坦布苏病毒囊膜蛋白(E蛋白)的截短表达及其抗体间接ELISA方法的建立与应用

为了大量表达坦布苏病毒囊膜蛋白(E蛋白)并建立一种可检测坦布苏病毒抗体的间接ELISA方法,试验首先将去除跨膜域的截短坦布苏病毒E基因克隆至原核表达载体pET-28a(+)上并转化至大肠杆菌BL21(DE3)感受态细胞中,用IPTG诱导表达重组蛋白,利用His标签对表达的重组蛋白进行纯化;然后以重组蛋白为包被抗原、鸭待测血清为一抗、HRP标记兔抗鸭IgG为二抗,通过反应条件[抗原包被质量浓度、抗原包被条件、封闭液、封闭时间、一抗(待测血清样品)稀释液、一抗(待测血清样品)稀释度、一抗(待测血清样品)孵育条件、二抗稀释度、二抗孵育条件和显色条件]的优化和临界值的确定建立间接ELISA方法;最后进行特异性、敏感性和重复性试验,并通过临床样品检测比较该方法与Western-blot方法的符合性。结果表明:PCR扩增得到大小为1227 bp的坦布苏病毒截短E基因,经双酶切与测序验证后,成功构建重组表达质粒pET28a-E-tr。诱导后的重组蛋白分子量大小为49 ku并以包涵体的形式表达,纯化后的重组蛋白条带单一,可与鸭源坦布苏病毒阳性血清发生特异性结合。建立的ELISA方法优化后的抗原包被质量浓度为5μg/mL,抗原包被条件为4℃过夜,封闭液为2%BSA,封闭时间为60 min,一抗(待测血清样品)稀释液为1%BSA,一抗(待测血清样品)稀释度为1∶800,一抗(待测血清样品)孵育条件为37℃、30 min,二抗稀释度为1∶7500,二抗孵育条件为37℃、90 min,显色条件为37℃、10 min,阴阳临界值为0.368;仅可检测出鸭源坦布苏病毒阳性血清,无法检测出鸭源鸭疫里默氏杆菌、新城疫病毒、禽腺病毒、禽流感病毒、细小病毒阳性血清;待测血清最高稀释度为1∶3200(Western-blot方法待测血清最高稀释度仅为1∶1600);批次内重复变异系数(CV)为1.7%~4.7%,批次间重复CV为1.4%~5.7%;对137份临床鸭血清样品进行检测,阳性率为81.7%,与Western-blot方法比较样品阳性率较高,两种方法的符合率为87.6%。说明成功表达了坦布苏病毒截短E蛋白,并建立了一种特异性良好、敏感性较高、重复性较好的可检测坦布苏病毒抗体的间接ELISA方法。

ICU护士实施重症患者早期功能锻炼护理体验的质性研究

目的了解ICU护士为重症患者实施早期功能锻炼的护理体验,为促进ICU获得性衰弱的早期预防和治疗提供参考依据。方法采用目的抽样法,于2022年1月-4月在北京市某三级甲等医院综合ICU,对符合纳入标准的12名护士进行半结构深度访谈,采用Colaizzi现象学研究方法,对访谈资料进行分析。结果通过分析得出以下4个主题:①借力医护患有效沟通与配合;②缺少实施规范和管理制度;③面临实施困难和护理压力;④渴望专业团队和辅助设备。结论在推进重症患者早期功能锻炼的过程中,既要有效运用正向引导,也要加快管理规范和操作指引的构建,从改善人力资源和辅助设备配置等多个角度研究改进对策,有效提高重症患者ICU获得性衰弱的预防和治疗效果。

实训楼项目实施阶段标准化管理研究

高校基建项目管理难度大,其中的实训楼项目实施阶段标准化管理也复杂,协调部门多、内容多,如何在项目推进过程中实施全过程标准化管理?本文从高校实训楼项目建设的管理经历,得出需要做到制度完善、采购规范等,逐步扭转目前管理从粗放式到标准化管理的推进,使项目实施基本能达到既定目标。

