山奈酚通过Wnt/β-catenin信号通路调节骨细胞合成代谢进而改善骨质疏松的作用机制

目的在细胞水平探讨山奈酚对成骨细胞的促进作用及对信号通路蛋白Wnt/β-catenin表达的影响。方法复苏与培养小鼠原成骨细胞MC3T3-E1 Subclone14,用不同浓度(1、2、5、10、20、50 mmol/L)的山奈酚处理细胞不同时间(24、48、72 h),利用细胞计数试剂(CCK-8)测定细胞活力,筛选山奈酚最适处理浓度及处理时间。将探究山奈酚促进成骨的相关检测的实验分为对照组与山奈酚组,对照组细胞进行正常培养,山奈酚组细胞用10 mmol/L山奈酚处理24 h;分别利用碱性磷酸酶(ALP)与前列腺素(PG)E2酶联免疫试剂盒、一氧化氮(NO)生化检测试剂盒对细胞内ALP、PGE2与NO含量进行测定;利用Western印迹检测细胞内骨保护蛋白(OPG),核转录因子配体受体激活体(RANKL)及Wnt/β-catenin信号通路相关蛋白的表达水平。Wnt/β-catenin信号通路介导山奈酚作用的实验分为对照组、山奈酚组、MSAB组、MSAB+山奈酚组,对照组细胞进行正常培养,山奈酚组细胞用10 mmol/L山奈酚处理24 h,MSAB组细胞用5 mmol/L MSAB处理24 h,MSAB+山奈酚组用5 mmol/L MSAB与10 mmol/L山奈酚共同处理24 h,利用CCK8检测各组细胞活力;利用Western印迹检测Wnt/β-catenin信号通路蛋白的表达情况。结果山奈酚最适处理浓度为10 mmol/L,最佳处理时间为24 h。与对照组相比,山奈酚组细胞中ALP含量显著升高(P<0.05),而细胞中PGE2、NO含量显著降低(P<0.05),细胞中OPG蛋白、Wnt1蛋白与p-β-catenin蛋白表达水平显著升高(P<0.05),RANKL蛋白表达水平显著降低(P<0.05)。与山奈酚组相比,MSAB组细胞抑制率显著升高(P<0.05);与MSAB组相比,MSAB+山奈酚组细胞抑制率显著降低(P<0.05);与对照组相比,山奈酚组细胞内Wnt1蛋白与p-β-catenin蛋白表达水平显著升高(P<0.05),MSAB组细胞内Wnt1蛋白与p-β-catenin蛋白表达水平显著降低(P<0.05);与MSAB组相比,MSAB+山奈酚组内细胞Wnt1蛋白与p-β-catenin蛋白表达水平显著升高(P<0.05)。结论山奈酚可以增加小鼠原成骨细胞的活力、增殖作用,通过Wnt/β-catenin信号通路发挥促进成骨的作用,可能是其防治骨质疏松的机制。

封闭负压吸引技术临床运用的并发症

目的探讨研究负压封闭引流(vaccum sealing drainage,VSD)技术治疗后的常见并发症,同时分析并发症产生的可能原因及相应的防治措施。方法对2008年6月～2011年12月间209例采用VSD技术治疗的患者进行回顾性调查。结果本组病例并发症发生率为22.9%。并发症发生率最高的是张力性水泡,其次是深部感染和低蛋白血症。结论负压封闭引流技术可以快速促进创面愈合和缩短修复时间,但必须注意手术中操作,并及时处理术后并发症。

