PAP-M6P与RGDY对肝星状细胞活化功能的联合干预作用

背景:活化的肝星状细胞(HSC)表面6-磷酸甘露糖/胰岛素样生长因子Ⅱ(M6P/IGFⅡ)受体和整合素受体显著增加。外源性含有M6P或精氨酰-甘氨酰-天冬氨酸(RGD)基团的分子可干预HSC活化,但目前尚缺乏两者比较或联合应用的研究。目的:探讨人工化学合成的p-氨基苯基-6-磷酸-α-D-甘露糖(PAP-M6P)和精氨酰-甘氨酰-天冬氨酰-酪氨酸(RGDY)小肽对HSC活化功能的联合干预作用。方法:取培养10d的活化期HSC,分别设空白对照组、RGDY对照组、PAP-M6P低、中、高浓度组以及低、中、高浓度联合组进行干预。以甲基噻唑基四唑(MTT)法检测细胞抑制率,以逆转录聚合酶链反应(RT-PCR)检测转化生长因子(TGF)-β1mRNA表达,以酶联免疫吸附测定(ELISA)检测Ⅰ型胶原、透明质酸和活化的TGF-β1蛋白含量。结果:各组细胞抑制率无明显差异。中浓度联合组TGF-β1mRNA表达和中、高浓度联合组活化的TGF-β1蛋白含量显著低于RGDY对照组和相应浓度PAP-M6P组(P<0.05);高浓度联合组Ⅰ型胶原、透明质酸含量显著低于RGDY对照组和各浓度PAP-M6P组(P<0.05)。结论:PAP-M6P与RGDY联合应用能显著抑制HSC表达和激活TGF-β1,并减少细胞外基质沉积。

液体活检标志物在非小细胞肺癌中的临床应用和挑战

肺癌是我国发病率和死亡率最高的恶性肿瘤。液体活检具有快捷、无创、可重复等传统组织活检不具备的优点,在非小细胞肺癌(NSCLC)的精准诊疗决策中具有重要的价值。文章简述液体活检在肺癌筛查、早期诊断、疗效和预后评估,以及耐药监测等方面的应用。并对液体活检技术面临的挑战:需进一步提高检测的敏感性和特异性,建立标准化的流程和参考区间,增加前瞻性临床研究验证,推动其实现临床转化,进行简评。

尿肌氨酸水平检测在前列腺癌诊断中的应用研究

目的分析尿肌氨酸在前列腺癌(CAP)诊断和病情判断方面是否优于血清前列腺特异性抗原,甚至优于后者。方法以同位素稀释液相色谱质谱法检测CAP及良性前列腺增生症(BPH)患者和健康者尿肌氨酸水平,电化学发光法检测血清PSA水平,荧光原位杂交(FISH)技术检测前列腺组织ERG基因异位和TMPRSS2/ERG融合基因。结果 CAP组、BPH组和健康对照组尿肌氨酸水平分别为(6.930±5.619)、(2.250±2.237)和(2.058±1.396)μmol/L,CAP组高于健康对照组和BPH组(P<0.05)。84.6%(11/13)的CAP患者具有ERG基因异位或TMPRSS2/ERG融合基因。2例疑为CAP的BPH组患者尿肌氨酸水平升高,且检出TMPRSS2/ERG融合基因。结论尿肌氨酸有可能成为可用于诊断CAP的具有一定临床应用价值的肿瘤标记物。

HMGB1/TLR2/NF-κB在溃疡性结肠炎小鼠结肠组织中的表达及意义

目的探讨HMGB1/TLR2/NF-κB在溃疡性结肠炎(UC)小鼠结肠组织中的表达及作用机制。方法 BALB/C小鼠随机分为正常对照组及模型组,每组12只;正常对照组不造模,模型组用恶唑酮(OXZ)灌肠复制UC模型。观察两组实验小鼠体质量变化、大体及组织病理学改变;RT-PCR检测结肠组织HMGBlmRNA的表达变化;免疫组织化学和流式细胞术检测结肠组织中HMGB1、TLR2、NF-κB蛋白的表达变化。结果与正常对照组小鼠相比,模型组小鼠出现不同程度的腹泻和便血,结肠黏膜明显充血、水肿,可见较大溃疡病灶;模型组小鼠结肠组织中HMGB1mRNA及蛋白表达升高,主要位于细胞浆和细胞外;模型组小鼠结肠组织TLR2和NF-κB蛋白表达亦明显升高;HMGB1蛋白与TLR2蛋白表达呈显著正相关(r=0.81,P<0.01);TLR2蛋白与NF-κB蛋白表达呈显著正相关(r=0.78,P<0.01)。结论 HMGB1在小鼠溃疡性结肠炎中的致炎作用可能部分通过结合其受体TLR2,激活NF-κB信号途径而实现的。

