秋水仙碱对LPS诱导内皮间质转化的影响及机制

目的研究秋水仙碱(colchicine,Col)对脂多糖(lipopolysaccharide,LPS)诱导的人脐静脉血管内皮细胞(human umbilical vein vascular endothelial cells,HUVECs)内皮间质转化的影响及相关机制。方法采用LPS处理HUVECs建立内皮间质转化(endothelial to mesenchymal transition,EndMT)模型。CCK-8法检测细胞增殖率,LDH实验检测细胞毒性,筛选最适药物浓度。将细胞分为正常对照组,正常对照+秋水仙碱(10 nmol·L^(-1))组,LPS(10 mg·L^(-1))模型组,LPS+秋水仙碱(10 nmol·L^(-1))组。倒置显微镜观察细胞形态学变化情况,Transwell实验检测细胞迁移能力,小管形成实验检测小管形成能力,Western blot检测内皮标志物(CD31/VE-cadherin)及间质转化标志物(α-SMA/FSP-1)表达情况;使用NF-κB信号通路抑制剂处理,检测相关信号通路变化情况。结果CCK-8及LDH实验显示,10 nmol·L^(-1)的Col为最适药物浓度;LPS可诱导细胞形态发生变化,Col在一定程度可逆转HUVECs的形态学变化;Transwell实验显示,LPS处理组HUVECs迁移能力明显增强(P<0.05),而Col可明显逆转这种现象(P<0.05);小管形成实验显示,LPS处理可抑制HUVECs小管形成能力(P<0.05),Col可改善LPS诱导的小管形成能力受损(P<0.05);Western blot结果显示,Col与LPS共同孵育后,CD31及VE-cadherin表达水平相比于模型组明显增加(P<0.05),α-SMA及FSP-1表达水平相比于模型组明显下降(P<0.05);在LPS诱导内皮细胞EndMT过程中,Col可抑制NF-κB/Snail信号通路激活。结论Col能有效抑制LPS诱导的EndMT,其机制与调控NF-κB/Snail信号通路有关。

恩格列净通过调控AMPK/eNOS信号通路改善ox-LDL诱导的内皮祖细胞功能障碍

目的研究恩格列净(EMP)对氧化低密度脂蛋白(ox-LDL)诱导内皮祖细胞(EPCs)损伤的保护作用及机制。方法通过密度梯度离心法提取、分离并培养小鼠骨髓来源的的EPCs。采用Dil标记乙酰化低密度脂蛋白(Dil-ac-LDL)联合FITC标记荆豆凝集素-1(FITC-UEA-1)双摄取法鉴定。将EPCs分为正常对照组,ox-LDL组以及ox-LDL联合不同浓度恩格列净实验组。CCK-8检测细胞活力,Transwell检测细胞迁移,FITC-Annexin V/PI检测细胞凋亡,ELISA检测细胞上清液中血管内皮细胞生长因子(VEGF)、基质细胞衍生因子-1α(SDF-1α)含量;流式细胞术检测一氧化氮(NO)的合成情况。Western blot检测AMPK、p-AMPK、eNOS、p-eNOS的蛋白表达。结果提取的EPCs诱导培养至第7天经鉴定为小鼠骨髓EPCs。与对照组比较,ox-LDL组细胞活力降低,迁移细胞减少,凋亡增加,VEGF、SDF-1α含量降低,NO合成减少(P<0.05);与ox-LDL组相比,不同浓度恩格列净组细胞活力有所提高,迁移细胞增多,凋亡减少,VEGF、SDF-1α含量升高,NO合成增加(P<0.05)。ox-LDL处理可明显抑制AMPK及eNOS磷酸化(P<0.05),恩格列净处理可以改善AMPK及eNOS磷酸化水平(P<0.05),而AMPK抑制剂Compound C可使恩格列净改善EPCs功能活性的作用受到明显的抑制(P<0.05)。结论恩格列净可改善ox-LDL诱导的EPCs功能障碍,其机制与调控AMPK/eNOS信号通路有关。

镁离子在治疗心律失常中的研究进展

Mg2+是人体内重要的电解质离子,是人体细胞内含量第二丰富的阳离子,具有复杂的调节机制,对维持机体新陈代谢及其他生理功能具有极其重要的作用。目前已发现人体内超过300种酶的作用离不开其参与,其中包括Na+-K+-ATP酶、Ca2+-ATP酶等。临床上利用Mg2+调节这些酶的活性等特点,将Mg2+作为一种预防和治疗心律失常的药物在很多方面运用,但其规范化运用仍有待进一步明确。现将Mg2+在心律失常中的运用综述如下。

