘤、支持细胞瘤等。

小鼠肝大部切除后肝再生组织中c-myc、ZHX2及AFP基因表达的变化

目的:利用小鼠肝大部切除后肝再生动物模型,测定c-myc、ZHX2、AFP基因在肝再生过程不同阶段的表达,研究肝脏再生的细胞和分子生物学机制及病理学意义。方法:利用分叶顺次肝大部切除技术,建立小鼠肝再生动物模型,在不同的时间节点,运用荧光定量PCR手段,检测再生肝脏组织中c-myc、ZHX2、AFP激活后的表达特征。结果:在肝再生的启动阶段,c-myc表达上调。在随后的肝脏再生的持续增殖阶段,ZHX2的表达首先下调,然后再恢复到正常水平。AFP的表达为持续上调。结论:c-myc、ZHX2、AFP基因在肝脏再生不同阶段的依次激活、不同表达趋势的内在联系,初步揭示了彼此之间协同作用的可能及潜在的信号转导途径。

胃癌CyclinD1、PTEN表达及与化疗药物耐药性关系的研究

目的探讨胃癌组织中CyclinDl、PTEN蛋白的表达和与化疗药物敏感性的关系。方法取胃癌手术标本84例,用免疫组化检测CyclinDl、PTEN蛋白在胃癌组织中的表达。并用MTT比色法观察胃癌原代培养细胞在体外对化疗药物HCPT、CDDP、5-Fu、ADM和MMC的敏感性。结果胃癌组织中CyclinDl和PTEN蛋白的阳性率分别为67.86%和46.43%。胃癌细胞对不同化疗药物敏感性不同:5-Fu、MMC和DDP对胃癌细胞的抑制率显著高于ADM和HCPT(P<0.05)。CyclinDl阳性者对5-Fu、HCPT的敏感性显著高于阴性者(P<0.05)。PTEN蛋白表达与五种化疗药物的体外耐药无相关性(P>0.05)。结论CyclinDl蛋白与胃癌对化疗药物敏感性相关,检测其表达对选择化疗药物有实用价值。

Ⅱ型减压病肺组织超微结构改变

目的观察兔实验型减压病肺组织超微结构改变，探讨减压病对肺组织损伤的机制。方法用雄性新西兰家兔制备减压病模型。动物出舱后30～60分钟内处死，取肺尖部组织，制备超薄切片，电镜下观察超微结构。并设安全减压组和正常组作为对照。结果减压病组：电镜下见肺泡腔部分闭塞，部分实性变，内见红细胞渗出，I型肺泡上皮细胞突起回缩，胞体肿胀，线粒体肿胀。Ⅱ型肺泡上皮细胞肿胀明显，细胞质内线粒体扩张，板层小体减少；另见部分Ⅱ型上皮细胞固缩，核染色质凝集，固缩的细胞内线粒体空泡变性，板层小体消失。毛细血管扩张充血，毛细血管内皮细胞肿胀，基底膜不完整。安全减压组：部分肺泡腔扩大，毛细血管充血，I性肺泡上皮和毛细血管内皮细胞轻度肿胀；Ⅱ型肺泡上皮线粒体轻度肿胀，溶酶体数目增多，板层小体细胞膜下聚集。结论减压病可导致呼吸上皮损伤、血气屏障破坏，影响肺泡气体交换；其机制可能与减压过程中，在血管和组织内产生的游离气泡有关。

CA9在透明细胞肾细胞癌预后评估中的价值

目的:评估CA9在预测透明细胞肾细胞癌(clear cell renal cell carcinoma,ccRCC)患者术后复发或转移以及生存预后中的价值。方法:回顾分析上海交通大学医学院附属瑞金医院2017年1月1日至2020年12月31日期间收治的231例ccRCC患者,所有患者均接受了肾癌根治或部分切除术,分析其临床病理资料,并对患者进行随访,统计其肿瘤复发、转移和总生存期(overall survival,OS)、无病生存期(disease-free survival,DFS)情况。收集所有肿瘤组织切片及蜡块,制作组织微阵列,使用CA9多克隆抗体对组织微阵列进行免疫组织化学分析。采用KaplanMeier和多元Cox回归模型分析,评估组织微阵列CA9表达水平与患者临床病理特征及OS、DFS间的相关性。结果:231例ccRCC患者的中位随访时间为37个月(13~54个月),有8例患者死亡,38例(16.5%)患者术后出现肿瘤复发和(或)转移,其中3例出现肿瘤复发,29例发生肿瘤转移,另6例患者同时出现肿瘤复发和肿瘤转移。231例患者中,CA9的阳性表达率为94%(217/231),其中153例(66%)CA9染色率≥85%,78例(34%)CA9染色率<85%。卡方分析显示,CA9的表达不仅与肿瘤T分期、国际泌尿病理学会(International Society of Urological Pathology,ISUP)核分级、肉瘤样或横纹肌样分化(坏死)、被膜侵犯、血管浸润等组织病理学参数相关(P均<0.01),且与肿瘤复发、转移及患者生存状态相关(P均<0.01),但与年龄、性别及肿瘤发生部位无关(P均>0.05)。卡方分析表明,CA9(<85%)低表达是ccRCC患者术后OS、DFS不良的预测因素,危险比分别为6.211(P=0.002)和8.980(P<0.001)。结论:ccRCC组织中CA9低表达与低OS、DFS相关,是ccRCC患者术后短OS和短DFS的独立危险因素,可作为评估ccRCC患者预后的分子标志物。