暴发性溃疡性结肠炎临床诊治现状

暴发性溃疡性结肠炎（FUC）的确切定义尚待进一步明确。临床诊断除依据发热、大量黏液脓血便、腹痛、腹胀、严重毒血症以及粪便细菌培养阴性外，应强调内镜检查、肠黏膜破坏和溃疡特征的重要意义。临床处理FUC时，内外科必须紧密合作，采用重症监护、营养支持、输血和输血制品、皮质类固醇、环孢素或英夫利昔等急救措施。如内科治疗无效或出现并发症，应及时行外科治疗。

RGD环肽修饰纳米脂质体显著降低氧化苦参碱抗大鼠四氯化碳肝纤维化有效剂量与用药频次

目的构建RGD环肽修饰纳米脂质体(cRGD-NL),利用其包封氧化苦参碱(OM),比较单纯低浓度OM(2 mg/kg体质量,2次/周)和含相应量OM的携OM纳米脂质体(NL-OM)或携OM环肽修饰纳米脂质体(cRGD-NL-OM)对大鼠四氯化碳(CCl4)肝纤维化影响,明确cRGD-NL-OM能否有效降低OM抗肝纤维化有效剂量和用药频次。方法 SD大鼠分6组(每组8只):正常对照组、模型(CCl4)组、单纯NL干预(CCl4+NL)组、单纯OM干预(CCl4+OM)组、NL-OM干预(CCl4+NL-OM)组和cRGD-NL-OM干预(CCl4+cRGD-NL-OM)组。各组按OM 2 mg/kg体质量、每周2次药量于造模4周后给予相应药物或容媒,给药4周后处死动物,采集血清和肝组织标本。HE和Masson染色观察病理学组织变化,生化分析或ELISA检测血清肝功能胶原代谢变化;荧光定量PCR检测Ⅰ型胶原α2链(COL1A2)mRNA水平;免疫印记法检测α-平滑肌肌动蛋白(α-SMA)表达。结果 与模型组相比,cRGD-NL-OM组和NL-OM组大鼠血清学指标及肝组织病理学改善显著,同时COL1A2 mRNA水平及α-SMA表达显著下降,且cRGD-NL-OM较NL-OM组改善更为明显。相反,单纯NL组及单纯OM组各项指标与模型组相比无显著差异。结论 cRGD-NL-OM显著降低OM抗大鼠肝纤维化有效剂量与用药频次,该新剂型有重要的临床应用前景。

寄生虫感染与炎症性肠病负相关的研究

炎症性肠病(inflammatory bowel disease,IBD)的流行病学研究显示,无论是溃疡性结肠炎(UC)还是克罗恩病(CD)的发病,均与寄生虫感染呈负相关。这一现象启迪人们运用动物实验、临床试验来探讨潜在的机制。寄生虫,尤其是蠕虫感染后,宿主胃肠道主要出现Th2型免疫应答反应。机体的免疫活性细胞活化并表达细胞因子,破毁和驱除寄生虫。肠道病变修复后的宿主具有抵御IBD发病和病变复发的能力。人工感染蠕虫的研究显示,IBD患者肠道病变程度显著减轻。以上研究结果有助于了解IBD胃肠道免疫损伤的机制,拓展新的治疗学研究。

受体靶向干预与肝星状细胞活化功能的调控研究

异常的生物信息分子调控并维持肝星状细胞(HSC)活化及其高功能、永生性等生物学行为。它们的分子信息转导依赖于细胞膜不同的受体-配体间的特异性结合。针对HSC细胞膜表面6-磷酸甘露糖/胰岛素生长因子Ⅱ型受体(M6P/IGF-ⅡR)、精氨酸-甘氨酸-天门冬氨酸(RGD)受体及TGF-βⅡ型受体,人们设计了人工配体或修饰配体、以载体形式连接药物等特异性靶向干预的生物大分子,试图调控或阻断这些分子信息通路的转导,实现抑制HSC的活化与功能表达。

肾小球滤过率评估方程在不同人群中的适用性

目前基于普通人群所开发的通用估算肾小球滤过率(e GFR)评估公式在临床广泛使用,但某些特定人群由于其自身特点的影响,其e GFR评估公式亦会与普通人群有所不同。文章就e GFR评估公式的发展过程及在不同人群中的适用性作一综述,主要包括中国人群、儿童、糖尿病患者、心力衰竭患者、老年人。在临床研究及应用中应需注意肌酐与半胱氨酸蛋白酶抑制剂C检测方法的标准化以及e GFR评估公式的差异化和本土化使用。