miR-141-3p通过靶向生长分化因子-6对RANKL诱导RAW264.7破骨分化的影响

目的研究miR-141-3p通过靶向生长分化因子-6(growth differentiation factor 6,GDF-6)对RANKL诱导的RAW264.7细胞在破骨分化中的调控作用。方法RAW264.7细胞使用RANKL处理,诱导分化为破骨细胞,通过qRT-PCR和Western blot法检测GDF-6及抗酒石酸酸性磷酸酶(tartrate resistant acid phosphatase,TRAP)、组织蛋白酶K(cathepsin K,CTSK)的表达水平,同时qRT-PCR检测miR-141-3p的表达。实验分为未诱导组、RANKL诱导并转染载体对照组(RANKL+OE-NC)和RANKL诱导并转染GDF-6过表达载体组(RANKL+OE-GDF-6),对各组细胞进行TRAP染色,qRT-PCR和Western blot法检测破骨相关指标TRAP、CTSK、金属蛋白酶9(matrix metalloproteinase 9,MMP-9)、金属蛋白酶2(matrix metalloproteinase 2,MMP-2)及GDF-6的表达水平,同时qRT-PCR检测miR-141-3p的表达水平。实验分为过表达对照组(mimics NC)、过表达miR-141-3p组(mimics)、敲低对照组(inhibitor NC)、敲低miR-141-3p组(inhibitor)及过表达miR-141-3p转染过表达GDF-6载体组(miR-141-3p mimics+OE-GDF-6),检测方法同上,对各组细胞进行TRAP染色,qRT-PCR和Western blot法检测破骨相关指标TRAP、CTSK、MMP-9、MMP-2及GDF-6的表达水平,同时qRT-PCR检测miR-141-3p的表达水平。通过双荧光酶实验检测miR-141-3p和GDF-6的靶向关系。结果与未诱导组相比,RAW264.7诱导分化5 d后细胞内TRAP、CTSK、miR-141-3p表达水平升高(P<0.01),同时GDF-6表达水平降低(P<0.01)。转染OE-GDF-6载体后,RAW264.7向破骨细胞的分化受到抑制,TRAP、CTSK、MMP-9、MMP-2表达降低(P<0.01),TRAP染色阳性的破骨细胞数目减少。转染miR-141-3p mimics后,RAW264.7向破骨细胞分化受到促进,TRAP染色阳性的破骨细胞数量增多,破骨相关标志物TRAP、CTSK、MMP-9、MMP-2表达升高(P<0.01),GDF-6表达降低(P<0.01)。转染miR-141-3p抑制剂后,上述实验结果与模拟物组相反,RAW264.7向破骨细胞分化受到抑制。与miR-141-3p模拟物组相比,OE-GDF-6转染细胞后,可以在一定程度上拮抗miR-141-3p模拟物对破骨细胞分化的促进作用。双荧光素酶实验结果表明miR-141-3p可以与GDF-6-3′UTR-WT结合,抑制荧光素酶活性。结论miR-141-3p促进RANKL诱导RAW264.7向破骨细胞分化,其可能是通过靶向抑制GDF-6完成对破骨细胞分化的调控。

川东石炭系气藏合理井网密度的探讨

石炭系是川东主产层 ,非均质性明显 ,井深 ,钻井成本高。经测算川东石炭系单井经济极限累采气量不能低于 80 0 0× 1 0 4 m3,经济极限最低控制储量 (1～ 1 .6)× 1 0 8m3,经济极限井距 0 .5～ 1 .4km ;石炭系产层经济极限条件是渗透率大于 0 .5× 1 0 - 3μm2 或导压系数大于 0 .0 1m2 /s。研究发现川东石炭系储层渗透率与单井排泄半径具双对数线性关系 ,在此基础上提出以相邻两井的排泄半径之和为井距形成气藏的初始井网 ,在初始井网基础上对高渗区加密形成最终开发井网 ,既可充分动用气藏储量和最大限度地提高采收率 ,同时还能获取最佳经济效益。

马尔可夫链的离散人口预测模型及其应用

为准确预测我国未来人口发展趋势,以我国近10年来人口数据为依据,对中国人口老龄化进程加快的问题进行统计分析。利用绝对分布的马尔可夫链人口预测模型,预测了未来中国人口结构,建立了基于模糊权马尔可夫链人口预测模型,对人口出生率和死亡率以及人口总数进行了预测,同时检验了这些预测模型的可靠性。最后讨论了基于平稳分布的人口结构控制问题。

