小剂量干扰素α联合利巴韦林治疗肾移植术后继发丙型病毒性肝炎患者的疗效观察

目的观察小剂量干扰素α联合利巴韦林对肾移植术后继发丙型病毒性肝炎患者的疗效及安全性。方法采用小剂量干扰素α50μg每周1次皮下注射,同时口服利巴韦林600mg/d治疗5例肾移植术后继发丙型病毒性肝炎患者,并每月复查血常规、肝功能、肾功能和HCV-RNA。结果在治疗12周后,有4例出现血清ALT转为正常,HCV-RNA阴性(<100拷贝/ml)的早期应答,在治疗结束时这些患者出现完全应答,1例患者出现部分应答;治疗过程中,5例患者血肌酐均在正常范围内波动,并未见急性排斥反应;副反应主要为不同程度的白细胞、血红蛋白降低及低热、肌痛,但均未影响治疗。结论小剂量干扰素α联合利巴韦林治疗肾移植术后继发丙型病毒性肝炎具有较好的临床疗效,未诱发移植肾排斥反应,副反应较轻,值得临床进一步使用。

脐带血单个核细胞体外培养分化为肝细胞的实验观察

目的探讨脐带血单个核细胞在体外定向分化为肝细胞的条件及能力,为建立脐血干细胞移植治疗慢性肝衰竭提供实验依据。方法采集脐带血分离单个核细胞后,在实验组加入成纤维细胞生长因子(FGF)及促肝细胞生长因子(HGF)、或FGF加胎肝上清液培养,对照组只加FGF培养,观察细胞生长分化状况,免疫组化检测两组人甲胎蛋白(AFP)和白蛋白(Alb)。结果实验组可见类圆形及多边形细胞,呈类肝细胞形态,对照组大多为梭形细胞,未见多边形细胞;实验组细胞AFP、Alb免疫组化染色为阳性,对照组未见AFP,Alb阳性细胞。HGF的诱导分化效果优于胎肝上清液。结论脐带血单个细胞在HGF或胎肝上清液的诱导下可以定向分化为能分泌Alb及AFP的类肝细胞。

脐血有核细胞输注治疗慢性肝衰竭的初步临床观察

目的探讨人脐血有核细胞移植(HUCBNCT)治疗慢性重型肝炎肝衰竭的临床治疗效果,以及HUCBNCT对重型肝炎患者肝组织内胆管增生及肝卵圆细胞增生的影响。方法将90名慢性重型肝炎患者随机分为2组,分别予以同血型成人血浆(对照组)或HUCBNCT(治疗组)治疗,2组中分别有部分患者行肝穿刺病理检查及肝组织细胞角蛋白19(CK19)、CD34、白蛋白和甲胎蛋白(AFP)检测。结果HUCBNCT组患者肝细胞坏死较轻,肝组织CK19阳性率高于对照组;部分非典型胆管增生细胞同时表达CK19和白蛋白,在形态上和细胞表型上符合肝卵圆细胞特征。结论HUCBNCT对于慢性重型肝炎具有一定的疗效,在改善肝脏功能方面优于同血型成人血浆,其促进慢性重型肝炎患者肝组织内非典型胆管细胞增生及肝卵圆细胞增生可能是其作用机制之一。

脐血输注对慢性活动性肝炎病人血液系统及免疫功能的影响

自1988年10月Gluckman进行了全世界第一例脐带血于细胞移植治疗Fanconi贫血并获得成功以来,世界上已建立了数个脐带血库。Kohno报道胎血清具有促进肝细胞DNA合成的作用。经检索近10年的国内外文献,尚未发现脐血治疗肝炎的文献报道。笔者观察了脐血治疗慢性活动性肝炎的疗效及免疫学改变,并与成人新鲜血进行了比较,现将结果报道如下。

脐血输注合并血浆置换治疗慢性重型肝炎的疗效初探

目的 :探讨脐血输注 (UCBT)合并血浆置换 (PE)治疗重型病毒性肝炎的效果。方法 :将 117例慢性重肝病人分为 4组 ,分别应用成人鲜血或冰冻新鲜血浆 (对照组 ) ,UCBT ,PE和UCBT +PE治疗 ,观察病人治疗前后部分肝功能指标及免疫功能指标的变化。结果 :各治疗组病人降低血胆红素、升高白蛋白、凝血酶原活动度、活性T淋巴细胞、CD4细胞、白细胞介素 2及膜白细胞介素 2受体的效果均优于对照组 ,其中UCBT +PE组的效果又优于其它各组。结论 :UCBT合并PE治疗能提高重型肝炎的治疗效果。

