草鱼nrf1基因的克隆与表达及其应激响应研究

为研究跨膜转录因子核因子E2相关因子1(Nuclear factor-erythroid 2 related factor 1,nrf1)在动物机体抗氧化应激过程中的作用,通过同源克隆获得草鱼nrf1基因序列,其开放阅读框为1560 bp,编码519个氨基酸;系统进化树分析表明草鱼nrf1与团头鲂(Megalobrama amblycephala)进化关系较近。对nrf1进行组织表达分析,结果显示nrf1在肝脏中表达水平最高,其次是心脏和肠道(P<0.05)。昼夜节律分析显示,在9:00时nrf1表达水平最高且显著高于3:00、12:00、18:00、21:00和24:00(P<0.05)。经急性氨氮胁迫处理24h和48h时,发现草鱼nrf1基因在低氨氮(5 mg/L)组和高氨氮(20 mg/L)组中表达量相对于对照组均显著升高(P<0.05);且低氨氮组nrf1表达量在24h时显著低于高氨氮组(P<0.05),而在48h时显著高于高氨氮组(P<0.05)。此外,研究使用3种不同蛋白源(鱼粉、菜粕和豆粕)饲料对草鱼进行生长实验,发现在养殖后14d、28d和35d,菜粕和豆粕组nrf1表达水平显著高于鱼粉组(P<0.05),其中28d时豆粕组nrf1表达量显著高于菜粕组(P<0.05)。综上所述,草鱼nrf1基因表达具有组织特异性,且受到水体氨氮浓度和饲料蛋白源的调控,研究为揭示鱼类nrf1基因的分子特征及其抗氧化应激反应中的功能奠定了理论基础。

鳜和鲢肌肉蛋白质氨基酸组成及其蛋白质组成的比较分析(英文)

采用高压液相色谱和二维电泳方法,对鳜和鲢肌肉组织蛋白质组成成分以及肌肉蛋白质双向电泳分布图谱进行了比较研究。研究结果证明,鳜肌肉组织蛋白质干重为34.7%,而鲢肌肉干重为33.6%;鳜肌肉组织中必需氨基酸含量和鲜味氨基酸(天冬氨酸和甘氨酸)均高于鲢。同时,将两种鱼肌肉蛋白进行2D-gel双向电泳分离,发现鳜和鲢肌肉蛋白质组成和分布也存在明显的差异。本研究将肌肉蛋白质组成成分和蛋白的双向电泳技术结合起来,进行蛋白质组分归类分析,可为进一步研究两种鱼肌肉肉质研究打下基础,为水产业提供有价值的参考,为鱼类的养殖和肉质的改良、利用提供一个指标。

植物营养剂对豇豆产量、还原糖、维生素C及有机硒含量的影响

采用田间试验和仪器分析方法,研究植物营养剂对豇豆(Vigna unguiculata)产量、还原糖、维生素C及有机硒含量的影响。结果表明,在豇豆的花期喷施植物营养剂(处理①)可以提高产量达35.80%,还原糖含量增加3.55%,有机硒含量增加16.54%。植物营养剂能有效提高豇豆的产量和品质。

“双创”视域下学科竞赛和科研项目联动的生物工程类专业人才培养的研究

在新的发展时期,在双创人才培养背景下,本文以学科竞赛和科研项目的联动为主线,注重专业、人才和科研“三位一体”,通过优化人才培养方案和专业师资团队,加强竞赛与科研之间的互动,促进专业与人才发展的多级联动,构建基于学科竞赛的科研育人平台全方位的协同创新育人体系,建立地方高校生物工程类专业竞赛科研协同培养应用型人才培养的模式,揭示竞赛科研协同人才培养模式的教学改革机制,切实提升生物工程类专业应用型人才培养质量。为全国地方性高校生物工程类专业竞赛科研协同人才培养模式教学改革起到示范和推广作用。

淡化对南美白对虾存活率、渗透压和Na^+/K^+-ATP酶活力的影响

采用微型冰点渗透压仪、荧光定量PCR和酶活力测定的方法分析淡化对南美白对虾(Penaeus vannamei)存活率、体内渗透压及Na^+/K^+-ATPase基因表达和酶活力的影响。结果表明,养殖水体盐度由12‰下降到0‰过程中,虾苗存活率和活力始终维持一个较高的水平。对虾体内渗透压随着水体盐度的降低而降低,但没有显著差异。渗透压调节关键基因Na^+/K^+-ATPase mRNA表达水平和酶活力在水体盐度12‰下降到9‰过程中显著升高,之后随着水体盐度的下降表达量显著降低,最后在6‰下降到0‰过程中趋于平缓。

富硒微肥对利川有机水稻硒含量的影响

采用田间试验和仪器分析方法,研究了锌硒葆富硒微肥对利川有机水稻硒含量的影响。结果表明,水稻在破口期、抽穗期、乳熟期,通过叶面喷施锌硒葆富硒微肥,能显著提高稻谷硒的含量,硒含量达到0.21 mg/kg,从而达到国家富硒稻米标准。