线性和非线性定量在同位素稀释质谱法中应用的比较

目的比较同位素稀释质谱法时,采用线性和非线性响应函数制作校准和(或)标准曲线对结果的影响。方法实验室建立的同位素稀释质谱法检测伊立替康及其3种主要代谢产物,使用C18反相柱梯度洗脱,以ABSciex API 3200检测。按《液相色谱-质谱临床应用建议》完成方法学验证。结果伊立替康(CPT-11)、SN-38G和APC在4.6~4.7 min出现洗脱峰,SN-38约在5.2 min出现洗脱峰。检测4种分析物的3种浓度质量控制(QC)样本,分别以线性函数、二次函数、三次函数和新的线性最小二乘法Padé[1,1]近似拟合分析,比较4种拟合方法计算得出的结果偏差。结论结果适合线性标准曲线时,优先应用线性;非线性校准曲线时,三参数有理函数一定程度上可以消除同位素稀释分析中不必要的误差源。

脂肪酸代谢相关酶在胃癌中的研究进展

脂质代谢异常在肿瘤的发生演进、药物治疗抵抗、转移过程中起到重要作用。脂肪酸代谢是脂质代谢的主要组成部分,其代谢过程中的一些关键酶成为研究热点。笔者就四种脂肪酸代谢相关酶(脂肪酸合成酶、固醇调节元件结合蛋白1、肉碱脂酰转移酶1和CD36)在胃癌发生发展中的作用以及其对胃癌的诊断、治疗及预后评估的潜在意义作一综述。

胃癌患者外周血细胞游离核酸标志物的检测和应用

目的:分析并评价10种外周血细胞游离核酸标志物在胃癌诊断中的应用价值。方法:提取胃癌患者及健康对照者的血清总RNA,反转录后采用实时荧光聚合酶链反应对候选基因进行检测,同时采用电化学发光免疫分析法检测癌胚抗原(CEA)、糖类抗原19-9(CA19-9)、CA724,并运用Logistic回归及受试者工作特征(ROC)曲线对标志物进行分析。结果:胃癌患者血清中TP73(DNp73α)及肝细胞生长因子受体c-MET表达量较健康对照者显著增高(P<0.05)。c-MET检测对胃癌诊断的灵敏度为65.5%,特异度为76.4%,曲线下面积(AUC)为0.73,与TP73(DNp73α)比较,两者间的AUC差异有统计学意义(P<0.05)。c-MET与CEA、CA199、CA724联合检测时,其诊断灵敏度为75.0%,特异度为87.3%,AUC为0.83;与仅CEA、CA199、CA724三者联合检测相比,AUC差异有统计学意义(P<0.05)。不同肿瘤转移情况、不同TNM分期的患者,其c-MET表达量明显不同(P<0.05)。结论:检测外周血c-MET表达在胃癌诊断中具有一定价值,可作为临床常用胃癌肿瘤标志物的补充。

肿瘤标志物在健康体检人群中的应用

肿瘤标志物检测因其采样便捷、经济有效,在肿瘤筛查中具有独到应用价值。除了少数标志物适合在无症状、一般风险的表观健康人群进行筛查外,绝大多数肿瘤标志物主要针对特定肿瘤的高危人群筛查。未来应用于健康体检的肿瘤标志物种类将不断丰富,有助于筛选出肿瘤高危人群,为肿瘤发病风险的预测和评估提供帮助。我国健康体检应用的肿瘤标志物在检测技术、适用指征、结果解读、医学伦理等方面需进一步完善。

影响暴发型溃疡性结肠炎发病及并发症的相关因素

目的分析暴发型溃疡性结肠炎（FUC）的发病因素和临床诊治经验（尤其是并发症的抢救），以提高FUC的诊治水准。方法22例急性发病或暴发加剧患者，按发热、频繁腹泻黏液脓血便，结合结肠镜和活检病理结果，参照Truelove和Witts等的标准确诊为FUC。调查既往病史和发病诱因，检测血常规、粪常规及培养、红细胞沉降率、C反应蛋白、白蛋白、前白蛋白等指标以监测病情。以皮质类固醇甲基氢化泼尼松静脉滴注为主，加5-氨基水杨酸（5-ASA）并联合禁食、输全血或血浆、补充免疫球蛋白、补充益生菌和营养支持治疗等。出现并发症且经内科治疗无效者转外科行全结肠切除加回肠造口术或贮袋术。结果22例FUC中9例为初发，发病前有分娩、手术、骨折、中暑和脑血栓形成等诱因。原有溃疡性结肠炎（UC）者，暴发加剧的诱因主要为服药依从性差。10例患者经内科急救治疗无缓解、并发肠出血、肠穿孔、肠梗阻和巨结肠等，转外科治疗，术后死亡1例。发生并发症者术前曾有皮质类固醇给药不规范、饮食管理不准确和口服环孢素A等情况。内科治疗缓解者中初发患者居多，病程中发热、黏液脓血便等好转的同时，红细胞沉降率、C反应蛋白显著降低，前白蛋白等显著增高。结论FUC的发病诱因可能有分娩、感染、手术创伤、精神创伤等应激因素；慢性UC暴发加剧的诱因主要为服药依从性差；初发FUC对皮质类固醇治疗的应答较好；足量和足够疗程甲基氢化泼尼松和环孢素A静脉滴注＋胃肠内短肽营养＋益生菌治疗可使部分FUC患者减少或避免严重并发症及外科手术。

