牛新孢子虫内标多重PCR检测方法的试验

本试验以牛新孢子虫NcSAG1基因、Nc-5基因和NcSRS2基因作为检测新孢子虫病的目的基因,以牛性腺(prolac-tin)基因作为内标对反应过程进行监测,对上述基因各设计1对引物。结果表明,4对引物可分别扩增出201bp、231bp、256bp和156bp的目的条带。经反应条件的优化,该方法具有较好的灵敏度,各质粒在103 copies/反应时,均可于同一管中扩增出较清晰的目的条带,只比单重PCR的灵敏度低了10倍,且不受内标模板存在的影响。经临床应用研究,该方法具有较好的特异性和重复性,可用来对新孢子虫进行快速准确的检测。

那西肽和益生素对广西三黄鸡生产性能及饲料养分利用率的影响

为研究那西肽和益生素对广西三黄鸡生产性能的影响,试验选择150只20日龄广西三黄鸡母鸡,随机分为3组,组内设两个重复,每个重复25只。Ⅰ组(对照组)基础日粮、Ⅱ组(那西肽组)基础日粮+4mg/kg那西肽、Ⅲ(益生素组)基础日粮+1g/kg益生素。饲养试验6周、饲养试验的第三周采用AIA法进行消化代谢试验、结束时进行屠宰试验。结果表明,与Ⅰ组比较:平均日增重Ⅱ组提高14.20%(P<0.05)、Ⅲ组提高10.32%(P>0.05);耗料增重比分别下降10.14%和5.66%;饲料主要有机养分利用率Ⅱ组和Ⅲ组均有所提高(P>0.05)。三个组的屠宰率、半净膛率、全净膛率、胸肌率差异均不显著。结论:两种添加剂均能促进三黄鸡的生长和提高饲料报酬。

葡萄籽中高聚原花青素水解工艺优化研究

以原花青素平均分子量为指标,醋酸为水解介质,对纯化工艺中所分离的高聚体原花青素(PPC)的水解工艺进行了优化研究。结果表明,在80℃下,用50%的醋酸水解提取30min,葡萄籽中提取纯化的高聚体原花青素平均分子量由1831.60下降到1108.80,下降了722.8个单位。

不同方法测定山羊粗饲料养分消化率的比较

为了比较不同方法测定的山羊粗饲料养分消化率的差异,试验采用随机区组设计,将12头体重相近的山羊随机分为3组(每组4头),分别饲喂象草、高粱秸秆和青贮玉米秸秆,采用酸不溶性灰分法、全收粪法和链烷烃C31法测定了山羊粗饲料干物质、有机物、粗蛋白、中性洗涤纤维、酸性洗涤纤维、粗脂肪和总能消化率。结果表明:象草组、高粱秸秆组和青贮玉米秸秆组分别采用3种方法所得各营养成分的消化率差异不显著(P>0.05)。说明3种方法测定山羊饲料养分消化率差异不大。

不同方法测定山羊粗饲料养分消化率的比较研究

将12只体重相近的山羊随机分为3组,每组4头。3组山羊分别饲喂以象草、高粱秸秆和青贮玉米秸秆。用全收粪法、酸不溶性灰分(AIA)法和链烷烃C31法测定了山羊对粗饲料中的干物质(DM)、有机物(OM)、粗蛋白(CP)、中性洗涤纤维(NDF)、酸性洗涤纤维(ADF)、粗脂肪(EE)和总能(GE)的消化率,结果表明,3种方法所得DM、OM、CP、NDF、ADF、EE和GE的消化率差异均不显著(P>0.05)。

吐鲁番地区常见品种葡萄籽中原花青素和脂肪含量的测定

[目的]测定吐鲁番地区常见葡萄品种葡萄籽中活性成分的含量。[方法]以吐鲁番地区常见的13个葡萄品种的葡萄籽为材料,测定并比较各品种葡萄籽中原花青素和脂肪的含量。[结果]在各品种葡萄籽中,和田红葡萄籽的脂肪含量最高,达21.5%;玛奶子葡萄籽次之,为21.0%;星浦一号葡萄籽最少,仅12.5%。原花青素含量最高的葡萄籽是黑提,达9.150%;赤霞珠次之,为8.790%;哈什汉最少,仅3.800%。[结论]该研究为吐鲁番地区葡萄籽的综合开发利用提供了理论依据。