外固定支架结合有限内固定治疗Pilon骨折的体会

目的:介绍外固定支架结合有限内固定治疗Pilon骨折的临床体会。方法:26例患者采用外固定支架结合有限内固定方法治疗。按Ruedi和Allgower分型:Ⅱ型8例,Ⅲ型18例。结果:采用按Mazur评分标准评估手术疗效,差1例。优良率80.7%。结论:外固定支架结合有限内固定治疗Pilon骨折早期固定确切牢固,显著减少伤口并发症及骨不愈合、延迟愈合,避免钢板内固定的并发症,能较好地恢复踝关节功能。

独活寄生汤对骨质疏松老龄大鼠骨密度、骨代谢的影响及作用机制

目的探究独活寄生汤对骨质疏松老龄大鼠骨密度、骨代谢的影响及作用机制。方法选取健康SD大鼠50只,雌雄各半,数字表法随机选取10只为正常组;采用视黄酸灌胃建立骨质疏松大鼠模型,建模过程中无大鼠死亡,建模成功后随机分为模型组、低剂量组、中剂量组和高剂量组,各10只。建模成功12 h后开始给药,低、中、高剂量组分别给予独活寄生汤灌胃4.65、9.30、18.60 g/(kg·d);连续给药3 w。正常组和模型组腹腔注射生理盐水,连续3 w。对比各组超敏C-反应蛋白(hs-CRP)、碱性磷酸酶(ALP)、尿胶原砒啶交联N末端肽(NTX)、骨钙素(BGP)、Ⅰ型胶原交联羧基端肽(CTX-Ⅰ)、血清钙(S-Ca)水平;测定各组骨密度、骨组织基质金属蛋白酶(MMP)13、Runt相关基因(Runx)2表达水平。结果与正常组比较,模型组及不同剂量组hs-CRP、ALP水平、MMP13 mRNA及蛋白表达明显升高,骨密度、Runx2 mRNA及蛋白表达明显降低(P<0.05);模型组及中、高剂量组NTX、CTX-Ⅰ水平明显升高,BGP、S-Ca水平明显降低(P<0.05)。与模型组比较,不同剂量组hs-CRP、ALP水平、MMP13 mRNA及蛋白表达明显降低,骨密度、Runx2 mRNA及蛋白表达明显升高(P<0.05);中、高剂量组NTX、CTX-Ⅰ水平明显降低,BGP、S-Ca水平明显升高(P<0.05)。与低剂量组比较,中、高剂量组hs-CRP、ALP水平、MMP13 mRNA及蛋白表达、NTX、CTX-Ⅰ水平明显降低,骨密度、Runx2 mRNA及蛋白表达、BGP、S-Ca水平明显升高(P<0.05)。与中剂量组比较,高剂量组hs-CRP、ALP水平、MMP13 mRNA及蛋白表达、NTX、CTX-Ⅰ水平明显降低,骨密度、Runx2 mRNA及蛋白表达、BGP、S-Ca水平明显升高(P<0.05)。结论应用独活寄生汤能有效改善骨质疏松老龄大鼠的骨密度和骨代谢,调节血清中骨代谢指标NTX、BGP、CTX-Ⅰ、S-Ca异常表达。