肝移植术后患者体温监测分析及护理对策

目的了解肝移植患者术后3d内体温变化规律，分析体温变化的影响因素，总结肝移植术后有效的体温监测及护理措施，为制定规范的肝移植术后护理程序提供依据。方法采用多功能心电监护仪，记录147例肝移植术后转入ICU的患者术前、术后返ICU后即刻，及术后4、8、12、16、20、24、48、72h时间点的中心温度（肛温），并进行统计分析。结果肝移植患者术后3d内的总体体温变化有统计学差异（P〈0．01）。患者术后转入ICU时，体温降低明显（P〈0．01），66．67％的患者出现低体温。人ICU后4h总体体温迅速回升至术前水平，8h后体温较术前持续升高，以术后20h升高最为明显，直到术后24h体温开始回降；术后4～24h内，体温〉37．5℃的患者大幅增多（P〈0．01），至48h后体温基本降至术前水平。结论肝移植患者术后体温变化幅度大，体温异常者所占比率高。为避免异常体温对机体的不良影响，应加强肝移植患者术后体温监测，给予预见性护理，使肝移植患者体温管理规范化。

情感化设计在汽车造型设计中的应用研究

在汽车设计领域,情感化设计已经成为一个重要的概念。情感化设计不仅仅是关于外观的美感,更是一种能够激发用户情感共鸣的设计理念。本文将探讨情感化设计在汽车造型中的应用,并强调其在美学、用户体验和品牌识别方面的重要性。通过行业成功设计案例分析,本研究为汽车设计领域的专业人士提供一些实用的指导原则。

肝移植术后24h血糖监测分析及护理对策研究

目的了解肝移植患者术后24 h内血糖的变化规律,总结肝移植术后有效血糖监测及护理措施,为规范肝移植术后护理程序提供依据。方法采用罗氏血糖仪测量并记录147例肝移植术后转入ICU的患者术前、术后、返ICU后即刻,以及术后2 h4、h8、h、12 h、24 h等时间点的血糖及胰岛素用量,并进行统计分析。结果肝移植患者术后24 h内的血糖较术前明显升高(P=0.000)。其中以术后即刻、术后2 h、4 h的血糖值升高最为明显,且术后4 h胰岛素用量最大。结论肝移植患者术后24 h内血糖波动大,控制困难,应采用连续血糖监测的方法,尽快掌握血糖的变化规律,通过对胰岛素泵速的合理调整,达到平稳降糖的目的。

血液滤过置换在多发伤致多器官功能障碍综合征患者行血液滤过治疗中的应用

目的在对多发伤致多器官功能障碍综合征(MODS)患者进行床旁血液滤过的治疗中,探讨血液滤过置换基础液应用于临床的效果。方法选择2011年3月～2011年7月我院收治的多发性创伤致MODS行床旁血液滤过治疗患者23例,监测患者应用血液滤过置换基础液进行血滤治疗前后心率、平均动脉压、氧合指数,测定肌酐、尿素氮和电解质变化,观察血滤治疗前后急性生理学及慢性健康状况评分Ⅱ(A-PACHEⅡ评分)和MODS评分的变化,测量护士应用置换基础液进行置换液配方配制所需的时间。结果好转19例,死亡4例;23例平均APACHEⅡ评分和MODS评分均降低,血清尿素氮、肌酐、钾与治疗前比较显著降低(P<0.05)。治疗中未发现明显的不良反应,护士进行1袋置换液配制的时间由原来的8min缩短至1.5min。结论使用血液滤过置换基础液,治疗性能稳定,简化护理流程,可以降低人力、物力成本,提高临床护理质量。

肝移植术后血糖变化趋势分析及护理干预

[目的]了解肝移植病人术后24h内血糖的变化规律,总结肝移植术后有效血糖监测及护理干预。[方法]采用罗氏血糖仪,测量并记录147例肝移植术后转入ICU的病人术前、术后返ICU后即刻、术后2h、4h、8h、12h、24h等时间点的血糖及胰岛素用量,并进行统计分析。[结果]肝移植病人术后24h内的血糖较术前明显升高(P<0.05)。其中以入ICU即刻、术后2h、4h的血糖值升高最为明显,且术后4h胰岛素用量最大。[结论]肝移植病人术后连续血糖监测,尽快掌握血糖的变化规律,通过对胰岛素泵速的合理调整,达到平稳降糖的目的。

不同临床带教模式对提高ICU培训成效的研究

[目的]探讨不同带教模式对ICU培训成效的影响。[方法]选取接受重症监护培训4个月以上的护理人员61名,采用不同模式进行带教,分为实验组31名和对照组30名,实验组采用改进带教模式,对照组采用传统带教模式,培训结束时考试并征求意见。[结果]实验组临床适应时间较对照组明显缩短,培训结束时考试成绩优于对照组。[结论]先集中培训后"一对一"带教培训的临床带教模式能在提高ICU培训成效上达到较好的效果。

