中药材鹿鞭的分子鉴定研究

目的 :建立中药材鹿鞭的分子分类学鉴定试剂盒。方法 :根据对不同产地梅花鹿、马鹿、白唇鹿、水鹿线粒体DNA进行PCR扩增和序列测定 ,并与常见伪充药材来源动物线粒体DNA同位置序列比较 ,找到该 4个鹿种的特征片段 ,经过实际检验 ,筛选出合适片段作为鹿的种属特异性PCR引物。结果 :该引物与相关试剂组成试剂盒后 ,可用于中药材鹿鞭与常见伪充药材牛鞭、驴鞭等的鉴别。结论 :用分子分类学方法鉴别中药材鹿鞭 ,具有科学、稳定、准确、简便等特点 ,值得推广。

中药材鹿茸的分子分类学鉴定研究

目的 建立中药材鹿茸的分子分类学鉴定试剂盒。方法 根据对不同产地的梅花鹿、马鹿线粒体DNA进行PCR扩增和序列测定 ,并与亲缘关系较近的伪充药材来源动物线粒体DNA同位置序列比较 ,找到鹿的特征片段 ,经过实际检验 ,筛选出合适片段作为鹿的种属特异性PCR引物。结果 该引物与相关试剂组成试剂盒后 ,可用于中药材鹿茸与伪充药材的鉴别。结论 用分子分类学方法鉴别中药材鹿茸 ,具有科学、稳定、准确、简便等特点 。

牦牛血超氧化物歧化酶电泳多谱带现象研究

采用聚丙烯酰胺凝胶电泳、SDS 聚丙烯酰胺凝胶电泳、线性梯度聚丙烯酰胺凝胶电泳、制备电泳、等电聚焦电泳以及不同试剂处理等多种方法对牦牛血铜锌超氧化物歧化酶电泳多谱带现象进行了研究。结果表明在不同的实验条件下 ,各带会发生相互转化。

鹿线粒体DNA的种属特异性片段研究

目的 :寻找鹿线粒体DNA上区别于常见伪充鹿类药材来源动物的种属特异性片段。方法 :根据对不同产地梅花鹿、马鹿、水鹿、白唇鹿线粒体DNA进行PCR扩增和序列测定 ,并与亲缘关系较近的伪充药材来源动物线粒体DNA同位置序列比较 ,找到鹿的特征片段 ,经过实际检测 ,筛选出鹿的种属特异性片段。结果 :该种属特异性片段作为PCR引物能对鹿DNA进行扩增 ,而不能扩增其它常见伪充药材来源动物的DNA。结论 :该片段能从基因型特征上将鹿和伪充药材来源动物区分开来 。

小葱叶胞质中3种Cu·Zn-SOD的纯化及性质研究

超氧化物歧化酶（ＳＯＤ）是一种消除体内氧自由基损伤的重要因子，可分为ＣｕＺｎ－ＳＯＤ、Ｍｎ－ＳＯＤ和Ｆｅ－ＳＯＤ．作者在小白菜叶中曾发现５种ＳＯＤ，已鉴别其中一种为Ｍｎ－ＳＯＤ，来源于线粒体［１］；其余４种为ＣｕＺｎ－ＳＯＤ，其中２种分别来源于胞质［...

生物新技术的发展推动中药鉴定的变革

目的 :介绍最近十年来生物新技术应用于中药鉴定的最新进展。方法 :通过各种检索方式 ,较全面收集了近十年来有关中药鉴定技术进展的文献资料并进行综述。结果 :介绍了各技术的基本原理及其在中药鉴定中的应用实例。结论 :随着生物新技术的发展 ,中药鉴定领域发生了重大的技术变革 ,尤其是分子生物学技术在中药鉴定中的应用 。

端粒酶·端粒序列·端粒结合蛋白

该文介绍了端粒酶的性质、特点与功能，端粒序列的不同合成方式及其在生物体内的重要生理功能以及各种端粒结合蛋白的特点。

鹿属动物线粒体DNA序列测定的研究

目的 通过DNA序列测定 ,寻找鹿属动物线粒体DNA的特异性片段 ,用于鹿类药材的鉴定。方法 对 9种鹿属动物的线粒体DNA进行引物扩增和序列测定 ,并与牛科、马科的DNA序列进行比较。结果 找到了鹿属动物特异的DNA序列。结论 利用该序列可对鹿类药材进行真伪区分。