冠心病病人定量检测肌钙蛋白和肌白蛋白的临床价值

目的 定量检测肌钙蛋白I(cTnI)、肌红蛋白(Mb)以了解冠心病病人是否有早期急性心肌梗死(AMI)。方法 A组(正常对照组50名)、B组(冠心病病人无胸痛症状者87例) ,于清晨空腹取静脉血3mL送检;C组(冠心病病人有胸痛症状者4 8例) ,于胸痛后3h取静脉血3mL送检。A组、B组、C组全部采用全自动微粒子化学发光分析仪定量检测cTnI、Mb。结果 A组cTnI浓度为( 0 .2 7±0 .1 8) μg/L ,Mb浓度为( 4 2±2 1 ) μg/L ;B组cTnI浓度为( 0 .31±0 .1 9) μg/L ,Mb浓度为( 4 7±2 7) μg/L ,C组cTnI浓度为( 0 .86±0 .32 ) μg/L ,Mb浓度为( 2 1 6±1 7) μg/L ;C组与A组和B组比较有统计学意义(P <0 .0 5)。结论 对无痛性AMI病人何时检测cTnI、Mb比较困难,目前尚无预测指标。对有胸痛症状的冠心病病人检测cTnI、Mb可早期诊断AMI,及时溶栓和治疗。

红细胞平均体积与红细胞体积分布宽度在鉴别贫血类型中的临床价值

目的 探讨用红细胞平均体积（MCV）与红细胞体积分布宽度（RDW）值鉴别各型贫血的临床价值.方法 健康对照组100例,试验组患者167例,试验组又分为缺铁性贫血、轻型地中海贫血、叶酸缺乏及再生障碍性贫血组,静脉取血0.5～1.0 ml用EDTA-K2抗凝,应用BC3000型血细胞仪在2 h内测定.结果 健康对照组MCV（85±10.1）fl、RDW（12.5±1.8）%;缺铁性贫血组MCV（67.1±11.5）fl、RDW（22.5±5.4）%;轻型地中海贫血组MCV（65.3±13.5）fl、RDW（12.5±1.3）%;叶酸缺乏组MCV（95±21.2）fl、RDW（26.5±2.5）%;再生障碍性贫血组MCV（95±19.6）fl、RDW（12.5±0.9）%.MCV鉴别各型贫血均有统计学意义,RDW除轻型地中海贫血和再生障碍性贫血外均有统计学意义.MCV、RDW诊断缺铁性贫血敏感性为95.3%、特异性为96.8%;轻型地中海贫血的敏感性为93.2%、特异性为94.1%;叶酸缺乏敏感性为91.6%、特异性为95%.结论 MCV、RDW在诊断各型贫血的敏感性和特异性较好,可作为鉴别各型贫血的指标.

不同植物营养剂对金银花产量和品质的影响

采用田间实验和仪器分析的方法,研究了不同配比的植物营养剂对金银花产量和品质的影响.结果表明:叶面喷施2%浓度的植物营养剂,可以提高金银花的产量及品质.其中处理6对金银花的产量和黄酮影响最明显,相对对照组产量和黄酮含量分别增加34.13%,26.63%.处理7对金银花绿原酸和木犀草苷含量相对对照组分别增加24.46%,11.6%.

地方本科院校生物工程特色专业的建设与展望

本文介绍了我校生物工程特色专业的形成及发展历程,总结了本特色专业的建设与发展经验,并对生物工程教学中存在的问题和就业创业等问题进行了思考与探讨,最后提出展望,努力使我校生物工程成为特色鲜明的重点专业。

临床血液培养病原菌菌群分布及耐药趋势分析

目的调查血液培养中病原菌的菌群分布及耐药趋势。方法1995/2004血液培养标本用荧光全自动血液培养仪(Bactec9120)进行培养,阳性标本用全自动微生物鉴定仪(Vitek32)进行鉴定,药敏采用KB法。结果在3104份血液培养标本中分离出病原菌331株,阳性检出率为10.7%。病原菌以革兰阳性(G+)需氧球菌居首位(50.3%),革兰阴性(G-)需氧杆菌次之(44.7%),真菌占3.0%,厌氧菌占1.1%。血液培养中的G+球菌对万古霉素和亚胺培南较为敏感,G-杆菌对亚胺培南、舒普深、丁胺卡那较为敏感。结论血液培养病原菌以G+球菌为主,G-杆菌次之;儿童血液培养病原菌以葡萄球菌属为主;亚胺培南对G+球菌和G-杆菌均具有较高的敏感率。

南美白对虾淡水湖泊养殖试验研究

2014年,我们在湖南省常德市澧县官垸乡沟围湖村沟围湖渔场一处面积约400亩天然湖泊,进行了南美白对虾养殖工作,取得了良好效益,为南美白对虾在湖泊、水库成功养殖提供借鉴,现以沟围湖养殖实例总结如下。

