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基于昆虫细胞表达的鹅细小病毒VP3蛋白的VP3-ELISA诊断方法的建立
被引量:
2
1
作者
陈雪明
张树梅
+6 位作者
林委卫
孙悦
陈秀红
呼喝巴特儿
刘明
葛明
张云
《中国兽医科学》
CAS
CSCD
北大核心
2019年第9期1112-1118,共7页
将鹅细小病毒EP22株VP3基因克隆到杆状病毒转移载体pFast-Bac-HTB中,酶切鉴定及测序筛选出阳性重组转座载体pFastBac-VP3,转化至含有杆状病毒穿梭载体Bacmid的DH10Bac感受态细胞,构建杆状病毒表达载体,获得重组转座子rBacmid-VP3,在脂...
将鹅细小病毒EP22株VP3基因克隆到杆状病毒转移载体pFast-Bac-HTB中,酶切鉴定及测序筛选出阳性重组转座载体pFastBac-VP3,转化至含有杆状病毒穿梭载体Bacmid的DH10Bac感受态细胞,构建杆状病毒表达载体,获得重组转座子rBacmid-VP3,在脂质体介导下转染Sf9昆虫细胞,获得到含鹅细小病毒VP3基因的重组杆状病毒rBV-VP3。经SDS-PAGE、Western-blot以及免疫组化试验证实,VP3基因在Sf9细胞中成功表达。利用表达的VP3蛋白建立VP3-ELISA血清学检测方法并对130份鹅血清样品进行检测,以中和试验作为金标准进行对比试验。结果显示,VP3-ELISA检测方法的特异性为100%,敏感性为96.2%,并且VP3-ELISA与其他鹅病阳性血清间不出现交叉反应性。上述研究结果表明,本研究建立的VP3-ELISA是一种特异的、灵敏的血清学诊断方法。
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关键词
鹅细小病毒
VP3基因
杆状病毒表达
VP3-ELISA
原文传递
题名
基于昆虫细胞表达的鹅细小病毒VP3蛋白的VP3-ELISA诊断方法的建立
被引量:
2
1
作者
陈雪明
张树梅
林委卫
孙悦
陈秀红
呼喝巴特儿
刘明
葛明
张云
机构
中国农业科学院哈尔滨兽医研究所兽医生物技术国家重点实验室
内蒙古农业大学动物科学与医学院
东北农业大学动物医学院
出处
《中国兽医科学》
CAS
CSCD
北大核心
2019年第9期1112-1118,共7页
基金
国家自然科学基金面上项目(31670153)
国家十三五重点研发项目(2016YFD0500100)
中国农业科学院协同创新项目(CAAS-XTCX2016011-04-9)
文摘
将鹅细小病毒EP22株VP3基因克隆到杆状病毒转移载体pFast-Bac-HTB中,酶切鉴定及测序筛选出阳性重组转座载体pFastBac-VP3,转化至含有杆状病毒穿梭载体Bacmid的DH10Bac感受态细胞,构建杆状病毒表达载体,获得重组转座子rBacmid-VP3,在脂质体介导下转染Sf9昆虫细胞,获得到含鹅细小病毒VP3基因的重组杆状病毒rBV-VP3。经SDS-PAGE、Western-blot以及免疫组化试验证实,VP3基因在Sf9细胞中成功表达。利用表达的VP3蛋白建立VP3-ELISA血清学检测方法并对130份鹅血清样品进行检测,以中和试验作为金标准进行对比试验。结果显示,VP3-ELISA检测方法的特异性为100%,敏感性为96.2%,并且VP3-ELISA与其他鹅病阳性血清间不出现交叉反应性。上述研究结果表明,本研究建立的VP3-ELISA是一种特异的、灵敏的血清学诊断方法。
关键词
鹅细小病毒
VP3基因
杆状病毒表达
VP3-ELISA
Keywords
goose parvovirus
VP3
baculovirus expression
VP3-ELISA
分类号
S852.65 [农业科学—基础兽医学]
原文传递
题名
作者
出处
发文年
被引量
操作
1
基于昆虫细胞表达的鹅细小病毒VP3蛋白的VP3-ELISA诊断方法的建立
陈雪明
张树梅
林委卫
孙悦
陈秀红
呼喝巴特儿
刘明
葛明
张云
《中国兽医科学》
CAS
CSCD
北大核心
2019
2
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