膜荚黄芪异黄酮3′-羟化酶基因的克隆及表达分析

异黄酮3′-羟化酶(Isoflavone 3′-hydroxylase,I3′H)是催化合成毛蕊异黄酮和毛蕊异黄酮葡萄糖苷的关键酶。该研究从膜荚黄芪中克隆了I3′H基因cDNA全长,并对其进行了生物信息学分析,同时采用高效液相色谱法分别测定了毛蕊异黄酮和毛蕊异黄酮葡萄糖苷的含量。结果表明:I3′H基因cDNA全长为1804 bp,开放阅读框为1518 bp,编码505个氨基酸,其分子量为57481.64 Da,等电点为8.24。AmI3′H蛋白定位在膜上,属于不稳定的亲水蛋白,氨基酸序列与豆科植物相似性较高。根、茎、叶中毛蕊异黄酮+毛蕊异黄酮葡萄糖苷的含量与AmI3′H基因的表达量一致,推测其参与了毛蕊异黄酮和毛蕊异黄酮葡萄糖苷的生物合成。

人参浸提液对桔梗种子萌发的影响

为了促进桔梗与人参轮作的应用推广,采用培养皿滤纸法研究了人参浸提液对桔梗种子萌发的影响,同时研究了赤霉素对高浓度人参浸提液抑制桔梗种子萌发的缓解作用。结果表明:人参浸提液浓度较低时对桔梗种子萌发并无显著影响,但人参浸提液浓度较高时却抑制了桔梗种子的萌发;赤霉素处理有助于改善高浓度人参浸提液对桔梗种子萌发的抑制,但赤霉素浓度过低或过高都不能克服高浓度人参浸提液对桔梗种子萌发的抑制,当赤霉素浓度为50和60 mg·L^(-1)时有利于改善高浓度人参浸提液对桔梗种子萌发的抑制,且60 mg·L^(-1)时效果最佳,不仅能够缓解高浓度人参浸提液对桔梗种子萌发的抑制,而且还改善了高浓度人参浸提液对桔梗发芽长度的抑制现象。总之,低浓度的人参浸提液不影响桔梗种子的萌发,60 mg·L^(-1)赤霉素处理可以缓解高浓度人参水浸提液对桔梗种子萌发的抑制。

膜荚黄芪CBF基因的克隆及表达分析

为探究膜荚黄芪CBF基因的结构与功能,该试验采用RACE技术克隆得到了膜荚黄芪CBF基因,命名为AmCBF。分析结果表明:AmCBF序列全长cDNA为827 bp,开放阅读框为642 bp,在线分析软件预测其编码213个氨基酸,等电点5.84,分子量24066.86 Da,是亲水性蛋白,定位于细胞质中。实时荧光定量PCR分析结果表明:AmCBF在低温和干旱胁迫时基因表达上调,且在低温处理时表达量较高。

膜荚黄芪香豆酸辅酶A连接酶基因(4CL)的克隆与表达分析

香豆酸辅酶A连接酶(4-coumarate:CoA lig-ase,4CL)是植物类黄酮类化合物和木质素等生物合成途径的一种关键酶,参与合成多种次生代谢物,在植物生长发育中起着重要作用。该试验采用同源克隆法和RACE技术从膜荚黄芪RNA中克隆得到4CL基因。利用生物信息学软件和荧光定量PCR技术,对该基因的功能和特征进行分析。结果表明:4CL基因(GenBank登录号KY086284)的cDNA序列长度为1937 bp,其ORF编码546个氨基酸,属于疏水性蛋白。实时荧光定量PCR分析发现,Am 4 CL基因在根、茎、叶中的表达趋势与毛蕊异黄酮葡萄糖苷的含量基本一致,推测Am 4 CL基因在膜荚黄芪异黄酮生物合成中发挥着重要的作用。

药用植物曼陀罗开花习性及花器形态观察

为了解曼陀罗的开花生物学特征,该研究以曼陀罗为试验材料,调查开花习性、花粉活力、柱头可授性及果实特性等,为其生殖生物学研究提供科学依据。结果表明:曼陀罗始花期为7月中旬到8月初,盛花期为8月,成熟结果期为8月末到9月末,10月初开始进入枯萎期。花瓣即将从花萼露出阶段花粉活力最低,为53.47%;花瓣从花萼露出时期、花朵开放时期、花朵萎蔫时期,3个发育阶段花粉活力无显著差异。柱头可授性在花朵开放时期最强。每株曼陀罗的平均果实数为98个,平均单果质量为4.713 g。果实平均长度为3.48 cm,平均宽度为2.52 cm。每个果实平均种子数为508粒,种子平均百粒质量为0.65 g。