独活寄生汤联合唑来磷酸钠对老年骨质疏松患者HMGB-1、CGRP水平的影响

目的分析独活寄生汤联合唑来磷酸钠对老年骨质疏松患者高迁移率族蛋白(HMG)B-1、降钙素基因相关肽(CGRP)水平的影响。方法选取133例老年骨质疏松患者分为对照组(63例)与研究组(70例)。两组均进行基础治疗,对照组使用唑来磷酸钠治疗,研究组在对照组基础上服用独活寄生汤,对比两组骨代谢指标、炎症因子水平、HMGB-1、CGRP水平、骨密度、下肢肌力指标、疼痛评分、疗效。结果与治疗前相比,治疗后两组钙(Ca)、磷(P)水平、腰椎、双髋、股骨颈部位骨密度、慢速伸肌肌力、慢速屈肌肌力、中速伸肌肌力、中速屈肌肌力升高,碱性磷酸酶(ALP)、白细胞介素(IL)-6、肿瘤坏死因子(TNF)-α、HMGB-1、CGRP水平、疼痛视觉模拟评分(VAS)降低,且研究组变化幅度更大,具有统计学差异(P<0.05)。研究组治疗总有效率明显高于对照组(P<0.05)。结论独活寄生汤、唑来磷酸钠结合可使老年骨质疏松患者HMGB-1、CGRP水平降低,提升骨密度,并使患者的疼痛程度降低,临床效果良好。

中医外治法联合体外冲击波治疗网球肘的研究进展

体外冲击波疗法因其操作简便,安全无创等优点,已逐渐成为目前临床治疗网球肘(肱骨外上髁炎)的重要方法之一,但本病因高复发率而极易发展成为顽固性肱骨外上髁炎,严重影响患者的日常生活质量,临床往往采用多种治疗方式联合应用。在中医理论指导下,体外冲击波疗法联合中医外治法治疗网球肘的运用,能够显著提高临床疗效和降低复发率。该文就近年来中医外治法联合体外冲击波治疗网球肘的进展方面作以综述,以望今后为本病提供更加有效的治疗方法及科研思路。

钢丝张力带固定加人工髋关节置换术在高龄骨质疏松性股骨粗隆间骨折中的应用

目的：探讨钢丝张力带固定加人工髋关节置换术治疗高龄骨质疏松性股骨粗隆间骨折的临床效果。方法2011--2013年收治的50例高龄骨质疏松性股骨粗隆间骨折患者，随机分为两组，各25例。对照组采用人工髋关节置换术治疗，观察组采用钢丝张力带固定加人工髋关节置换术治疗。对比观察两组的手术时间、卧床时间、切口长度、术中出血量、引流量和临床疗效及术后并发症发生率。结果观察组患者的手术时间和卧床时间均明显比对照组短，切口长度也明显比对照组短，术中出血量和引流量均明显比对照组少（ P 〈0.05）；观察组患者的临床疗效优良率96.0％明显比对照组高（76.0％）（ P 〈0.05）；观察组患者的术后并发症发生率8.0％明显比对照组低（32.0％）（ P 〈0.05）。结论钢丝张力带固定加人工髋关节置换术在高龄骨质疏松性股骨粗隆间骨折中的应用效果良好。

不同引流方式对全膝关节置换术后恢复的影响

目的探讨不同引流方式对全膝关节置换术后恢复的影响。方法将武汉市汉阳医院自2012年2月至2013年10月接受单侧全膝关节置换的80例患者随机分为三组:常规引流组28例,引流自体血回输组32例,延迟开放引流组20例。各组均采用相同的手术处理,比较各组术后总引流量、异体输血情况、体温和血红蛋白的变化情况,伤口愈合情况和关节活动情况。结果三组患者术后血红蛋白值比较,差异有统计学意义(F=7.566,P=0.001)。引流自体血回输组术后第1、3、7天最高体温与其他两组相比,差异均有统计学意义(F1=3.963,P=0.023;F2=5.472,P=0.006;F3=6.744,P=0.002)。引流自体血回输组的总引流量与其他两组相比,差异有统计学意义(F=23.412,P<0.001)。常规引流组有50%患者术后接受了异体血输注,与其他两组相比,差异有统计学意义(χ2=6.541,P=0.038)。在伤口愈合、肢体活动度、肢体肿胀等方面比较,差异无统计学意义。结论延迟开放引流能显著减少患者的术后出血,减少输异体血患者例数。与自体引流血回输相比,能降低患者术后发热率。因此具有更大的临床经济效益,值的进一步探讨。