应用Webquest改革传染病见习课教学

目的将Webquest引入传染病见习课教学,提高传染病见习课教学质量。方法对学生进行Webquest问卷调查；建立了多媒体示教室及传染病教学网站；由教师及学生共同建立Webquest模块；学生利用webquest学习传染病学。结果学生们通过Webquest对热点传染病的进展进行跟踪及综述分析,构建了传染病学电子书,制作了大量传染病教学课件,学生表演录制了标准化病人的传染病教学小品。提高了学生学习传染病课程的兴趣,改善了传染病见习课教学质量。结论Webquest教学方法可以在一定程度上解决传染病见习课病种单一、缺乏病种病源的问题,为提高传染病见习课教学质量开辟一条新的途径。

肝细胞生长因子在损伤肾组织中的作用

肝细胞生长因子(hepatocytegrowthfactor,HGF)是一种多效性生长因子,主要由间质细胞产生,通过自分泌和旁分泌方式作用于上皮细胞、内皮细胞以及间质细胞本身,具有促有丝分裂、促细胞形态形成和调节细胞活动的功能,从而对损伤的器官和组织进行修复。许多新的研究显示,在急性肾损伤时给予外源性HGF可以保护肾小管上皮细胞、重建肾小管结构和维持肾功能完整性。此外,HGF还能有效地抑制与慢性肾脏疾病及慢性肾功能衰竭密切相关的肾间质纤维化的进展过程。

唾液中人类疱疹病毒7型的分离与培养

目的 :了解人群中人类疱疹病毒 7型 (HHV- 7)的感染情况 ,并对 HHV- 7进行分离培养、鉴定。方法 :以聚合酶链反应 (PCR)检测唾液中的 HHV- 7,再以巢式 PCR及酶切加以鉴别 ;分离其中 2例标本中的病毒 ,以人脐带血单个核细胞 (HCBMC)进行培养 ,再通过 DNA序列测定来鉴定培养结果。结果 :检测12 0例唾液标本有 97例阳性 ,PCR阳性结果示 186 bp处有一荧光带 ,经 ECORI酶切后成为 12 6 bp和 6 0bp两条荧光带 ,巢式 PCR结果示 94bp处有一荧光带 ,HCBMC可用于 HHV - 7的传代培养。唾液中分离的 HHV - 7与培养结果所测得的病毒序列一致 ,与 Berneman分离测得的 JI株结果相似。结论 :人的唾液中HHV- 7检出率高 ,HHV- 7可在

脐血干细胞治疗重型肝炎的研究进展

干细胞是指能自我复制更新并产生特化细胞的未成熟细胞.在特定条件下,可以分化成不同的功能细胞,形成多种组织和器官.脐血干细胞替代胚胎干细胞、骨髓干细胞及外周血干细胞进行干细胞移植治疗血液系统肿瘤、心肌梗塞及肝脏功能衰竭等已成为近年来的研究热点,现结合我科的体会对脐血干细胞治疗重型肝炎的进展综述如下.

