SD大鼠外阴慢性单纯性苔藓模型的构建及蛋白酶激活受体2的表达

目的建立SD大鼠外阴慢性单纯性苔藓(Lichen simplex chronicus,LSC)动物模型,研究蛋白酶激活受体2(protease activated receptor 2,PAR2)在模型大鼠外阴皮损中的表达,为LSC提供理想的动物模型。方法将70只雌性SD大鼠随机分为A组(空白对照组,n=10)、B组(丙酮对照组,n=10)和C组(单纯机械刺激对照组,n=10)、D组(实验组,n=40)。A组不予以任何处理;B组每周3次涂丙酮溶液于大鼠外阴皮肤,共10周;C组每周3次对大鼠皮肤予以单纯的机械刺激,共10周;D组予以0.5%二甲基苯并蒽(7,12-Dimethylbenzanthracene,DMBA)丙酮溶液联合机械刺激每周3次诱导大鼠外阴皮肤,共10周。6、8、10、12、14周肉眼及镜下观察大鼠外阴皮肤的变化。免疫组织化学、Western blotting检测A组和D组PAR2蛋白的表达,q RT-PCR检测PAR2的m RNA的表达。结果 D组第8周有57.5%(23/40)的SD大鼠出现了LSC改变,第10周有95%(38/40)的大鼠外阴表现为LSC,至12周时,20%(8/40)的大鼠外阴都形成了乳头状新生物。丙酮及单纯的机械刺激无导致LSC的作用。免疫组化及Western blotting结果显示D组PAR2的蛋白表达量较A组明显增加(P<0.05);q RT-PCR结果显示D组PAR2的m RNA的表达量较A组明显增加(P<0.05)。结论机械刺激联合0.5%DMBA丙酮溶液可诱导雌性SD大鼠LSC,PAR2可能与疾病的发生及进展密切相关。

低强度脉冲超声对环磷酰胺诱导的大鼠卵巢损伤有修复作用

目的探讨低强度脉冲超声对腹腔注射环磷酰胺引起的SD大鼠卵巢损伤的修复作用。方法 63只清洁级雌性SD大鼠随机取13只为正常组,其余50只连续5 d腹腔注射环磷酰胺30 mg/kg,建立卵巢早衰动物模型。将造模成功的43只大鼠随机分为实验对照组(21只)、治疗组(22只)。正常组、实验对照组不干预;治疗组给予低强度脉冲超声辐照。监测各组大鼠动情周期的变化,辐照结束后7 d处死大鼠,测定血清雌二醇(E_2),卵泡刺激素(FSH),抗苗勒管激素(AMH)的变化,观察各组大鼠卵巢形态学及卵泡数量变化。结果注射环磷酰胺后,与正常组相比,实验对照组动情周期紊乱,各级卵泡数明显减少,血清E_2和AMH显著降低,FSH显著升高(P=0.01);超声辐照后,与实验对照组相比,治疗组动情周期恢复正常,卵泡数明显增加,血清E_2显著增高(P=0.01),FSH显著降低(P=0.01),AMH变化不明显(P=0.50)。结论低强度脉冲超声对腹腔注射环磷酰胺引起的SD大鼠卵巢的损伤有修复作用。

聚焦超声对SD外阴慢性单纯性苔藓模型大鼠外阴皮肤P物质及P物质受体表达的影响

目的探讨聚焦超声对SD外阴慢性单纯性苔藓模型大鼠外阴皮肤中P物质(SP)和P物质受体(NK1-R)表达的影响。方法参考Sally法建造40只雌性SD大鼠外阴慢性单纯性苔藓模型,并随机分为治疗组(n=20)和对照组(n=20)。治疗组予以聚焦超声治疗,对照组采用与治疗组相同的方法治疗,但仪器无功率输出。聚焦超声治疗2周后,取大鼠外阴皮肤,HE染色观察组织学改变,甲苯胺蓝染色观察肥大细胞总数及脱颗粒率,免疫组织化学方法检测SP和NK1-R的表达,比较两组指标差异。结果聚焦超声治疗2周后,治疗组75.00%(15/20)大鼠外阴皮肤转为正常,对照组10.00%(2/20)大鼠外阴皮肤转为正常,差异有统计学意义(2χ=17.289,P<0.05)。治疗组肥大细胞总数及脱颗粒率及外阴皮肤中SP和NK1-R表达水平均明显低于对照组(P均<0.05)。结论聚焦超声可抑制外阴慢性单纯性苔藓大鼠皮肤中SP的释放及NK1-R的表达,并降低肥大细胞总数,减少肥大细胞脱颗粒,减轻局部炎症反应。

低强度脉冲超声对环磷酰胺致卵巢早衰大鼠卵巢GDF9和BMP15表达的影响

目的探讨低强度脉冲超声通过调节卵母细胞自分泌因子即生长分化因子9(GDF9)和骨形态发生蛋白15(BMP15)的表达在预防环磷酰胺致大鼠卵巢早衰发病中的作用。方法选取63只雌性SD大鼠,其中13只为空白组,其余50只连续5 d腹腔注射环磷酰胺30 mg/kg,建立卵巢早衰动物模型。将造模成功的43只大鼠分为实验对照组(n=21)和治疗组(n=22),治疗组给予低强度脉冲超声辐照,空白组和实验对照组采用与治疗组相同的方法治疗,但仪器无功率输出。Western blotting检测GDF9和BMP15的表达情况。结果最终共纳入大鼠48只,其中空白组11只,实验对照组17只,治疗组20只。实验对照组大鼠腹腔注射环磷酰胺后食欲下降,毛发无光泽,活动差;治疗组大鼠超声辐照后较实验对照组一般情况明显好转,毛色恢复光泽,反应较为灵敏。与空白组比较,实验对照组超声辐照后GDF9和BMP15表达均显著下降(均P=0.00);与实验对照组比较,治疗组超声辐照后GDF9和BMP15表达均显著增强(P=0.01、0.00)。结论低强度脉冲超声能促进大鼠卵巢GDF9和BMP15的表达,从而修复卵巢功能,促进卵泡的发育。

