复合微生态制剂对肉羊生长性能、屠宰性能和免疫功能的影响

试验旨在研究复合微生态制剂对肉羊生长性能、屠宰性能和机体免疫功能的影响。选取体重相近的杜寒杂交育肥羊72只,随机分为4组,对照组饲喂基础饲粮,试验组饲粮中分别添加0.10%、0.20%、0.40%复合微生态制剂,试验期为60 d。结果表明:与对照组相比,饲粮中添加0.20%和0.40%复合微生态制剂可以显著提高肉羊试验期末重和平均日增重(P<0.05),显著降低肉羊试验期料重比(P<0.05);饲粮中添加0.20%和0.40%复合微生态制剂可以显著提高肉羊胴体净肉重、胴体重和屠宰率(P<0.05);饲粮中添加0.20%和0.40%复合微生态制剂可以显著提高肉羊血清中免疫球蛋白A(IgA)、免疫球蛋白G(IgG)、白介素-2(IL-2)、白介素-6(IL-6)、肿瘤坏死因子-α(TNF-α)含量(P<0.05)。综上所述,肉羊饲粮中添加复合微生态制剂可以有效促进肉羊生长性能,提高肉羊屠宰性能和机体免疫能力;综合考虑养殖经济效益,复合微生态制剂在肉羊养殖中的推荐添加量为0.20%。

大肠杆菌不耐热肠毒素突变体的原核表达及其活性研究

为使大肠杆菌不耐热肠毒素(LT)的毒性丧失或减弱的同时仍保留其较强的免疫原性,本实验通过PCR和重叠-延伸PCR扩增,制备了突变体LTR72/G192的基因片段,经酶切和测序结果表明构建的表达载体pLTR72/G192阅读框架正确,而且相应位点氨基酸获得了替换。IPTG诱导表达目的蛋白经SDS-PAGE电泳检测,表达出突变体重组蛋白为约30 ku和10 ku的两个蛋白带,与LTA、LTB亚基分子量相吻合。Western blot检测结果表明两个蛋白亚基均可与His抗体发生特异性反应。目的蛋白经纯化后进行ADP-核酸转移酶试验及Patent-mouse毒性试验检测其酶活性与毒性,突变重组蛋白与野生型LT相比其酶活性和毒性均明显降低。纯化的目的蛋白与鸡新城疫病毒弱毒疫苗联合一起经滴鼻免疫鸡,ELISA结果显示,突变体LTR72/G192能辅助新城疫疫苗在血清和黏膜中产生较高滴度的抗新城疫病毒的IgG和IgA。

LT粘膜佐剂对鸡新城疫疫苗的免疫增强作用研究

研究大肠杆菌热敏性肠毒素突变体蛋白(heat-labile enterotoxin,LTRG)对鸡新城疫(Newcastle disease virus,NDV)疫苗经不同途径接种效果的影响。以NDV LaSota株作为共免疫原,与LTRG重组蛋白经滴鼻、口服及肌肉注射三种途径接种雏鸡,通过血清IgG抗体、HI抗体及粘膜分泌型IgA抗体水平变化,评价不同途径接种LTRG对NDV疫苗的免疫效果的影响。结果显示:①三种途径接种,LTRG均能显著增强NDV疫苗的免疫抗体水平,免疫雏鸡血清抗体和粘膜抗体水平均高于NDV疫苗单独免疫组;②LTRG对NDV疫苗免疫增强作用,以滴鼻接种最显著:二、三免后LTRG+NDV滴鼻组与NDV组血清IgG、粘膜IgA差异均显著(P<0.01、P<0.05);LTRG+NDV口服与NDV组血清IgG差异不显著(P>0.05)、粘膜IgA差异极显著(P<0.01);LTRG+NDV肌注与NDV组IgG差异不显著(P>0.05)、粘膜IgA差异显著(P<0.05);③三种免疫途径比较:血清IgG抗体水平差异均不明显(P>0.05);滴鼻、口服免疫可诱导雏鸡产生较高的粘膜IgA抗体、血清HI抗体。由此可见:LTRG粘膜佐剂对NDV疫苗免疫增强作用,以粘膜(滴鼻、口服)途径接种效果最为显著,能诱导高水平的粘膜IgA抗体及血清抗体。