西洋参总皂苷酶水解产物成分研究

西洋参总皂苷经β-糖苷酶催化水解,采用HPLC检测分析确定西洋参总皂苷中的主要原人参二醇型皂苷Rb1、Rd、Rc和Rb2已经完全被水解。水解产物通过反复硅胶柱层析和反向硅胶柱层析分离纯化得到7个皂苷,通过NMR谱图分析分别鉴定为人参皂苷compound K(1)、人参皂苷Mc(2)、人参皂苷Rg1(3)、人参皂苷Rg2(4)、人参皂苷Re(5)、人参皂苷F1(6)和拟人参皂苷F11(7)。β-糖苷酶催化西洋参总皂苷水解实验表明,西洋参中原人参二醇型皂苷的水解产物是人参皂苷compound K和人参皂苷Mc。

高效液相色谱法测定肌苷注射液的含量

目的 :用高效液相色谱法测定肌苷注射液的含量。方法 :采用HypersilODS 2柱 ,pH 5 .0、0 .0 5mol/L的醋酸钠缓冲液为流动相 ,检测波长 2 48nm。结果 :平均回收率为 99.7% ,RSD为 0 .2 6%。结论 :该法操作简便、快速、准确 ,重现性、稳定性好 。

分子内分子伴侣机制的研究进展

在原核生物、真核生物及病毒中,一些蛋白质的折叠不符合Anfinsen原则,即依靠自身的氨基酸序列是不够的,还需一段被称为分子内分子伴侣(IMC)的肽段来协助折叠.根据机制不同,IMC可分为两类:第一类IMC引导成熟肽折叠为具有空间结构的蛋白质;第二类IMC协助成熟肽的多聚化而使其获得生物学功能.IMC能提供比分子伴侣更契合的结构,更有效地引导成熟肽折叠,是一种更优的折叠策略.研究IMC分子机制,不仅能够确定IMC上哪些残基的协同作用引导成熟肽折叠,而且可通过改变或修饰其侧链来改造成熟肽,拓展传统的蛋白质工程.

HPLC法测定肌苷片的含量

摘要目的:用HPLC法测定肌苷片的含量。方法:采用HypersilODS2柱,以0.05mol/L的醋酸钠缓冲液pH5.0为流动相,检测波长为248nm。结果:平均回收率为99.5%,RSD为0.41%。结论:该法操作简便,快速、准确,重现性、稳定性好,是肌苷片含量测定的一种理想方法。

人参茎叶总皂苷酶水解产物成分研究

人参茎叶提取物经β-糖苷酶催化水解后,经硅胶柱和RP-18柱反复层析纯化得8个化合物。通过波谱图分析及结合文献数据,分别鉴定为20(S)-达玛烷-3β,6α,12β,20,25-五醇(1)、人参皂苷compound K(2)、人参皂苷F1(3)、人参皂苷Rh13(4)、人参皂苷Rg2(5)、3β,20(S)-二羟基达玛烷-24-烯-12β,23β-环氧-20-O-β-D-吡喃葡萄糖苷(6)、人参皂苷Rg1(7)和人参皂苷Re(8)。其中化合物1为新的达玛烷皂苷元。化合物2为分离到仅有的原人参二醇型皂苷,表明该β-糖苷酶高效转化人参茎叶的原人参二醇型皂苷为人参皂苷compound K。

2-O-α-D-吡喃葡萄糖基抗坏血酸研究进展

维生素C(又称抗坏血酸)是一种水溶性维生素,对人体健康有重要作用。抗坏血酸在食品、医疗、化妆品等行业上有广泛的应用价值,但由于自身的不稳定性,易被氧化降解,严重影响其应用。为解决这个问题,对稳定的抗坏血酸衍生物的研究成为国内外专家学者的研究热点。抗坏血酸的一种重要衍生物——2-O-α-D-吡喃葡萄糖基抗坏血酸(AA-2G),作为抗坏血酸的替代品,稳定性显著提高,具有很好的开发应用价值。国内外针对该物质进行了诸多的研究,本文就AA-2G生物合成和应用的国内外最新研究进展进行总结概括。