聚焦超声治疗对外阴低级别鳞状上皮内病变模型大鼠外阴皮肤缺氧诱导因子1α、血管内皮生长因子及突变型p53表达的影响

目的探讨聚焦超声治疗对外阴低级别鳞状上皮内病变(LSIL)模型大鼠外阴皮肤中缺氧诱导因子1α(HIF-1α)、血管内皮生长因子(VEGF)及突变型p53(mtp53)表达的影响。方法建立28只外阴LSIL大鼠模型,随机分为治疗组(n=14)及对照组(n=14)。治疗组予以聚焦超声辐照,对照组予超声假辐照(治疗仪无功率输出)。4周后取模型大鼠外阴皮肤行组织病理学观察,并以免疫组织化学方法检测HIF-1α、VEGF及mtp53表达。结果聚焦超声辐照/假照后4周治疗组92.86%(13/14)外阴皮肤基本恢复正常生理结构,对照组71.43%(10/14)进展为高级别鳞状上皮内病变(HSIL)。治疗组大鼠外阴皮肤中HIF-1α、VEGF及mtp53表达均明显低于对照组(P均<0.05)。结论聚焦超声可通过降低HIF-1α、VEGF及mtp53表达,改善局部组织微环境而安全、有效治疗大鼠外阴LSIL。

二甲基苯并蒽诱导外阴鳞状上皮内病变大鼠模型的建立

目的建立SD大鼠外阴鳞状上皮内病变动物模型。方法采用二甲基苯并蒽(DMBA)丙酮溶液制备外阴鳞状上皮内病变动物模型,将70只雌性SD大鼠分成空白对照组(10只)、机械刺激组(10只)、丙酮组(10只)、机械刺激+DMBA丙酮实验组(模型组,40只);每周3次对各组SD大鼠外阴皮肤进行相应处理,实验处理14周,观察至18周。分别于6、8、10、12、14、18周在肉眼及光镜下动态观察4组SD大鼠外阴皮肤变化情况;取空白对照组和模型组SD大鼠外阴皮肤,采用免疫组织化学染色及免疫印迹法检测突变型p53(mtp53)和血管内皮生长因子(VEGF)蛋白的相对表达量,qRT-PCR检测mtp53和VEGF mRNA的表达情况。结果空白对照组、机械刺激组及丙酮组大鼠各个时期形态学及组织病理学变化无明显差异。模型组SD大鼠在第14周70%出现了低级别鳞状上皮内病变改变,27.5%出现高级别鳞状上皮内病变改变,造模成功率达97.5%;免疫组化和Western blotting检测结果显示,与空白对照组相比,模型组mtp53和VEGF蛋白均有明显增加,差异具有统计学意义(P<0.05)。qRTPCR结果显示,模型组大鼠外阴皮肤中mtp53和VEGF mRNA的表达均高于空白对照组,差异具有统计学意义(P<0.05)。结论0.5%DMBA丙酮溶液联合单纯机械刺激可以诱导雌性SD大鼠建立外阴鳞状上皮内病变动物模型。

卵巢早衰的病因及治疗进展

卵巢早衰(POF)是指年龄小于40岁的妇女出现闭经。近年来,POF的发病率有逐年增加的趋势,其临床特征以潮热盗汗、不孕为主,可严重危害患病女性的身心健康。经过广泛查阅国内外相关文献资料,现本文从遗传学因素、医源性因素、自身免疫因素等病因机制方面及激素替代治疗、青春期诱导、生育问题与避孕等治疗措施方面对POF的现状进行了归纳总结。

聚焦超声治疗小鼠CINⅠ的疗效

目的 :探讨聚焦超声治疗小鼠宫颈上皮内瘤样变(cervical intraepithelial neoplasia,CIN)的疗效及其可能的作用机制。方法 :利用二甲基苯蒽原位诱发小鼠CINⅠ动物模型,随机分为治疗组(20只)和对照组(20只)。治疗组给予聚焦超声治疗;对照组采用与治疗组相同的操作方法进行治疗,但仪器无功率输出。治疗后2周,应用HE染色法和免疫组织化学法分别检测小鼠宫颈组织的病理学变化以及小鼠宫颈组织中p16、Ki67、Fas和Fas L的表达。结果 :成功建立了小鼠CINⅠ动物模型。治疗组中有15只小鼠治疗后恢复为正常宫颈组织,4只小鼠治疗后仍为CINⅠ,死亡1只,治疗有效率为75%(15/20);对照组中有11只小鼠治疗后仍为CINⅠ,6只发展为CINⅡ,1只发展为CINⅢ,死亡2只,治疗有效率为0%;2组间差异有统计学意义(P<0.01)。治疗组小鼠宫颈组织中p16、Ki67和Fas L的强阳性表达率低于对照组,而Fas的强阳性表达率高于对照组(P值均<0.01)。结论 :聚焦超声可有效治疗小鼠CINⅠ,这可能与宫颈组织中p16、Ki67、Fas和Fas L表达水平的变化有关。