老年病人胰十二指肠切除术后严重并发症发生的危险因素

目的:研究老年病人胰十二指肠切除术(pancreaticoduodenectomy, PD)术后严重并发症发生的危险因素。方法:回顾性分析2016年1月至2020年12月本院行PD 399例≥65岁(65~91岁)老年病人的临床资料,其中≥75岁76例(19.0%)。Barthel指数低提示生活自理能力低下。用二元Logistic回归分析PD术后严重并发症的危险因素,构建预测模型。以受试者工作特征(ROC)曲线验证模型的预测效能。结果:399例老年PD病人中,术后并发症发生224例,总发生率56.14%。轻度并发症187例(46.87%),严重并发症37例(9.27%)。年龄≥75岁(OR=2.78, P<0.05)、合并高血压(OR=4.20, P<0.05)和Barthel指数(提示生活自理能力)低(OR=0.96, P<0.05)为老年PD术后严重并发症发生的独立危险因素。以年龄、合并高血压、术前营养风险、手术形式、生活自理能力的Barthel指数、手术时间6项指标构建PD术后严重并发症的风险模型,回归方程拟合度0.93。ROC曲线显示,该模型曲线下面积AUC为0.76,灵敏度65%,特异度76%。结论:年龄≥75岁、合并高血压且生活自理能力低为老年病人PD术后严重并发症的独立性危险因素。以年龄等6项指标构建的模型能较好预测老年病人PD术后严重并发症的发生。

大肠埃希菌不耐热肠毒素双突变体的表达及活性研究

为了使大肠埃希菌不耐热肠毒素(LT)的毒性丧失或减弱的同时仍保留其较强的免疫原性,通过PCR和重叠—延伸PCR扩增突变体LTK63/G192基因片段,IPTG诱导表达目的蛋白,经Western免疫印迹检测目的蛋白,在HPLC系统上纯化目的蛋白,经ADP-核酸转移酶试验及Patent-mouse毒性试验检测其酶活性与毒性,纯化的目的蛋白与鸡新城疫病毒弱毒疫苗联合一起经滴鼻免疫鸡。结果表明:制备的突变体LTK63/G192的基因片段经酶切和测序发现,所构建的表达载体pLTK63/G192阅读框架正确,且相应位点氨基酸获得了替换;经SDS-PAGE电泳检测,野生型LT及双突变体均表达出约33.0ku和13.0ku的两条蛋白带,与LTA、LTB亚基分子质量相吻合;经Western bolt检测,两个蛋白亚基均可与His抗体发生特异性反应;双突变蛋白的酶活性和毒性与野生型LT相比酶活性和毒性都有所降低;突变体LTK63/G192能辅助新城疫疫苗在血清和黏膜中产生较高抗新城疫病毒的IgG和IgA。说明LTK63/G192是一个良好的免疫佐剂。

大肠埃希菌热敏性肠毒素B亚基研究进展

产肠毒素大肠埃希菌(EnterotoxigenicE.coil,ETEC)是引起幼畜、婴幼儿及旅游者腹泻的重要病原之一。ETEC产生两类肠毒素,一种是对热敏感的热敏性肠毒素(heat-labile enterotoxin,LT),另一种是对热不敏感的耐热性肠毒素(heat-stable enterotoxin,ST)。LT不仅是ETEC主要的毒力因子,而且还是一种重要的黏膜佐剂,它由A、B亚基组成,由于LT A具有毒性作用,限制了LT作为黏膜免疫佐剂的应用;而LT B无毒且具有黏膜佐剂活性,使其成为备受关注的佐剂之一。近年来对LT B的结构、介导的免疫调节分子机制、突变体及其佐剂作用已进行了较为深入的研究,为充分利用LT B的黏膜免疫佐剂功能奠定了基础。

大肠杆菌不耐热肠毒素突变体作为佐剂的研究进展

黏膜免疫是防止病原菌侵入黏膜表面引起疾病的最有效的途径,通过黏膜免疫不仅能产生全身免疫反应,还能产生局部的黏膜免疫反应,该免疫途径无痛苦且易操作,同时减少疾病传播的风险.但大多数抗原的黏膜免疫原性都很差,通过口服或滴鼻免疫可溶性蛋白通常引起特异性免疫耐受,这些使得在黏膜免疫中使用恰当的佐剂成为必须. 不耐热肠毒素（Heat— labile enterotoxin,LT）是由肠毒素大肠杆菌（enterotoxigenic Escherichia col i,ETEC）分泌的一种外毒素,既有较强的免疫原性又有较强的黏膜佐剂效应.但由于强的毒性,限制了它的广泛应用,因此通过构建各种突变体使之具备优良的佐剂活性且没有显著的毒性是当前研究的主要目标.本文主要从突变体的酶活性、毒性以及佐剂活性进行综述,为黏膜疫苗的研制打下一定基础.