四氢嘧啶溶析结晶工艺的研究

为提高四氢嘧啶的结晶收率,提出了有机试剂溶析结晶四氢嘧啶浓缩液方案,考察了溶析剂的选择、料液浓度、溶析剂的添加量及搅拌速率对收率的影响。结果表明,利用6倍料液体积的丙酮从300 g/L的四氢嘧啶浓缩液中溶析结晶出晶体,搅拌速率为300 r/min,一次结晶收率可达到94%以上,相比降温结晶提高40%以上,且晶体经重结晶、干燥后纯度可达99%以上。

有机栽培龙脑百里香精油对白色念珠菌体外抑菌活性的研究

【背景】白色念珠菌(Candida albicans)属于条件致病性真菌,可引起严重的黏膜真菌感染及全身系统性真菌感染,是导致患者高发病率和高死亡率的主要菌群之一。【目的】探究百里香精油对白色念珠菌的抑菌活性及抑制机理。【方法】测定5种百里香精油对白色念珠菌的抑菌圈直径,分析具有高抑菌活性的精油成分。在此基础上,通过扫描电子显微镜(scanning electron microscope,SEM)观察精油对白色念珠菌菌体细胞形态的影响。测定碱性磷酸酶(alkaline phosphatase,AKP)含量、胞外溶液电导率并进行碘化丙啶(propidium iodide,PI)染色分析,探究精油对白色念珠菌生物膜的形成与黏附及磷脂酶活性的影响,并通过实时荧光定量PCR法分析与白色念珠菌生物膜形成相关基因(凝集素样序列基因ALS4,从酵母型向菌丝型细胞的形态转变基因HWP1、磷脂酶基因PLB1)的表达水平,探究该精油对白色念珠菌的抑菌机制。【结果】筛选出了对白色念珠菌高度敏感的有机栽培龙脑百里香精油(Thymus vulgaris CT borneol essential oil,TBEO),其抑菌圈直径为(36.0±4.8)mm。TBEO的主要成分有α-松油醇(43.43%)、莰烯(8.97%)、丁香烯(7.70%)、香芹酚(5.81%)和芳樟醇(5.19%)等,约占TBEO总含量的70%。扫描电子显微镜的结果表明TBEO改变了白色念珠菌的表观形态,菌体表面凹陷、扭曲变形。胞外AKP含量、溶液电导率和碘化丙啶(PI)染色分析结果表明TBEO增大了白色念珠菌细胞膜及细胞壁的通透性。TBEO对白色念珠菌生物膜的形成有抑制作用,对已形成的生物膜有良好的清除作用。TBEO减少菌丝形成、影响黏附和降低磷脂酶活性。实时荧光定量PCR试验显示TBEO可显著下调HWP1、ALS4和PLB1基因的表达量。【结论】TBEO对白色念珠菌有良好的抑制作用,本研究为TBEO在白色念珠菌感染防控中的应用提供了理论依据。

中药鉴定技术中的生物技术

中药用于治疗疾病在我国源远流长，已有几千年的历史，其副作用小，特别是对慢性、消耗性疾病具有独特的、西药不可取代的作用。中药包括植物药和动物药，品种繁多，其疗效与药材品质有着密不可分的关系，因此，为了保证用药的安全有效，准确、迅速，简捷的鉴别方法的建立成为当务之急。

高通量筛选工具的设计与应用

定向进化方法作为新兴的高效蛋白质工程手段,其内容包括蛋白质突变体文库的构建和有效突变体的快速筛选。高通量筛选方法是定向进化方法的重要组成部分,是成功获得有效突变体的关键。筛选的突变体数量越多,获得有效突变体的几率越大。以下介绍了目前已经成功应用于或有潜力应用于定向进化改造蛋白质的几种高通量筛选工具。高通量筛选工具的不断设计与开发将推动蛋白质工程领域的技术革新。

碳水化合物结合结构域研究进展

糖类是自然界数量最多的一类有机化合物,生物对其降解利用是最重要的反应之一。碳水化合物酶是具有降解、修饰和生成糖苷键功能的一大类酶。由于高分子糖类可溶性低,其糖苷键难以触及,因此其被酶作用的效率相对较低。碳水化合物结合结构域能特异性结合多糖底物,对提升糖类底物的酶催化效率起着关键的作用。本文从碳水化合物结合结构域的家族类型、结构类型、结构与功能关系以及与催化结构域的关系几个方面进行了综述,对阐明碳水化合物结合结构域与碳水化合物识别机制,进而将其广泛应用于生物和医疗领域具有重要意义。