猪流感(H3N2亚型)油乳剂灭活疫苗的免疫及攻毒试验

用不同剂量的猪流感H3N2亚型油乳剂灭活疫苗免疫15头断奶仔猪,每组5头,四周后二免。另外3头为非免疫攻毒对照组。首免后第10周用同源病毒攻毒,分别在免疫前及免疫后2、3、4、6、8、10、11周采血,分离血清,用HI试验检测其抗体滴度。攻毒后通过免疫猪和非免疫攻毒对照猪临床、病理变化及病毒分离等方面的比较,评价疫苗的保护效果。结果中、高剂量组的抗体滴度明显高于低剂量组;免疫组和对照组攻毒前后体温无显著差异(P>0.05),免疫组病理保护明显好于非免疫攻毒对照组;鼻液和肺中的病毒分离率比较,免疫组明显低于非免疫攻毒对照组。本研究表明,用该疫苗免疫后猪对同亚型的病毒攻击有一定的保护作用。

葡萄籽中原花青素提取和测量方法研究

以赤霞珠葡萄籽为原料,对原花青素的提取方法和含量测定进行了探索。结果表明:葡萄籽粉料液比为1∶10(w/v),在PH6.0、60℃条件下用80%甲醇提取3次,每次提取时间为90min时原花青素提取效果最佳,赤霞珠葡萄籽中原花青素含量为8.79%。

铜代谢相关基因模型的构建及其对急性髓系白血病预后的意义

目的 探讨铜代谢相关基因在急性髓系白血病(AML)预后预测中的意义。方法 从癌症基因组图谱和儿童肿瘤数据库中下载AML患者的RNA序列和临床病理学数据,通过单因素Cox回归分析和LASSO回归算法筛选对AML预后有影响的铜代谢相关基因并构建风险评分模型,分析差异基因表达情况。根据风险评分将AML患者分为高危组和低危组。绘制KaplanMeier生存曲线和ROC曲线,分析风险评分模型的预后意义。绘制基于风险评分的列线图,并验证其预测效能。采用免疫浸润分析研究与风险评分相关的肿瘤微环境特征。结果 共筛查到16个与AML预后相关的铜代谢相关的基因。年龄、白血病FAB分型、遗传学危险度分级等因素与高风险评分有关。ROC曲线显示,构建的风险评分模型预AML患者1、3、5年总生存率的AUC分别为0.899、0.890和0.951。Kaplan-Meier生存曲线显示,高危组的总生存期远短于低危组(P<0.01)。高风险评分与浸润免疫细胞(M2型巨噬细胞、调节性CD4+T细胞和自然杀伤细胞)有关。结论 基于铜代谢相关基因构建的风险评分模型可有效预测AML患者总生存率。风险评分与患者年龄、白血病FAB分型和遗传学危险度分级有关。

2020-2021年新疆地区猪流行性腹泻病毒S基因遗传变异分析

为了解新疆地区猪流行性腹泻病毒(PEDV)的遗传变异情况,于2020-2021年从新疆地区规模化猪场采集到326份临床仔猪腹泻病料和肠组织,利用RT-PCR方法对PEDV进行检测,选取部分PEDV阳性样品进行S基因全序列的克隆和测序,并对其序列、遗传进化和抗原表位进行分析。结果显示,326份样品中共有152份样品为PEDV阳性,阳性率为46.6%。选取的11份阳性样品中的PEDV S基因核苷酸(氨基酸)同源性为99.0%~100%(98.2%~99.9%),与GenBank中登录的PEDV参考毒株核苷酸(氨基酸)同源性为92.6%~98.0%(91.2%~97.7%),与经典株CV777核苷酸(氨基酸)同源性为93.1%~93.4%(92.3%~92.7%)。遗传进化分析显示,11份阳性样品均位于GIIa亚群,与中国疫苗株CV777处于不同的分群,说明新疆部分地区PEDV流行株与疫苗毒株CV777亲缘关系较远。序列比对结果显示,11份阳性样品中的PEDV S蛋白均存在氨基酸的插入和缺失,中和表位的COE区域变异较大,这可能会降低常规疫苗的免疫保护作用。结果表明,从分子水平明确了2020-2021年新疆地区PEDV的流行与变异情况,为新疆地区PED的防控提供了科学依据。