羔羊补饲饲料中添加酸化剂的应用

试验旨在研究补饲饲料中添加酸化剂对羔羊增重和腹泻的影响。选取处于同一生长水平的羔羊30只,随机分为3组,每组2个重复,每个重复5只,试验组分别添加Ⅰ型酸化剂、Ⅱ型酸化剂,添加量均为9 kg/t,对照组为不添加酸化剂组。试验预试期5 d,正式期28 d。结果表明:补饲饲料中添加酸化剂可在一定程度上增加羔羊体重,降低腹泻率,其中以添加Ⅱ型酸化剂组效果最好。

低酸度酒精阳性乳发生原因与防制措施

由于原料乳的质量影响最终乳产品的质量,因此从矿物质不平衡、饲料配比不合理、饮用水质量差、应激因素、内分泌失调、乳腺细胞代谢的变化等几个方面,介绍低酸度酒精阳性乳的发生原因以及防治措施,可为养殖户及养殖企业预防酒精阳性乳的发生提供参考依据,以提高乳制品的质量。

玉米3种非组培转基因方法转化外源bar基因研究

本试验用3种非组培型转基因方法,即花粉介导、子房注射、萌动种胚法在玉米上转化bar基因,经大田筛选及PCR和PCRSouthern检测,证明均可获得转化植株。还分析了3种方法的转化机理,并通过转化率与操作简便程度的比较,认为花粉介导优于萌动种胚法,二者又优于子房注射法。

牛病毒性腹泻病毒SYBR Green I实时定量RT-PCR检测方法的建立及应用

[目的]在建立一种快速定量的用于检测牛病毒性腹泻病毒（BVDV）的实时荧光定量RT-PCR检测方法.[方法]根据GenBank公布的BVDV 5′端非编码区（5′ UTR）核苷酸序列,软件分析后设计特异性扩增引物,建立SYBR GreenⅠ实时荧光定量PCR方法.[结果]建立的方法只能检测到BVDV,而与猪瘟病毒、牛传染性鼻气管炎病毒、牛轮状病毒及牛冠状病毒没有交叉反应,具有高度的特异性;在102～108copies/μL模板范围内具有良好的线性关系,所制作的标准曲线相关系数为0.998,最低可检测下限可达到102 copies/μL,具有灵敏度高的特点;不同情况下3次重复实验,变异系数均小于1.5％,具有重复性好的特点.[结果]成功建立了一种用于检测BVDV的实时荧光定量RT-PCR技术,并可用于临床样品的检测,适用于BVDV的快速诊断和流行病学调查.

饲用酵母对断奶前后犊牛生长性能、血清代谢物和瘤胃发酵性能的影响

文章旨在研究饲用酵母对断奶前后犊牛生长性能、血清代谢物及瘤胃发酵性能的影响。试验将20头21 d、平均体重为(53.56±1.53)kg的犊牛随机分为2组,每组5个重复,每个重复2头。对照组犊牛在断奶前(21~48 d)和断奶后(49~70 d)饲喂基础日粮,酵母组犊牛在断奶前(21~48 d)和断奶后(49~70 d)饲喂基础日粮+2和4 g/d饲用酵母。试验结果:与对照组相比,酵母组70 d犊牛体重以及21~48 d、21~70 d平均日增重分别显著提高8.50%、16.90%和14.67%(P<0.05)。酵母组70 d犊牛血液胰高血糖素、49和70 d胰岛素样因子-1以及49 d干扰素-γ浓度较对照组分别显著提高16.35%、88.23%、76.02%和318.86%(P<0.05)。与对照组相比,酵母组犊牛瘤胃氨氮和丙酸浓度分别显著提高56.19%和24.04%(P<0.05),但乙酸与丙酸比值显著降低24.20%(P<0.05)。结论:在本试验条件下,断奶前后犊牛补充2和4 g/d饲用酵母可以提高血液胰岛素样因子-1和胰高血糖素浓度,进而提高犊牛体重和断奶后3周的平均日增重。