人胚胎原始生殖细胞移植治疗大鼠急性肝损伤

目的：胚胎原始生殖细胞能以原始胚胎状态无限增殖,并可通过异体移植或适宜的体外环境自然分化为胚胎生殖层。实验拟进一步观察体外培养的胚胎原始生殖细胞对急性肝损伤大鼠的治疗效果,及其能否在大鼠体内分化为肝细胞。方法：实验于2003-09/2005-05在中南大学肝病研究所完成。①细胞及动物：经中南大学湘雅二医院医学伦理委员会批准,取孕4～12周流产人胚胎,其双亲3代内无遗传性疾病,孕妇对流产胚胎用于实验均签署知情同意书。清洁级健康成年SD大鼠50只,随机数字表法分为5组：培养基对照组、单纯人胚原始生殖细胞组、人胚原始生殖细胞＋环磷酰胺组、单纯鼠胚原始生殖细胞组、鼠胚原始生殖细胞＋环磷酰胺组,10只/组。另选取健康成年SD孕鼠4只用于分离鼠胚原始生殖细胞。动物均由中南大学湘雅二医院动物实验中心提供,实验过程中对动物的处置符合动物伦理学标准。②实验方法：从人胚胎中分离出原始生殖嵴组织,悬浮培养获取人胚原始生殖细胞,用含15%胎牛血清的高糖DMEM基础培养基调节细胞浓度至1×10^8L^-1。取SD孕鼠胚胎分离生殖嵴,消化离心培养鼠胚原始生殖细胞,浓度1×10^8L^-1。各组大鼠均于腹腔内注射D-氨基半乳糖建立急性肝损伤模型,造模后48h,培养基对照组自尾静脉输注基础培养基,其余4组给予对应细胞悬液及免疫抑制剂环磷酰胺。③实验评估：从细胞形态、表面标记及体外分化等方面检测人胚原始生殖细胞的生物学特性;比较各组大鼠肝功能、增殖细胞核抗原阳性率、糖原染色阳性率、肝脏病理改变;检测各组大鼠肝脏病理切片中人白蛋白、甲胎蛋白的表达。结果：①人胚原始生殖细胞的生物学特性：培养1d后单个原始生殖细胞形成细胞集落,以后集落逐渐增大并隆起,形成鸟巢状,周边界限清晰,内部细胞排列紧密。传代后原始生殖细胞集落呈自发分化趋势,周边出现成纤维样细胞,最后分化为梭形细胞、多边形细胞等。原代至第3代未分化的人胚原始生殖细胞集落碱性磷酸酶染色均呈阳性,分化的细胞及成纤维细胞呈阴性。②肝功能检测：细胞输注前各组丙氨酸转氨酶、天冬氨酸转氨酶、总胆红素水平均基本相似（t=0.361～1.183,P均〉0.05）。输注后7d与培养基对照组比较,单纯鼠胚原始生殖细胞组、鼠胚原始生殖细胞＋环磷酰胺组上述3项指标水平均明显降低（t=2.532～8.361,P均〈0.05）;后两组间比较差异无显著性意义（t=0.340～1.712,P均〉0.05）。③增殖细胞核抗原阳性率：细胞输注后7d与培养基对照组比较,单纯鼠胚原始生殖细胞组、鼠胚原始生殖细胞＋环磷酰胺组的增殖细胞核抗原阳性率均明显升高（t=9.020～10.747,P均〈0.001）;后两组间比较差异无显著性意义（t=0.752,P=0.462）。④糖原染色：细胞输注后7d,培养基对照组着色相对浅淡,呈细颗粒状,;单纯鼠胚原始生殖细胞组、鼠胚原始生殖细胞＋环磷酰胺组着色相对深粗,呈斑块状聚集。⑤病理检测：细胞输注后7d,培养基对照组肝索、肝窦结构排列欠规则,坏死区可见少量肝细胞再生,汇管区有大量炎症细胞浸润;单纯鼠胚原始生殖细胞组、鼠胚原始生殖细胞＋环磷酰胺组各项病理情况均显著改善。⑥大鼠肝组织人白蛋白、甲胎蛋白的表达：细胞输注后14,21d,单纯人胚原始生殖细胞组、人胚原始生殖细胞＋环磷酰胺组表达人白蛋白及甲胎蛋白阳性细胞,培养基对照组未见表达。结论：①胚胎原始生殖细胞移植有利于激发急性肝损伤大鼠肝细胞的增殖,改善肝功能,加速受损肝细胞的病理修复。②胚胎原始生殖细胞可在受体肝脏组织中生存,并分化为具有合成白蛋白及甲胎蛋白功能的肝细胞样细胞。

血浆置换对重型肝炎心肌酶及脂质指标的影响

目的 探讨血浆置换 (TPE)对重型肝炎患者心肌酶学指标及脂质指标的影响 ,为重型肝炎合并心肌损害的患者更安全地进行TPE治疗提供帮助。方法 对 5 4名重型肝炎患者TPE前后及 5 0名对照患者的肌酸激酶(CK)、肌酸激酶同工酶 (CK MB)、α 羟丁酸脱氢酶 (α HBD)、总乳酸脱氢酶 (LDH)、乳酸脱氢酶同工酶 1(LDH1)、谷草转氨酶 (AST)、载脂蛋白A1(Apo A1)、载脂蛋白B(Apo B)、脂蛋白α(Lpα)、高密度脂蛋白胆固醇 (HDL C)、低密度脂蛋白胆固醇 (LDL C)、甘油三酯 (TG)、总胆固醇 (CHO)进行检测和比较。结果 重型肝炎患者TPE前CK、CK MB、α HBD、LDH、LDH1、AST均明显高于对照组 ,TPE后CK、CK MB、α HBD、LDH、AST较TPE前明显降低 ,LDH1虽有所降低 ,但不明显。TPE前Apo A1、Apo B、Lpα、HDL C、LDL C、TG、CHO均明显低于对照组 ,TPE后Apo A1、Lpα、HDL C、TG、CHO较TPE前明显升高。结论 重型肝炎患者有不同程度的心肌损害。TPE可改善患者的肝脏功能 ,同时也在一定程度上减轻了重型肝炎患者的心肌损害。TPE时必须严密监测患者的心功能及心电图。