溃疡性结肠炎肠黏膜损伤与白细胞介素-13调控

参与溃疡性结肠炎（UC）肠黏膜炎性反应的细胞和细胞因子不同于克罗恩病（CD）。在UC，聚集于肠黏膜固有层的CD4T淋巴细胞分泌大量白细胞介素（IL）-5等细胞因子，而IL-4、IL-12和γ干扰素（IFNγ）等却无显著变化；值得注意的是，CD1d标志的自然杀伤T细胞（NKT）分泌IL-13显著增高。UC的这种以IL-5和IL-13增高为特征的肠黏膜病变被称之为非典型Th2型免疫性炎症损伤。

肿瘤坏死因子拮抗疗法对暴发型溃疡性结肠炎诱导缓解的初步探讨

目的总结英夫利昔（IFX）治疗3例暴发型溃疡性结肠炎（FUC）的经验，供临床参考。方法对明确诊断的3例FUC患者采用IFX治疗，剂量为5mg／kg，0．9％氯化钠溶液稀释后在2h内静脉滴注完毕。间隔0、2、6周用药，共3次。维持缓解予以柳氮磺胺吡啶（SASP）或益生菌制剂。以内镜和病理检查结果为主要依据，复查黏膜愈合情况。结果3例FUC患者在IFX给药后均实现完全缓解。停药后第8周，2例复查肠镜显示黏膜完全愈合，另1例因室性心动过速复发而猝死。随访至IFX停药后8个月余，2例患者仍无任何活动表现。结论应用IFX治疗3例FUC实现完全诱导缓解，最终的疗效和安全性有待进一步临床实践予以证实。

肝脏纤维化的血清学标志物检测的现状和展望

肝脏纤维化是各种慢性肝病所致的肝脏损伤的共同通路。它的非侵入性评估方法方便易行，便于疾病动态监测，具有临床应用价值。肝纤维化的血清学标志物包括反映细胞外基质生成的直接标志物和体现肝脏合成、代谢、储备功能的间接标志物。各种综合血清学标志物评估模型可确定显著性纤维化和肝硬化，减少不必要的肝脏穿刺活检，可辅助疾病的诊断分期、预后评估、治疗监测。现有的血清学标志物检测平台和试剂的分析性能具有较大的差异，检测的标准化将有助于提高结果的可比性。大规模、多中心的临床验证研究对推广适合中国慢性肝病人群的综合血清标志物评估模型非常必要。（中华检验医学杂志，2014，37：93—95）

循环肿瘤细胞的检测和临床应用的认识

恶性肿瘤的转移是导致患者死亡的主要原因之一。肿瘤的侵袭和转移可在肿瘤发生早期就已出现,故检测肿瘤的微转移是长期以来检验医学所面临的挑战之一。循环肿瘤细胞（circulating tumor cell,CTC）在肿瘤转移过程中发挥了重要作用,而CTC检测技术的出现,使人们对肿瘤转移的监测达到了单细胞水平,成为肿瘤的＂液态活检＂。

筛查肝癌,不只看甲胎蛋白

原发性肝癌是目前我国排名第四位的常见恶性肿瘤,经过多年的临床研究,肝癌的病因已经较为明确。我国近80%的肝癌患者为乙型肝炎病毒感染者;此外,丙型肝炎病毒感染也易发生肝癌;另外,40岁以上、过度饮酒、非酒精性脂肪性肝炎、其他各种原因引起的肝硬化或者有肝癌家族史者,都是肝癌偏爱的人!

带你认识“肿瘤液体活检”

近年来,恶性肿瘤靶向疗法和免疫疗法的广泛应用,改善了不少患者的预后。同时,个体化精准治疗也使肿瘤基因检测的需求不断增加。基因检测可以从人体肿瘤组织细胞或血液等体液样本中,同时检测成干上万个基因位点,寻找肿瘤的易感基因,指导临床治疗。其中,肿瘤组织细胞需要通过手术或穿刺活检取材,而外周血标本取样方便,可以根据诊治需要随时采集。很多人并不知道,外周血可以进行肿瘤基因检测,更不了解外周血肿瘤基因检测与组织活检的区别。本文将为您揭开“肿瘤液体活检”的神秘面纱。