猪繁殖与呼吸综合征病毒NADC30-like毒株的毒力评价

为了评估当前优势流行的猪繁殖与呼吸综合征病毒(PRRSV)NADC30-like毒株的毒力,试验利用经猪肺泡巨噬细胞分离的5个NADC30-like毒株接种6~7周龄健康易感猪,以进行毒力评价(A-E组),并设立未攻毒阴性对照组(F组)。所有组攻毒后进行临床症状观察,并在第0、3、5、7、10、14和21天采集全血、咽拭子和肛拭子进行病毒载量检测。结果显示,除D组外其他攻毒组表现一过性体温升高,偶有到41℃,而D组在攻毒后第4~15天,该组试验猪平均体温均不低于40.5℃,体温显著高于其他攻毒组。病毒血症检测发现,除D组外,其他攻毒组在第3、5、7和10天均为核酸阳性,在第14天部分转为核酸阴性,但到第21天又转为阳性,而D组从攻毒到结束病毒血症始终为阳性。肛拭子和咽拭子病毒载量测定发现,除D组外,其他攻毒组在第3、5和7天均为核酸阳性,在第10、14和21天部分猪有时转为阴性,后又转为阳性;D组攻毒到结束肛拭子始终为阳性。从上述数据统计综合分析,结果表明D组所攻击的毒株毒力高于其他毒株,可引起3/5猪发病,且死亡一头,该毒株感染能产生PRRSV的典型临床症状,可初步用于NADC30-like疫苗的效力评价。

不同免疫增效剂对免疫猪瘟E2蛋白亚单位疫苗小鼠抗体的影响

为了研究不同免疫增效剂对免疫猪瘟病毒E2蛋白亚单位疫苗小鼠产生特异性抗体与鼠IFN-γ水平的影响。本研究将昆明白小鼠随机分为6组:CpG-A组、CpG-B组、复合增效剂组[单磷酰脂质A(MPL):胞壁酰二肽(MDP):β-葡聚糖=1:1:1]、纳米颗粒组、猪瘟E2疫苗组,非免疫对照组(Control组)。实验共使用6种免疫增效剂:CpG-A、CpG-B、单磷酰脂质A(MPL)、胞壁酰二肽(MDP)、β-葡聚糖、纳米颗粒与猪瘟E2蛋白(40μg/m L)混合制备疫苗,小鼠经皮下注射疫苗定期眼眦采血,分别使用猪瘟E2抗体检测试剂盒与鼠IFN-γ检测试剂盒测定猪瘟病毒E2蛋白特异性抗体和鼠IFN-γ水平。免疫后小鼠检测结果显示,首免后35天CpG-B组、复合增效剂组小鼠血清样品猪瘟E2抗体均高于猪瘟E2组,CpG-B组与猪瘟E2组比较抗体水平差异显著(F=0.048,p<0.05),复合增效剂组与猪瘟E2组比较抗体水平差异极显著(F=0.008,p<0.01);CpG-A、纳米颗粒组与猪瘟E2组比较,抗体水平差异不显著(F_(CpG-A)=0.56、F_(纳米颗粒)=0.35,p<0.05),CpG-B组与复合增效剂组效果对于猪瘟E2疫苗特异性抗体促进作用显著。综合以上研究结果首次表明,添加复合增效剂制成的疫苗进行单次免疫后,均能有效提高免疫后小鼠的猪瘟E2蛋白特异性抗体的水平;CpG-B与复合增效剂均能有效提高小鼠血清中猪瘟病毒中和抗体的水平;CpG-B能促进免疫后7~14 d小鼠IFN-γ的上调。本研究为昆虫细胞-杆状病毒系统表达的重组蛋白制备亚单位疫苗的免疫增效剂开发和研究奠定实验基础。

牛新孢子虫基因芯片检测方法的建立

为建立牛新孢子虫准确快速检测方法,本研究根据犬新孢子虫NcSAG1基因、Nc5基因和NcSRS2基因,以及弓形虫GRA6基因和牛性腺基因,设计合成相应的5对引物和5条芯片探针,以牛性腺基因为内标监控基因,进行芯片杂交试验,经反应条件的优化,建立了含监控内标,可对新孢子虫3个基因进行同步检测,并可与弓形虫GRA6基因进行区分检测的基因芯片检测方法.该方法对新孢子虫的最低检测限分别为102拷贝/μL,并且具有良好的特异性和重复性.利用建立的方法对157例临床样品进行检测,与普通PCR检测结果符合率为99.3 ％～98％.该方法的建立为新孢子虫等多病原高通量检测方法的研究奠定基础.