黄芪对流行性出血热病毒感染的抑制作用

观察了黄芪注射液对流行性出血热病毒(EHF.V)的抑制作用。动物及传代细胞实验结果显示:黄芪注射液对小白鼠乳鼠体内EHF.V的感染过程具有一定的阻断作用;其机制可能主要是通过宿主的免疫调节而发挥作用。

艾滋病病人脑组织细胞凋亡及HIV核心蛋白p24的原位检测

为研究细胞凋亡与艾滋病两者之间的关系及探讨艾滋病的发病机理，采用细胞ＤＮＡ片段特异性标记法及免疫组织化学方法对艾滋病病人及对照组病人脑组织中的凋亡细胞及ＨＩＶ核心蛋白Ｐ２４（ＨＩＶ－Ｐ２４）进行原位检测。观察组２３例艾滋病病人，其中有８例合并艾滋病脑病，另１５例无脑病。８例（８／８）艾滋病脑病的脑组织标本及１３例（１３／１５）无脑病艾滋病脑组织标本中均可检出凋亡细胞及ＨＩＶ－Ｐ２４。对照组１９例非艾滋病病人，仅３例（３／１９）脑组织中可检出凋亡细胞。无脑病艾滋病病人的脑组织凋亡细胞阳性率（８６．７％）高于ＨＩＶ－Ｐ２４的阳性率（６０．０％），并且艾滋病人神经原细胞ＨＩＶ－Ｐ２４阳性率较低。实验结果揭示艾滋病脑病的发生与细胞凋亡具有一定的关系，ＨＩＶ可能通过某些中间环节而诱导神经组织发生细胞凋亡。

HBV标志物定量与病毒载量关系探讨

目的研究乙型肝炎病毒各血清标志物含量与HBV-DNA含量的关系。方法采用时间分辨免疫荧光分析法(TRIFA)和实时荧光定量聚合酶链反应(FQ-PCR)分别测定1486例乙肝患者血清中乙型肝炎病毒抗原抗体定量和病毒含量。结果不同HBV标志物阳性模式的HBsAg定量存在显著差异,相同模式的HBsAg定量也差异极大。HBeAg(+)模式的HBV-DNA显著高于HBeAb(+)模式及HBeAg(-)HBeAb(-)模式(P<0.01),而后两者间无显著差异(P>0·05)。HBsAg、HBeAg含量与HBV DNA正相关(r值分别为0.383、0.635,P=0.01),HBeAb含量与HBV DNA负相关(r=-0.563,P=0.01)。HBsAg定量与HBeAg定量正相关(r=0.466,P=0.01),与HBeAb定量负相关(r=-0·524,P=0·01)。结论HBV标志物定量之间及与HBV DNA含量间存在一定相关性,但个体差异极大。全面了解HBV标志物含量及HBV DNA定量可更准确判断病毒复制、状态,为临床决策提供可靠依据。

干扰素联合核苷(酸)类似物治疗慢性乙型肝炎的疗效观察

目的观察干扰素(IFN)与核苷(酸)类似物联合治疗慢性乙型肝炎的疗效。方法选择慢性乙型肝炎病例207例,分别予聚乙二醇干扰素(PEG-IFNα-2a或IFNα-2b)治疗52周,随访24周,其中146例(A组)初始24周联合核苷(酸)类似物治疗(59例联合拉米夫定,56例联合阿德福韦酯,31例联合恩替卡韦),另61例单用IFN治疗(B组)。结果 A、B组治疗结束时HBV DNA阴转率分别为86.3%(126/146)、65.6%(40/61);ALT复常率87.7%(128/146)、76.5%(39/61);HBeAg阴转率分别为69.3%(70/101)、40%(10/25);HBsAg阴转率分别为30.1%(44/146)、16.4%(10/61);抗-HBs阳转率分别为26.7%(39/146)、11.5%(7/61),差异均有统计学意义(P<0.05)。结论 IFN联合核苷(酸)类似物治疗慢性乙型肝炎的疗效优于单用IFN组。

CCl_4致SD大鼠急性肝损伤模型制作的改进(英文)