水泥稳定碎石路面基层的施工技术思路分析

随着生活水平的不断提升,人们生活环境也发生翻天覆地的变化。为达到交通畅通无阻的要求,我国各等级别的公路不断建设与开发。在大多数公路路面建设中,对于基层施工建设材料多数都选择具有优良性能的水泥稳定碎石。但据目前情况来看,水泥稳定碎石基层材料很容易受到周边环境的影响,从而导致基层施工后质量上会出现一定的瑕疵。所以,要因地制宜,根据不同工程对水泥稳定碎石基层施工一系列环节进行控制分析,才可以确保水泥稳定碎石基层施工的高效高质量,避免造成不必要的损失。而文章从水泥稳定碎石施工质量控制上着重分析,并总结提出了相应的基层施工时质量的控制方法。

脑外伤后综合征患者颈椎损伤的致病机制研究

脑外伤后综合征(post-traumatic brain syndrome)指脑外伤患者已经恢复,但由于自主神经功能的失调或精神性方面等一系列症状的存在,部分患者在经过治疗以后仍然有头痛、头晕、失眠、注意力集中障碍、神经过敏等症状,但神经系统检查并未发现异常情况,若脑外伤后患者在3个月以上仍持续存在以上症状且无明显好转则为脑外伤后综合征[1]。

连续刚构桥0号块托架反拉预压施工技术

结合代开沟大桥的结构特点和施工现场实际情况,研究和设计出0号块托架反拉预压体系,采用张拉钢绞线来反拉预压托架。在桥梁承台施工时对称预埋钢绞线,采用连接器接长钢绞线至托架预压分配梁,用千斤顶张拉钢绞线形成反力来预压托架,这样做节省工期、减少投入、解决连续刚构桥0号块托架预压作业面狭小的问题,同时满足托架预压的技术要求,可为以后类似工程提供借鉴。

车祸致多发性创伤的早期并发症及治疗对策

目的探讨车祸致多发性创伤早期并发症的发生规律和治疗对策,对并发症进行治疗。方法总结848例车祸伤患者,其中有257例伴两个以上解剖部位的多发创伤,并相继于伤后10 d内出现各种并发症,分析主要并发症的发生规律及治疗对策。结果257例并发症单一发生或多个同时发生,231例经积极预防和治疗痊愈,治愈率为89.9%;26例死亡病例由于抗休克不力或脂肪栓塞综合征治疗不及时而导致多器官功能衰竭。结论车祸致多发创伤并发症的治疗关键在于早期预防、早期诊断以及采取正确、有效的治疗对策。

艾滋病外科围手术期的处理

艾滋病合并外科疾病的手术难问题,是社会长期关注的问题,其原因是人们对艾滋病心存恐惧,担心病人手术风险,担心在手术过程中工作人员发生职业暴露,这些担心引发了很多社会问题,使很多艾滋病人不敢去手术,使我们的工作人员不愿从事传染病外科工作,导致艾滋病合并相关外科疾病没有得到及时救治。我院自2008年开展艾滋病合并外科手术以来。

骨肉瘤中iNOS的表达与肿瘤血管形成的相关性和意义

目的:检测骨肉瘤细胞中一氧化氮合酶iNO S的表达,研究其与骨肉瘤临床特征和血管内皮生长因子(VEGF)表达的相关性,探讨iNO S在骨肉瘤发生发展及转移中的作用及机制。方法:采集骨肉瘤标本及其病例资料,采用免疫组织化学技术检测48例骨肉瘤标本iNO S和VEGF的表达,统计分析iNO S与VEGF在骨肉瘤组织中表达的相关性和iNO S在骨肉瘤表达与病例临床特征之间的相关性。结果:iNO S和VEGF在肿瘤组织中的阳性表达率明显高于对照组织(P<0.01),iNO S的表达与病理分化程度、诊断时骨肉瘤有否转移密切相关,而与骨肉瘤的发病年龄、性别、肿瘤大小、原发部位、D ah lin病理分型均无关。结论:iNO在骨肉瘤中的表达可能参与肿瘤的发生发展和转移,有可能成为评价骨肉瘤转移和预后的分子指标和辅助治疗骨肉瘤的新靶点。