肠道菌群对蛋氨酸脑啡肽治疗肿瘤疗效的影响

蛋氨酸脑啡肽(Methionine enkephalin, MENK)是一种内源性阿片肽,有良好的抗肿瘤作用,而肠道菌群对MENK抗肿瘤作用的影响尚不清楚。建立小鼠肠道菌群紊乱模型及荷瘤小鼠模型,以16S rRNA测序法检测肠道菌群丰度、监测小鼠体重、绘制肿瘤生长曲线,以流式细胞术检测小鼠肿瘤浸润CD4^(+)T细胞、CD8^(+)T细胞、Treg细胞百分比。结果表明,小鼠肠道菌群紊乱模型建立成功;肠道菌群正常与紊乱荷瘤小鼠同时接受MENK治疗,后者肿瘤体积更大,菌群正常荷瘤小鼠肿瘤浸润的CD4^(+)T细胞、CD8^(+)T细胞百分比上调,Treg细胞百分比下调,而菌群紊乱荷瘤小鼠与菌群正常荷瘤小鼠相比,肿瘤浸润CD4^(+)T细胞、CD8^(+)T细胞百分比下调,Treg细胞百分比上调。该研究表明肠道菌群紊乱可以降低MENK治疗肿瘤的疗效。

蛋氨酸脑啡肽联合紫杉醇对肺癌细胞A549增殖和凋亡的影响

目的:探讨蛋氨酸脑啡肽(MENK)联合紫杉醇(PTX)对肺癌细胞A549的增殖和凋亡影响。方法:CCK-8法检测各实验组对细胞增殖的抑制作用;利用中效原理对药物联合应用的效应进行评价;Hoechst33258荧光染色实验观察细胞凋亡形态;流式细胞术检测各实验组的细胞凋亡率。结果:MENK和PTX均能抑制A549细胞的增殖,并且MENK联合PTX组抑制率高于单独用药组;在整个效应范围中,MENK与PTX的药物合用指数(CI)<1,两药联合应用效应为协同作用;Hoechst33258荧光实验发现,MENK与PTX组均出现凋亡形态学变化,MENK联合PTX组细胞凋亡数量最多;流式细胞术检测空白对照组、MENK组、PTX组、MENK联合PTX组的细胞凋亡率分别是1.53%、6.23%、6.04%、13.22%,联合用药组的细胞凋亡率明显高于单独用药组。结论:MENK与PTX均能抑制肺癌细胞A549的增殖,并诱导其凋亡,两药联合应用具有协同作用,显著增强抑制细胞增殖和诱导细胞凋亡的能力。

蛋氨酸脑啡肽对人外周血淋巴细胞的阿片受体表达和增殖作用研究

目的探讨蛋氨酸脑啡肽(methionine enkephalin,MENK)对未活化人外周血淋巴细胞阿片受体表达和细胞增殖的影响。方法无菌分离5名健康志愿者人外周血淋巴细胞,将取得细胞平均随机分为对照组和MENK组,MENK组在1×10^-12mol/L MENK下培养48 h,对照组在RPMI1640培养基中行相同时间培养。实时定量PCR检测阿片受体μ和阿片生长受体(opioid growth factor receptor,OGFr)mRNA表达变化,Western blot检测组间OGFr蛋白表达变化。使用MENK以1×10^-3、1×10^-6、1×10^-8、1×10^-10、1×10^-12和1×10^-14mol/L作用于未活化人外周血淋巴细胞24、48、72、96 h,CCK-8检测不同MENK浓度下淋巴细胞增殖情况。结果1×10^-12mol/L MENK刺激未活化人外周血淋巴细胞可显著上调阿片受体μ[(1.257±0.078)比(1.000±0.000),t=3.289,P<0.05]和OGFr[(2.787±0.494)比(1.000±0.000),t=3.618,P<0.05]mRNA表达,并增加OGFr蛋白表达[(2.174±0.281)比(1.000±0.000),t=4.183,P<0.05]。48 h时1×10^-8 mol/L[(1.220±0.090)比(1.000±0.000),t=2.455,P<0.05]、1×10^-10 mol/L[(1.220±0.089)比(1.000±0.000),t=2.480,P<0.05]、1×10^-12 mol/L[(1.174±0.060)比(1.000±0.000),t=2.904,P<0.05]MENK组均可显著刺激未活化人外周血淋巴细胞增殖;72 h时1×10^-3 mol/L[(0.839±0.039)比(1.000±0.000),t=4.152,P<0.05)]、1×10^-12 mol/L[(0.878±0.023)比(1.000±0.000),t=5.247,P<0.05]、1×10^-14 mol/L[(0.919±0.027)比(1.000±0.000),t=2.997,P<0.05]MENK组对未活化人外周血淋巴细胞增殖有显著抑制作用。结论单独低浓度MENK刺激可对未活化人外周血淋巴细胞上阿片受体μ和OGFr表达产生调节作用;不同浓度MENK在不同时间下对未活化人外周血淋巴细胞增殖产生调节作用不同。