FIASCO法筛选鳜鱼微卫星标记

通过FIASCO（Fast Isolation by AFLP Sequences Containing repeats）法构建鳜鱼（Siniperca chuatsi）基因组微卫星富集文库，分离微卫星DNA序列并对其特征进行分析。鳜鱼基因组DNA经MseⅠ限制性内切酶消化后，选取200～800bp的片段与MseⅠ接头连接，用生物素标记的寡核苷酸探针（AC）8、（CT）8、（AT）7、（GATA）8、（GATT）7与其杂交，杂交复合物结合到包被有链霉亲和素的磁珠上，变性洗脱获得单链目的片段，经PCR扩增形成双链，然后克隆到pGEM-T载体上，转化至DH5α中，首次成功构建鳜鱼基因组微卫星富集文库。对其中100个阳性克隆进行测序，60个（60％）含有微卫星序列（GenBank Accession Number：DQ789247～DQ789306）。成功设计了47对鳜鱼微卫星引物，并合成21对引物进行PCR扩增，结果筛选出18个多态性微卫星标记。结果表明：FIASCO法能有效提高筛选微卫星标记的效率。本研究筛选的微卫星标记可以用于鳜鱼遗传背景分析和遗传连锁图谱构建，并将为鳜鱼基因组结构分析、标记辅助育种以及数量性状位点（QTL）基因的定位等研究提供候选微卫星标记。[中国水产科学，2007，14（4）：608—614]

三种鳜鱼(Siniperca)生长激素基因内含子多态性的比较研究

鳜(Siniperca chuatsi)、大眼鳜(Siniperca kneri)、斑鳜(Siniperca schezeri)为鳜属中3种主要经济鱼类,具有较近的亲缘关系和相似的生活习性,但生长性状差异较大。为探索3种鳜鱼生长差异与基因差异间联系,以野生群体为材料,采用PCR扩增、电泳及测序等方法,对生长发育相关基因生长激素(GH)基因进行了多态性检测与分析。在第一内含子、第二内含子前段、第二内含子中段微卫星序列及第三内含子中均检测到多态性。各区域共检测到25种长度类型,其中4种为鳜与大眼鳜共有长度类型,3种为鳜、大眼鳜与斑鳜共有长度类型,其余18种为各物种特有长度类型。各区域长度类型共组成14种单倍型,无种间共有单倍型。序列长度差异主要由重复序列及DNA片段的插入或缺失形成。在第1内含子3'端-6位与第3内含子5′端+16位各发现一处靠近剪接位点的序列差异。根据多态性检测结果构建系统发育树,鳜与大眼鳜先聚为一枝。本研究可为进一步确认鳜鱼GH基因差异与生长性状间联系,并利用基因差异进行鳜鱼种质资源保护及分子育种奠定基础。

白芨中萜类化合物通过诱导血管内皮细胞凋亡抑制血管生成(英文)

本文研究了白芨中的萜类化合物对血管生成的抑制作用,及其抑制血管生成的可能机制。采用萃取和色谱法从白芨中分离和纯化了该萜类化合物。通过鸡胚绒毛囊膜(CAM)和人脐静脉内皮细胞(HUVEC)研究了白芨中萜类化合物及其粗提物对血管及血管内皮细胞的抑制作用。结果表明,含该萜类的粗提物显著抑制鸡胚绒毛尿囊膜血管生成;该萜类纯品能明显抑制HUVEC增殖,且可诱导HUVEC凋亡,包括细胞体积缩小,细胞膜起泡,细胞核裂解,染色质浓缩和边集,出现凋亡小体,DNA降解。因此,白芨萜类化合物的抗血管生成作用与诱导血管内皮细胞凋亡有关。

白芨萜类化合物对人脐静脉内皮细胞凋亡和细胞骨架的作用

利用白芨萜类化合物处理人脐静脉内皮细胞(HUVECs)并进一步研究了细胞凋亡及细胞骨架.白芨萜类化合物可拮抗血管内皮细胞生长因子(VEGF)和碱性成纤维细胞生物因子(bFGF)刺激的HUVECs增殖并诱导细胞凋亡.在处理的HUVECs中caspase-8活性明显增加.流式细胞术分析显示经处理的HUVECs的凋亡率随处理时间延长而升高.通过对微管进行免疫荧光染色和微丝进行荧光染色后,用激光共焦扫描显微观察表明,白芨萜类化合物处理的HUVECs中的微管和微丝发生改变甚至被破坏.因此,白芨萜类化合物造成HUVECs凋亡很可能是通过促使微管解体以及微丝去组装造成的.

喷施外源氨基酸对水稻干重及含氮量的影响

为了探索外源氨基酸对水稻干重及含氮量的影响,本试验采用500mg·L^(-1)L-亮氨酸-^(15)N在分蘖期、抽穗期、蜡熟期喷施水稻叶面,并以清水为对照。结果表明,喷施外源L-亮氨酸-^(15)N处理组中的叶、茎鞘、稻谷的干重及含氮量均显著高于对照组,分蘖期、抽穗期、蜡熟期3个时期喷施L-亮氨酸-^(15)N比分蘖期、抽穗期2个时期喷施其干重及含氮量高,分蘖期、抽穗期2个时期喷施L-亮氨酸-^(15)N比只喷施分蘖期其干重及含氮量高,叶面吸收^(15)N约50%运输到水稻的籽粒。本研究对提高稻米产量及品质具有重要的实际生产意义。