Junctate蛋白在心力衰竭中的研究进展

Junctate蛋白是在哺乳动物肌浆网/内质网膜上新发现的一种Ca2+结合蛋白,与兰尼碱受体相关联,是天冬氨酰β-羟化酶基因转录的五个家族成员之一。Junctate蛋白存在于多种细胞中,参与细胞内Ca2+浓度的调节。大量的动物实验观察到,过表达junctate蛋白会导致多种钙调控通道功能异常,持续过表达junctate蛋白还会导致心肌肥大、心律失常、心肌纤维化等病理改变,最终会出现心力衰竭。因此,junctate蛋白在心力衰竭中起了重要的作用,现将junctate蛋白在心力衰竭中的相关研究做一综述。

从传统探寻中走向重建——中国古代文论的现代视角

长期以来,中国现当代文艺理论基本上是借助西方的一整套话语,处于文论的沟通和解读的失语状态中,丢失了中国几千年文化传统的根基与命脉。医治中国当代文论由"失根"而导致"失语症"的药方,就是实现中国古代文论的现代转换。没有民族个性的文论是不能与西方文论处于平等对话的地位的,只能生活在二十世纪西方文论的阴影之下。建设有中国特色的文艺学,不是改头换面地恢复旧传统,而是在继承传统的基础上创新﹑进行现代诠释。

小剧场戏剧“空间艺术”探微

目前,我国的小剧场戏剧有很大发展,已成为令人注目的一种戏剧形态,并出现了很多有影响的作品。游弋在大剧场边缘的小剧场,改变了戏剧艺术原有的空间秩序,造成剧场物理空间、心理空间变化,呈现出小剧场戏剧空间开放性和假定性的特点,加强了观演双方交流的深度。

圣约翰草提取物治疗心力衰竭的临床疗效及对血浆AngⅡ的影响

探讨圣约翰草提取物对合并焦虑、抑郁的心力衰竭患者的疗效。68例老年心衰患者,用汉密尔顿抑郁量表(HAMD)测评患者心理障碍的发生情况,将患者分为圣约翰草提取物组(干预组)及对照组,干预组在常规治疗基础上加用圣约翰草提取物300mg,口服,tid,治疗2w后观察治疗前后患者心功能改善情况并检测HAMD评分及血浆血管紧张素Ⅱ(AngⅡ)水平。结果圣约翰草提取物组患者心功能的改善及HAMD评分改善明显优于对照组,血浆AngⅡ明显下降。圣约翰草提取物能改善心衰合焦虑及抑郁症患者的疗效。

过表达Junctate蛋白对小鼠心肌细胞肌浆网Ca^(2+)浓度调节的影响

目的:探讨过表达junctate蛋白后,小鼠心肌细胞肌浆网上钙通道对细胞内钙离子浓度调节的影响。方法:以正常表达junctate蛋白的小鼠(wild-type mice,WT)心肌细胞为WT组,以过表达junctate蛋白的转基因小鼠(transgenic mice,TG)心肌细胞为TG组,用离子荧光测定仪测定两组小鼠心肌细胞静息状态下的钙离子浓度,后再分别测定两组小鼠在给予咖啡因及氯化钾刺激后,心肌细胞内的钙离子浓度的变化情况,并测定咖啡因引起钙瞬变后的恢复时间。结果:静息状态下,TG组心肌细胞[Ca^(2+)]i为(77.6!8.8)nmol·L-1,显著低于WT组(144.2!10.6)nmol·L-1,(P<0.01);加入咖啡因后,TG组细胞内钙瞬变幅度显著低于WT组,且TG组钙瞬变后自峰值恢复到基础水平的时间较WT组明显延长(P<0.01);加入KCl后,两组细胞内[Ca^(2+)]i均瞬间增高,TG组心肌细胞内钙瞬变幅度明显大于WT组(P<0.01)。结论:过表达junctate蛋白会影响肌浆网对细胞内钙离子浓度的调节,其机制可能是过表达junctate蛋白会导致兰尼碱受体(Ryanodine receptor,RyR)功能上调、肌浆网Ca^(2+)-ATP酶(Sarcoplasmic-endoplasmic-reticulum Ca^(2+)-ATPase,SERCA)功能下调,并使肌浆网钙库储存量减少,最终导致静息状态及去极化状态下细胞内钙离子浓度异常。