飞行时间质谱技术在HIV诊断应用性研究

〔目的〕用基质辅助激光解析电离飞行时间质谱(MALDI TOF MS)技术分析HIV感染者和健康人血清标本的多肽指纹图谱,建立HIV血清多肽指纹图谱诊断模型并探究其临床价值。〔方法〕选取的血清样本经Zip Tip C18层析预分离,运用MALDI TOF MS分析检测,获得HIV感染者和健康人血清标本的多肽指纹图谱,用SPSS13.0软件对数据进行分析,建立诊断模型。〔结果〕在分子量为800～4000Da范围内,共发现500个多肽峰,其中11个多肽峰在HIV感染组、正常对照组中表达均有显著差异(P<0.05),5个在HIV感染组中表达上调(m/z1418.67,1465.67,1777.82,1864.82和2080.23),6个在HIV感染组中表达下调(m/z904.71,920.73,1076.73,1521.79,1552.75和2080.78);(m/z2080.78+2080.23+1777.82+1465.67)组合的P<0.05,回归系数、相对危险度都比较理想,其ROC曲线下面积是1.0,以此建立了HIV血清多肽指纹图谱诊断模型。〔结论〕本研究建立的诊断模型可以有效区分HIV感染者和健康人,为HIV的诊断与筛查提供了一条崭新途径。

应用MALDI-TOF-MS技术分析HIV感染者血清多肽变化

目的用基质辅助激光解析电离飞行时间质谱 （matrix-assisted laser desorption/ionization ti me offlight mass spectrometry,MALDI-TOF-MS）技术,分析艾滋病病毒（HIV）感染者和健康人血清多肽图谱的变化。方法选取20例HIV感染者、24例健康对照者的血清,经Zipplate C18层析预分离后,运用MALDI-TOF-MS分析检测,获得HIV感染者和健康人血清标本的多肽指纹图谱,并用SPSS 13.0软件对数据进行分析。随后,用质谱串联技术（MS/MS）对两个差异表达显著的多肽峰测定肽序列,在SWISS-PROT数据库进行多肽鉴定。结果在分子量为800~4 000D范围内,共发现500个多肽峰,其中11个多肽峰在HIV感染者组、正常对照组中表达均有显著差异（P〈0.05）,5个差异多肽在HIV感染者组中表达上调（m/z 1 418.67、1 465.67、1 777.82、1 864.82和2 080.23）,6个差异多肽在HIV感染者组中表达下调（m/z 904.71、920.73、1 076.73、1 521.79、1 552.75和2 080.78）;经质谱串联技术对两个表达显著差异的多肽峰测定肽序列,鉴定结果分别是纤维蛋白多肽（Fibrino-peptide）、激肽原（Kininogen processor）。结论HIV感染者和健康人血清标本的多肽指纹图谱有显著差异,通过多肽指纹图谱找到的HIV相关多肽,为今后开发HIV诊断试剂和治疗药物,提供科学依据。