三棱UPLC-UV特征图谱研究

目的:建立三棱化学成分的超高效液相色谱-紫外法(UPLC-UV)特征图谱,并对主要特征峰进行指认。方法:色谱柱为Waters ACQUITY UPLC HSS T3柱(100 mm×2.1 mm,1.8μm),流动相为乙腈-0.1%磷酸水溶液,线性梯度洗脱,双波长切换检测,0~12 min为300 nm,12~16 min为240 nm,测定10批三棱药材UPLCUV图,确定共有特征峰并计算相似度,利用对照品及超高效液相色谱-四极杆飞行时间质谱法(UPLC-Q/TOF-MS)对主要特征峰进行指认。结果:采集了10批三棱药材UPLC-UV指纹图谱,确定11个特征峰,相似度均大于0.9,认定了9个特征峰,其中通过对照品指认了咖啡酸、对羟基苯甲酸、对香豆酸,通过质谱解析指认了2个苯丙素乙酰蔗糖酯、3个苯丙素甘油酯及首次在三棱中发现的三棱酮。结论:建立了三棱UPLC-UV特征图谱,能够表征不同结构类型的三棱化学成分,为三棱药材质量控制提供了参考。

基于UPLC-SIR/MS检测的黄芪桂枝五物汤基准样品中黄芪甲苷的含量测定方法研究

建立黄芪桂枝五物汤基准样品中黄芪甲苷的含量测定方法。方法:运用了超高效液相色谱法(UPLC)进行分离,采用Waters Acquity UPLC HSS T3色谱柱,0.1%甲酸水-甲醇溶液梯度洗脱,流速0.4 mL/min;利用电喷雾电离-四级杆质谱SIR模式进行检测,黄芪甲苷检测离子为m/z 829 Da。结果:发现黄芪甲苷在0.7813-12.50μg/mL的浓度范围内,具有良好的线性关系,相关的系数值为0.999,黄芪桂枝五物汤的基准样品中,黄芪甲苷的平均回收率值为100.9%(104.9%,具有良好的精密度、稳定性及重复性,测得10批黄芪桂枝五物汤基准样品中黄芪甲苷的含量范围为0.451-0.784mg/g。结论:实验所建立的方法具有良好的重现性和稳定性,操作简便,使得到的结果准确,此方法可以用于黄芪桂枝五物汤基准样品中,对黄芪甲苷的含量进行检测。

基于UPLC-Q-TOF-MS技术的黄芪桂枝五物汤基准样品化学成分分析及表征

目的:对黄芪桂枝五物汤基准样品(冻干粉)进行化学成分分析,为该经典名方制剂的质量标准制定提供质量标志物。方法:采用超高效液相色谱-四级杆-飞行时间-串联质谱法(UPLC-Q-TOF-MS),色谱条件为Waters ACQUITY UPLC?HSS T3色谱柱(2.1 mm×100 mm,1.8μm),流动相甲醇(A)-0.1%甲酸水溶液(B)梯度洗脱(0~8 min,1%~20%A;8~10 min,20%~30%A;10~12 min,30%~35%A;12~14 min,35%~40%A,14~23 min,40%~55%A,23~27 min,55%~99%A;27~28 min,99%A;28~28.5 min,99%~1%A;28.5~30 min,1%A),柱温40℃,进样量2μL,流速0.3 mL·min^(-1)。在正、负离子模式下采集黄芪桂枝五物汤基准样品(冻干粉)的质谱数据,质谱条件为电喷雾离子源(ESI),扫描范围m/z 50~1200,碰撞能量10~30 eV。利用UNIFI 1.8和Progenesis QI 2.0软件解析,结合对照品和文献信息比对,对黄芪桂枝五物汤基准样品(冻干粉)的化学成分进行表征。结果:一共表征出123化学成分,其中黄酮类33个、苷类26个、有机酸类18个、萜类11个、苯丙素类7个、姜辣素类4个、生物碱类3个、氨基酸类3个、酰胺类2个、其他类16个。结论:建立的方法可以快速、准确地表征黄芪桂枝五物汤基准样品(冻干粉)中的化学成分,可为该经典名方的质量评价指标筛选提供依据,并为其制剂研究提供参考。