不同纤维牧草比例对绵羊生长性能、养分消化及氮代谢的影响

文章旨在评估全混合日粮中青贮银合欢与棕榈粕的添加比例对绵羊生长性能、养分消化、氮代谢及瘤胃发酵性能的影响。试验将96头平均体重为19.82 kg的绵羊随机分为3组,每组8个重复,每个重复4头。T1~T3组绵羊在10周的饲养试验期间分别饲喂棕榈粕与青贮银合欢添加比例为2∶1、1∶1和1∶2的全混合日粮。结果:T3组绵羊的平均日增重较T1和T2组分别显著提高44.47%和26.02%(P<0.05),同时T3组饲料效率较T1组显著提高44.48%(P<0.05)。T3组绵羊中性洗涤纤维消化率较T1和T2组分别显著提高19.34%和17.98%(P<0.05)。T3组绵羊氮沉积量较T1组显著提高13.71%(P<0.05),同时T2和T3组绵羊氮沉积与氮摄入量比值较T1组分别显著提高12.36%和15.13%(P<0.05)。T2组绵羊瘤胃pH值较T1和T3组分别显著提高4.55%和5.16%(P<0.05),而T2和T3组绵羊瘤胃氨氮浓度较T1组分别显著提高34.40%和38.63%(P<0.05),但乙酸与丙酸比值较T1组分别显著降低5.13%和4.81%(P<0.05)。结论:在本试验条件下,全混合日粮中青贮银合欢与棕榈粕添加水平为2:1时可改善绵羊中性洗涤纤维表观消化率,提高氮沉积,促进日增重和饲料转化率。

戊型肝炎病毒及其感染诊断方法研究进展

戊型肝炎(HE)是由肝炎病毒科(Hepeviridae)肝炎病毒属(Hepevirus)戊型肝炎病毒(Hepatitis E virus,HEV)所引起的一种传染病。在美国、日本等许多国家从患病猪分离得到的HEV与当地患HE病人分离出的HEV有着高度的同源性,因此对食源性戊型肝炎病毒感染的预防及控制具有重要意义。论文就近年来国内外对该病的实验室诊断方法,包括病毒的分离鉴定、免疫学诊断、分子生物学诊断等研究概况进行了综述。

猪流感病毒多表位抗原的小鼠黏膜免疫试验

为探讨经黏膜途径免疫接种猪流感病毒(SIV)多肽疫苗的可行性,选择STV主要结构蛋白血凝素(HA)的T、B抗原表位,将多个表位片段串联,定向克隆到原核表达载体pET-30a(+)中,对串联表达的重组猪流感病毒蛋白SIV-ep1、SW-ep2、SIV-el2进行了小鼠免疫试验。重组蛋白以包涵体形式表达,经洗涤定量后,采用灌胃途径免疫6周龄KM小鼠,检测免疫小鼠抗体及细胞免疫水平。结果发现三免后各免疫组血清IgG抗体与PBS对照组差异极显著(P<0.01);黏膜分泌型IgA抗体,所有免疫蛋白组与PBS组差异均极显著(P<0.01);细胞免疫检测,所有免疫组小鼠外周血T淋巴细胞增殖明显;猪流感病毒血凝抗体检测,SIV-ep1免疫组、SIV-ep2免疫组、SIV-ep1与LT蛋白免疫组抗SIVH1N1亚型HI效价达1:1024,SIV-el2蛋白免疫组HI效价达1:512。结果表明,猪流感病毒重组多表位抗原灌胃免疫小鼠,能产生理想的黏膜免疫抗体和血清抗体。

羊常见寄生虫病种类及防治

概括羊常见寄生虫病的种类,阐述寄生虫病感染途径及其特点,介绍常见寄生虫病的症状和治疗方法 ,提出预防羊寄生虫病的感染的对策。

新疆巴州某规模化猪场主要疫病抗体检测结果与分析

为准确掌握新疆巴州某规模化猪场猪瘟、猪蓝耳病、猪伪狂犬病、口蹄疫的免疫效果,实时监控猪群免疫状态,及时发现风险,采集该猪场血样148份检测抗体水平。检测结果显示,该场猪瘟、猪蓝耳病、猪伪狂犬病病毒gB、口蹄疫抗体总体阳性率分别为98.61%、99.32%、100%、96.92%,远高于70%的国家标准,阳性猪只所占比例均较高。猪伪狂犬病病毒gE抗体阳性率为4.73%,说明该猪场伪狂犬病野毒感染率较低。在综合分析检测结果和猪场免疫程序的基础上,对该猪场主要疫病的免疫提出了一些调整意见,以化解疫病发生的风险。

猪蓝耳病的研究综述

猪繁殖与呼吸综合征(PRRS)是由猪繁殖与呼吸综合征病毒(PRRSV)引起的一种猪传染病,临床以母猪发热、厌食、流产、死胎、弱胎等繁殖障碍以及仔猪的呼吸道症状和高死亡率为特征。该文从该病的病原、流行病学、临床症状、解剖变化、诊断、综合防治等做一综述。