原发性肝脏弥漫大B细胞淋巴瘤7例临床病理学观察

目的 探讨肝脏原发性弥漫大B细胞淋巴瘤（primary hepatic diffuse large B-cell lymphoma,PHDLBL）的影像学、组织学及免疫表型,分析其临床病理特征、诊断、鉴别诊断、治疗及预后。方法 对7例肝脏PHDLBL进行光镜观察及免疫组化标记,采用原位分子杂交法检测淋巴瘤组织中EBV编码的小RNA（EBV-encoded small RNA,EBER）,并结合相关文献复习。结果 7例患者平均年龄67.5岁,均以右上腹部饱胀不适、消瘦伴贫血就诊。CT示病灶密度欠均匀,可见更低密度区,增强扫描病灶不均匀强化。肿瘤细胞弥漫性生长,瘤细胞体积较大,大小相对一致,多为圆形,胞质较丰富、淡染,核圆形或卵圆形,染色质粗,可见明显的核仁和泡状核,核分裂象易见,并可见星空现象。免疫表型：瘤细胞弥漫表达CD19、CD20、CD79a,CD3、CD43均阴性,Ki-67增殖指数75%~80%;3例EBER原位杂交检测呈阳性。结论 PHDLBL临床罕见,预后较差,肝活检及免疫组化标记有助于诊断,需与其他部位的淋巴瘤累及肝脏鉴别;及早手术和化疗有望获得较好疗效。

锌指蛋白ZBTB20基因重组腺病毒表达载体的构建和鉴定

目的:构建含锌指蛋白ZBTB20基因的重组腺病毒载体,以研究锌指蛋白ZBTB20的生物学功能。方法:将带有FLAG标签的ZBTB20 cDNA片段(ZBTB20-FLAG)克隆至pAdTrack-CMV载体,将该载体与pAdEasy质粒进行细菌内同源重组从而获得重组腺病毒载体pAd-ZBTB20,之后在293细胞中进行包装以及扩增,并对病毒滴度进行检测;采用肝脏组织特异性ZBTB20基因敲除小鼠的原代肝细胞和肝脏组织模型,分别于离体和在体水平鉴定所制备的重组腺病毒Ad-ZBTB20介导的ZBTB20蛋白表达情况;并采用报告基因技术检测过表达的ZBTB20蛋白的功能活性。结果:成功制备了锌指蛋白ZBTB20重组腺病毒,该重组腺病毒感染原代肝细胞和小鼠肝脏组织能过表达ZBTB20蛋白,并且此ZBTB20蛋白能抑制其下游靶基因甲胎蛋白的转录。结论:所构建的ZBTB20重组腺病毒可以介导ZBTB20的过表达并具备转录调节活性,为今后研究ZBTB20的相关生物学功能奠定了基础。

嗜酸性实性囊性肾细胞癌7例临床及分子病理特征分析

目的探讨嗜酸性实性囊性肾细胞癌(eosinophilic solid and cystic renal cell carcinoma,ESC RCC)的临床病理特征、免疫表型、分子病理改变、鉴别诊断及预后。方法收集上海交通大学医学院附属瑞金医院和浙江省宁波市病理诊断中心诊断的7例ESC RCC,回顾性分析其临床病理学特征、免疫表型及分子遗传学改变等,并复习相关文献。结果7例患者中男性4例,女性3例;年龄22~66岁,平均42岁。镜下肿瘤呈境界清楚的实性及囊性结构,肿瘤细胞胞质嗜酸性,部分可见嗜酸性小球,细胞核WHO/ISUP 2级或3级。免疫表型:7例CK20阳性或局灶阳性,CK7、CD117均阴性。5例FISH检测显示均无7号和17号染色体的三倍体,3例男性患者也无Y染色体缺失。对其中2例行石蜡组织全外显子测序,结果显示2例均有TSC1/TSC2突变。结论ESC RCC是非常少见的肾细胞癌类型,其形态学特征、免疫表型及分子改变较为独特,且其生物学行为较惰性。因此,正确认识及诊断该类型肿瘤对患者的治疗方案选择及预后评价具有重要意义。

基于淋巴结穿刺标本的淋巴组织增生性病变的病理诊断

目的探讨淋巴结穿刺活检标本在淋巴瘤病理诊断中的应用价值。方法回顾性分析2016~2018年上海交通大学附属瑞金医院病理科诊断的914例淋巴结穿刺活检标本,评估淋巴结穿刺活检标本用于淋巴瘤病理诊断的可行性及准确性。结果914例中诊断淋巴瘤352例(39%),且352例淋巴瘤标本中有346例(98.3%)诊断出淋巴瘤具体亚型,其余6例(1.7%)诊断为B细胞淋巴瘤。结论淋巴结穿刺活检标本具有较高的淋巴瘤诊断率,可用于淋巴瘤具体亚型的病理诊断。