电子加温器对延长静脉输注甘露醇的血管使用时间研究

[目的]探讨电子加温器对延长输注甘露醇的静脉血管使用时间的影响。[方法]选择需要静脉输注甘露醇的病人双侧上肢血管进行自身对照,比较两组血管使用时间长短。[结果]观察组输注甘露醇的静脉血管使用时间明显长于对照组,病人主观不适感受和静脉炎发生率均显著低于对照组。[结论]应用电子加温器延长静脉输注甘露醇的血管使用时间是临床上简便易行的方法。

开颅术后持续手术腔冲洗患者的护理

目的 探讨开颅术后持续手术腔冲洗患者的护理要点。方法 对 3 7例开颅术后进行持续手术腔冲洗患者 ,重点加强对脑血肿、脑水肿征兆的观察 ,保持冲洗、引流系统通畅。结果 3 7例患者头颅CT示 ,手术腔内无血肿 ,脑室内无积水 ,顺利拔管。结论 细致周到的护理能有效预防并发症 ,对确保冲洗效果有重要作用。

肝移植病人手术前后血气分析及护理对策

[目的]了解肝移植病人术前和术后24h内血气分析变化规律,总结肝移植术后呼吸功能和酸碱平衡的监测及护理措施,为规范肝移植术后护理程序提供依据。[方法]采用GEM3000床旁血气分析仪为57例肝移植病人在术前、术后返回重症监护病房(ICU)后即刻及术后24h行血气分析检查。[结果]肝移植病人酸碱度(pH)、剩余碱(BE)和碳酸氢盐(HCO3-)变化趋势相同,术后返ICU即刻较术前降低,术后24h高于术前水平;氧分压(PaO2)在返ICU即刻异常增高(P<0.01),术后24h有所降低,但仍高于术前(P<0.01);术后二氧化碳分压(PaCO2)与术前比较差异无统计学意义,术后24hPaCO2较返ICU即刻升高明显(P<0.01)。[结论]肝移植病人术后24h内呼吸功能较差,发生代谢性酸中毒的危险性高,术后早期应采取有效的呼吸和酸碱平衡监护措施。

气热被在肝移植术后体温降低患者复温中的应用

目的探讨气热被在肝移植术后体温降低患者复温中的应用方法及效果。方法回顾并总结2002年10月至2008年7月,解放军总医院肝移植术后转入ICU时的即刻体温低于36℃的患者98例,给予使用气热被复温后临床资料。结果 98例使用气温被复温的患者中,术后4 h复温成功71例,术后8 h复温成功17例,术后8~24 h复温成功10例。结论肝移植术后患者体温异常发生率高,应用气热被能有效、快速地将肝移植术后患者体温升至正常范围,减轻长时间体温异常对机体造成的不良影响。

大刺鳅基因组中微卫星分布特征分析

【目的】通过查找和分析大刺鳅基因组中微卫星序列的分布规律及特征,为开展大刺鳅种质资源评估和分子标记辅助育种提供理论基础。【方法】基于大刺鳅基因组序列数据,采用MISA挖掘微卫星信息,利用生物信息学方法分析大刺鳅基因组中微卫星序列的分布规律及组成特征。【结果】从大刺鳅基因组中共筛选获得19020个微卫星,其中16025个为完全型微卫星;分布于2号染色体上的微卫星数目最多,24号染色体上的微卫星数目最少,分别占微卫星总数的10.26%和1.94%;单核苷酸为数目最多的微卫星,六核苷酸的最少。在完全型微卫星中,数目最多的前4种基元类型依次是A/T、AC/GT、G/C和AG/CT,分别占微卫星总数的37.82%、29.57%、6.88%和6.77%。微卫星基元重复次数的分布范围在5~104次,主要发生在重复5~6次和10~11次。微卫星长度区间为10~192 bp,主要分布在10~36 bp,占其总数的92.46%;微卫星数目最多的长度为12 bp,占其总数的15.22%。Pearson相关分析结果表明,大刺鳅微卫星长度与其数目呈极显著负相关(P<0.01)。GO功能注释分析结果发现,微卫星的基因主要富集到生物学过程、分子功能和细胞组分3个类群,富集最显著的条目为细胞核。【结论】利用基因组数据筛选大刺鳅基因组中微卫星可用性高且具有较高的多态性潜能,可为高效开发微卫星分子标记提供遗传学数据。