PEDV流行毒株抗体对不同亚型毒株的中和试验

猪流行性腹泻病毒(PEDV)是一种通过小肠感染,引起猪呕吐、腹泻、脱水的急性高度接触性传染病。2010年起在我国迅速暴发,对仔猪的致死率高达80%~100%。PEDV可分为G1 (G1a、G1b)与G2 (G2a、G2b)基因亚型,各亚型病毒纤突(S)蛋白基因序列存在缺失、插入和大量点突变。为进一步研究S蛋白序列的差异是否造成病毒抗原性的差异,本试验采集猪流行性腹泻流行毒感染猪只肛拭子进行PEDV-S蛋白基因序列比对分析,并对感染康复猪只采集血清进行中和试验,研究PEDV流行毒株血清抗体与不同基因亚型毒株中和反应情况。结果显示,流行毒(G2a)感染猪只血清抗体中和PEDV不同亚型病毒株,中和能力存在显着差异。对PEDV-A (G2a)毒株的中和能力最强,均值为1:60,对PEDV-B(G2b)株中和能力次之,均值为1:20,对CV777 (G1a)毒株无中和能力。

集团公司会计集中核算模式的探讨及对策

本文对集团公司实行会计集中核算进行一些尝试性探讨,以利于集团公司的战略发展和适应现代企业发展的需要。

功劳木溶液倒模联合红蓝光治疗中重度痤疮疗效观察

目的:观察功劳木溶液倒模联合红蓝光治疗中重度痤疮的疗效。方法:将100例中重度寻常性痤疮患者随机分为治疗组和对照组各50例,治疗组50例采用功劳木溶液倒模联合红蓝光治疗;对照组50例单用红蓝光治疗,治疗后比较两组治疗有效率。结果:治疗4周后治疗组痊愈30例,显效12例,总有效率84.00%,对照组总有效率58.00%,两组比较差异有统计学意义(P<0.05)。结论:功劳木溶液倒模联合红蓝光治疗中重度痤疮疗效好,不良反应少。

水稻栽培技术要点及农业技术推广分析

就水稻栽培技术要点及农业技术推广进行详细分析。

血液系统恶性肿瘤与实体肿瘤患者碳青霉烯耐药肠杆菌科细菌定植分布特点及主动筛查评价

目的观察血液系统恶性肿瘤与实体肿瘤患者碳青霉烯耐药肠杆菌科细菌(CRE)定植分布情况,并评价主动筛查对于患者CRE定植和血流感染的影响。方法选取2018年1月至2020年12月杭州师范大学附属医院肿瘤血液科收治的接受化疗的恶性肿瘤患者262例,其中血液系统恶性肿瘤200例,实体肿瘤62例。2018年1至6月收治的26例患者为单次筛查组,仅在患者化疗前进行单次肠道CRE筛查,阳性患者每周复查,阴性患者未再进行筛查;2018年7月至2020年12月收治的236例患者为主动筛查组,患者进行至少3个时间点(化疗前、化疗后中性粒细胞缺乏期、中性粒细胞缺乏伴发热期)的肠道CRE筛查,对出现发热或腹痛、腹泻、肛周炎症等肠道并发症的患者进行重复肠道CRE筛查。观察患者CRE定植分布,并比较两组患者CRE筛查阳性率。结果262例患者中CRE筛查阳性的菌种以肺炎克雷伯菌和大肠埃希菌检出率最高,分别为69.50%和22.03%。CRE筛查阳性的病种统计,血液系统恶性肿瘤(22.00%)高于实体肿瘤(17.74%),尤其以急性白血病筛查阳性率最高(27.63%),且血液系统肿瘤CRE血流感染率(2.01%)也明显高于实体肿瘤(0.00%)。主动筛查组患者CRE筛查阳性率高于单次筛查组(17.82%比4.76%,P<0.05)。结论血液系统恶性肿瘤患者肠道CRE定植率、血流感染率均高于实体肿瘤,主动肠道CRE筛查有助于提高筛查阳性率,早期进行干预治疗,改善患者预后。

习近平关于青年政治引领重要论述的理论来源、科学内涵及时代价值

近年来,习近平总书记就加强青年政治引领发表了一系列重要讲话。本文就习近平关于青年政治引领重要论述形成的历史条件、科学内涵和时代价值进行阐述。这一重要论述不仅丰富了马克思主义青年观,丰富了习近平关于青年工作的重要思想,也有利于巩固中国共产党执政基础,为实现中国梦贡献青年力量。

如何提高甘蔗的有效分蘖

甘蔗是否能有效分蘖是直接影响甘蔗产量的、当甘蔗幼苗长出约6～12片真叶时，蔗株基部侧芽萌发出，即为分蘖。分蘖期平均为35天-45天。如何在这分蘖期，提高甘蔗的有效分蘖，提高甘蔗产量，也是甘蔗生产管理技术的关键。一般情况下，在分蘖初期发生的低节位或第一次分蘖容易成为有效分蘖，较迟出生的第一次分蘖小易成为有效分蘖的可能性更小，因此，要提高甘蔗有效分蘖，应抓住以下技术要点：