干扰骨髓基质细胞Hes1基因对Mash1基因表达的影响

目的观察对体外培养的骨髓基质细胞Hes1基因干扰后Mash1基因的表达变化。方法采用全骨髓培养法体外分离培养获得骨髓基质细胞,倒置显微镜下观察其形态变化,应用实时定量PCR技术分析在干扰Hes1基因表达的情况下Mash1基因表达的变化。结果应用200nM,100nM,50nM,25nM四种不同浓度梯度的Hes1的siRNA干扰抑制Hes1基因,与对照组相比Hes1表达均降低。200nM干扰后Hes1基因降低的程度是原来的0.036(P<0.05),50nM干扰后Hes1基因降低的程度是原来的0.076(P<0.05),优于其他浓度的干扰效果。Hes1降低可使Mash1基因表达增加,且Hes1降低越显著,Mash1表达增加越高。结论体外培养BMSCs过程中干扰Hes1基因对Mash1基因的表达有影响,且呈负相关调控关系。

小鼠脊髓损伤模型的建立及神经干细胞移植后运动功能恢复情况的研究

目的制作小鼠脊髓损伤打击模型,观察神经干细胞(NSCs)移植对脊髓损伤小鼠运动功能恢复及Nestin表达的影响。方法将50只小鼠随机分为空白组(5只)、模型组(15只)、对照组(15只)、治疗组(15只),运用改良Allen's法制备小鼠T10脊髓损伤模型并立即在损伤节段进行NSCs移植,于损伤后1、3、7、14、21d进行BBB评分,并通过免疫荧光法及荧光定量PCR检测Nestin的表达情况。结果所有脊髓打击后小鼠均出现双后肢瘫痪,但随时间延长运动功能可有不同程度恢复,NSCs移植14d后治疗组较模型组及对照组BBB评分显著增高(P<0.05),且治疗组Nestin表达量也高于模型组及对照组。结论成功建立了小鼠脊髓损伤打击模型;移植的外源性神经干细胞在脊髓损伤处存活并促进损伤后小鼠运动功能的恢复。