军事训练导致的致死性劳力性热射病病因学调查与分析

目的分析部队医院劳力性热射病(EHS)的发病原因以及EHS易感因素对其预后的影响。方法回顾性分析6所部队医院1995年9月-2007年8月共18例EHS住院患者的临床资料,并借鉴Minard制定的EHS易感因素(宿主因素、环境因素以及训练组织因素),对所有EHS病例进行评估。以最终治疗结果是否存活为标准,分为死亡病例组(F组)和存活病例组(S组),比较两组易感因素是否存在显著差异,以及两组易感因素的累积数量是否有统计学意义。结果18例EHS均发生在军事训练中,18例患者均合并多器官功能衰竭(MODS)。在EHS的易感因素中,体力不足、与体能不相适应的体力训练、对伤病员没有进行正确的医学分类、诊断不当以及治疗不当等5个因素在死亡病例组与存活病例组中具有显著性差异;死亡病例组中,易感因素的累积数量为10±1.41,显著高于存活病例组5.64±1.96(P<0.01)。结论军事训练应强调科学的训练方法,严格执行训练规程。同时还需普及相关人员的EHS防治知识,从自身预防EHS的发生。

危重患者急性胃肠损伤现状及影响因素的调查研究

目的了解危重患者急性胃肠的损伤状况,探讨其可能的影响因素。方法采用多中心前瞻性观察性研究方法,依据急性胃肠损伤(AGI)分级标准,统一设计调查表收集AGI状况和相关临床资料。调查对象为8家三级甲等医院监护室自2013年10月至2014年3月连续收入的危重患者。采用广义估计方程对AGI的相关因素进行筛选和检验。结果共有509例危重患者入选;发生AGIⅠ级占总数的54.18%,Ⅱ级以上的胃肠功能障碍占总数45.82%;在胃肠道症状中,排名第1位和第2位的是胃肠音减弱和胃肠音消失。多因素回归分析显示,影响AGI严重程度的危险因素有较长留驻ICU时间、通便措施、机械通气和休克,保护因素为肠内营养。结论危重患者AGI的发生率较高,在防治中应重点控制可加重胃肠损伤的危险因素,并重视肠内营养的开展。

重症颅脑损伤患者脑室引流术后亚低温治疗医院感染的调查

目的探讨重症颅脑损伤患者脑室引流术后亚低温治疗并发医院感染的相关因素,以便采取有效控制措施. 方法对1996年8月～2003年8月,住院＞3d的 216例脑室引流术后, 亚低温治疗的重症颅脑损伤进行医院感染相关因素分析. 结果重症颅脑损伤患者脑室引流术后, 亚低温治疗并发医院感染28例,感染发生率12.96%,多发生在住院14 d内,上呼吸道感染最高39.29%,其次为泌尿系统17.86%,病原学检查主要为条件致病菌;医院感染因素主要与侵袭性操作、抗菌药物应用、冬眠、意识状态、年龄、住院时间、营养情况等有关. 结论重症颅脑损伤患者脑室引流术后亚低温治疗医院感染发生率高,应充分重视医院感染影响因素,采取积极有效地预防措施,降低医院感染发生率,促进患者康复.

急性重度有机磷农药中毒行机械通气患者人工气道的护理

目的总结急性重度有机磷中毒（acute severe organophosphorus pesticide poisoning,ASOPP）行机械通气患者人工气道的护理措施。方法对2013年1月-2014年12月本科室收治的18例ASOPP行机械通气患者进行人工气道护理,包括预防拔管、气道湿化和吸痰、预防呼吸机相关性肺炎和拔管护理等。结果 18例ASOPP行机械通气患者中,16例机械通气时间2-15 d,中位数4.00 d,顺利撤机,痊愈后出院;2例因服用量过大,发生多脏器功能衰竭死亡。所有患者住院时间5-13 d,平均（6.50±2.42）d。结论根据ASOPP患者人工气道的特殊性进行护理,包括预防脱管、湿化气道和吸痰、预防人工气道感染和拔管护理等,能有效减少相关并发症的发生,促进患者早日康复。

军队重症监护专科护士培训模式的构建与实践

目的构建军队重症监护专科护士培训模式。方法通过临床调研、分析研究等方法构建了科学高效的ICU专科护士培训模式,主要包括培训目标、培训方式、培训内容及方法、考核要求等4部分。结果应用此培训模式举办了全军第一期ICU专科护士培训班,取得了很好的效果。结论为军队示范基地开展专科护士培训提供了借鉴,也为军队ICU专科护士的培养开辟了一条有效的途径。