目的本文筛选CCl4致SD大鼠急性肝损伤模型的最佳给药浓度和剂量,追踪观察模型大鼠肝损伤后修复过程。方法本文采用随机对照分组的研究方法,对不同的SD大鼠模型组给予不同剂量的CCl4一次性腹腔注射。给药后48 h检测大鼠血清ALT, AST。各组随机处死一只SD大鼠,取肝组织制成病理切片镜下观察。追踪观察筛选后的CCl4模型大鼠肝组织病理变化恢复情况。结果本实验发现3A-7A组的ALT,AST较对照组明显升高(P<0.05或P<0.01),随着CCl4的剂量的增加,大鼠肝组织的病理损伤加重,6A和7A组可见自然死亡大鼠。结论本试验筛选了CCl4致SD大鼠急性肝损伤模型的较好CCl4的剂量。该模型肝损伤明显,死亡率低,对其他重要脏器影响小,可作为急性肝损伤研究的较好模型。

63例儿童肝豆状核变性临床诊治分析

目的探讨儿童肝豆状核变性(wilson disease,WD)的临床特点和治疗转归。方法对63例肝豆状核变性患儿的临床特征和血清铜蓝蛋白、血清铜、24h尿铜、青霉胺驱铜试验、角膜色素环(K-F环)、肝铜测定等铜代谢指标及治疗和预后进行分析。结果63例WD患儿中肝病型57例(90.5%),神经型5例(7.9%),其余1例(1.6%);肝病型中慢性肝炎占25例(43.9%),肝硬化23例(40.3%),暴发型9例(15.8%)。66.7%(40/60)的患儿K-F环阳性,96.8%(61/63)的患儿血清铜蓝蛋白降低;6例暴发型肝病患者血清铜及游离铜较其他明显升高,92.5%(49/53)的患儿24h尿铜>100μg,86.0%(37/43)的患儿驱铜试验阳性,20例行肝活检患者肝铜均>250μg/g干重。经驱铜及综合治疗后好转56例(88.9%),无明显变化3例(4.8%)及死亡4例(6.3%),其中5例为暴发型。结论儿童肝豆状核变性以肝型多见,K-F环、血清铜蓝蛋白、24h尿铜、驱铜试验可作为肝豆状核变性的诊断指标,血清铜及游离铜测定对判断暴发型有一定意义,肝铜测定是诊断肝豆状核变性的金标准;经驱铜及综合治疗后预后良好,暴发型死亡率高,预后差。

正常妊娠晚期母婴乙型肝炎表面抗体浓度相关性研究

目的 定量研究正常妊娠晚期母婴乙型肝炎表面抗体 (HBsAb)浓度相关性。方法 1 5 2例乙型肝炎表面抗原阴性产妇 ,分娩前 2 4h抽静脉血 ;其新生儿收集脐血。用酶联免疫吸附 (ELISA)法检测母血HBsAb ;用时间分辨免疫荧光分析 (TRF)法测HBsAb定性阳性的母血及其相应脐血的HBsAb浓度。结果 ELISA法检测母血HBsAb阳性率为 2 8.95 % (4 4 / 1 5 2 ) ;TRF法测母血HBsAb浓度 >1 0mU/mL者 4 1例 (>1 0mU/mL为阳性 ) ,与ELISA法相符率为 93.1 8% (4 1 / 4 4 ) ,测母血HBsAb阳性对应脐血的HBsAb浓度 >1 0mU/mL者 4 2例。 4 4例母血HBsAb阳性组中 ,其相应脐血有 6 8.1 8% (30 / 4 4 )HBsAb浓度高于母血。结论 正常妊娠晚期HBsAb可通过胎盘主动转运至胎儿体内 ,脐血中HBsAb浓度与母血呈显著正相关 。

不同剂量腺苷蛋氨酸治疗病毒性肝炎临床观察

目的观察二种不同剂量腺苷蛋氨酸(商品名:思美泰)治疗病毒性肝炎的临床疗效。方法 A组(38例)采用腺苷蛋氨酸(1 000 mg/d),B组(38例)应用腺苷蛋氨酸(2 000 mg/d)治疗,重症患者二组均辅以其他护肝及输注白蛋白、血浆、人工肝等支持对症治疗,观察其临床疗效及不良反应。结果不同剂量腺苷蛋氨酸在ALT、AST、TBil、DBil、TBA、ALP、GGT、PT等指标上均有所改善,大剂量组ALT、AST及TBil在降低百分率上与小剂量组比较,其差异有统计学意义(P<0.05)。二组患者均未见明显不良反应。结论大剂量腺苷蛋氨酸治疗病毒性肝炎比小剂量在黄疸的消退上更加有效,安全可靠,为治疗高胆红素血症的理想选择。