清解化攻方调控NLRP3/TLR4/NF-κB信号通路对重症急性胰腺炎小鼠模型胰腺组织的保护作用

目的观察清解化攻方对重症急性胰腺炎(SAP)小鼠模型的治疗作用,探索清解化攻方抗炎症反应的作用机制。方法将36只C57BL/6J雄性小鼠随机分成空白组,模型组,清解化攻方低、中、高剂量组,西药组(乌司他丁),每组6只,除空白组小鼠,余各组小鼠采用逆行胰胆管注射5%牛黄胆酸钠建立SAP模型,清解化攻方低、中、高剂量组在造模后分别予以清解化攻方1、2、4 g/kg灌胃,西药组在造模后予以腹腔注射乌司他丁(5×10^(4) U/kg),共干预7 d。采用苏木素-伊红染色观察胰腺组织病理改变;酶联免疫吸附测定法(ELISA)检测小鼠α-淀粉酶、脂肪酶、IL-1β、IL-6、IL-8、IL-18和TNF-α水平;RTqPCR检测胰腺组织NOD样受体蛋白3(NLRP3)、Toll样受体4(TLR4)、核因子-κB(NF-κB)mRNA表达水平;免疫组化检测胰腺组织NLRP3、TLR4、NF-κB的阳性表达率;Western Blot技术检测NLRP3、TLR4、NF-κB、IL-1β、IL-6蛋白的表达水平。计量资料多组间比较采用方差分析,进一步两两比较采用LSD-t检验。结果与空白组相比,模型组小鼠胰腺组织结构弥漫性破坏、胰腺小叶间隔局灶性扩张、腺泡萎缩和大量炎症细胞浸润,α-淀粉酶、脂肪酶、IL-1β、IL-6、IL-8、IL-18和TNF-α含量明显升高(P值均<0.05),NLRP3、TLR4、NF-κB mRNA表达水平及阳性表达率均明显上升(P值均<0.05),NLRP3、TLR4、NF-κB、IL-1β、IL-6蛋白表达均明显上调(P值均<0.05)。与模型组相比,清解化攻方各剂量组和西药组可见小鼠胰腺组织结构稍紧密、完整,胰腺腺泡细胞排列有序,伴少量炎症细胞浸润和胰腺小叶出血灶,α-淀粉酶、脂肪酶、IL-1β、IL-6、IL-8、IL-18和TNF-α含量明显下降(P值均<0.05),NLRP3、TLR4、NF-κB mRNA表达水平及阳性表达率均明显降低(P值均<0.05),NLRP3、TLR4、NF-κB、IL-1β、IL-6蛋白表达水平均明显减弱(P值均<0.05)。结论清解化攻方可能通过抑制NLRP3/TLR4/NF-κB信号通路相关蛋白的激活,减少炎症介质的释放,防止炎症级联反应增强,进而对SAP小鼠胰腺组织发挥保护作用。

基于RIPK1/RIPK3/MLKL信号通路探讨清解化攻方对重症急性胰腺炎大鼠胰腺坏死性凋亡的影响

目的探讨清解化攻方调控RIPK1/RIPK3/MLKL信号通路对重症急性胰腺炎(severe acute pancreatitis,SAP)大鼠胰腺坏死性凋亡的治疗作用及机制。方法采用逆行胰胆管注射牛磺胆酸钠建立SAP大鼠模型,分别设置假手术组、模型组、不同剂量清解化攻方给药组和阳性对照组,不同剂量清解化攻方组予低中高剂量中药灌胃、阳性对照组予乌司他丁药物干预、假手术组和模型组予生理盐水灌胃;HE染色观察胰腺病理;ELISA检测大鼠血清α-淀粉酶、IL-1β、IL-6和TNF-α水平;免疫组化和Western blot检测大鼠胰腺组织RIPK1、RIPK3、MLKL蛋白表达;qRT-PCR检测大鼠胰腺组织RIPK1、RIPK3、MLKL mRNA转录水平。结果与假手术组比,模型组大鼠胰腺针叶细胞弥漫性坏死、小叶间隔水肿明显、炎性细胞浸润,α-淀粉酶、IL-1β、IL-6和TNF-α水平明显升高(P<0.01),RIPK1、RIPK3、MLKL蛋白及mRNA表达水平显著升高(P<0.01);与模型组比,清解化攻方各剂量组和阳性对照组明显改善胰腺组织病理学,减少胰腺组织坏死凋亡,降低α-淀粉酶、IL-1β、IL-6和TNF-α表达水平(P<0.01),降低RIPK1、RIPK3、MLKL蛋白及mRNA表达水平(P<0.01)。结论清解化攻方可能通过调控RIPK1/RIPK3/MLKL信号通路,改善胰腺组织坏死性凋亡,从而起到保护胰腺组织的作用,减缓疾病的进展。

清解化攻方对重症急性胰腺炎模型大鼠急性肺损伤的治疗作用及其机制

目的使用网络药理学探究清解化攻方对重症急性胰腺炎(severe acute pancreatitis,SAP)相关急性肺损伤(acute lung injury,ALI)的可能作用机制,并通过动物实验验证。方法检索TCMSP、BATMAN-TCM、ETCM、SwissTargetPrediction数据库获取清解化攻方中各药物入血有效成分的作用靶点,在GeneCard数据库中检索获得SAP-ALI疾病靶点,将药物靶点与疾病靶点取交集获得共同靶点,随后通过STRING数据库及Cytoscape3.7.1软件对共同靶点进行蛋白互作网络分析,借助DAVID数据库行GO、KEGG富集分析,最后动物实验对关键信号通路予以验证。结果共筛选出清解化攻方治疗SAP-ALI有效活性成分28种,作用于42个共同靶点。PPI网络分析显示,STAT3、IL-6、TGFB1可能是核心靶点;GO、KEGG富集分析主要涉及细胞增殖、PI3K/AKT信号通路等。动物实验证实,清解化攻方能够改善SAP-ALI大鼠模型的胰腺、肺组织的病理情况,下调血清中α-淀粉酶、脂肪酶、IL-1β、IL-6、TNF-α表达水平,下调肺组织中PI3K/AKT1信号通路相关蛋白及mRNA表达水平。结论清解化攻方可能通过多成分、多靶点,多通路协同治疗SAP-ALI,其机制可能与抑制PI3K/AKT信号通路活化有关。

基于RNA⁃Seq探讨清解化攻方干预重症急性胰腺炎大鼠肠屏障损伤的潜在作用机制

目的:采用高通量RNA⁃Seq探讨清解化攻方干预重症急性胰腺炎大鼠肠屏障损伤的潜在作用机制。方法:采用逆行胰胆管注射牛黄胆酸钠方法建立SAP模型,HE观察空白组、模型组、中药组大鼠胰腺和回肠组织病理改变情况,ELISA法检测大鼠血清血淀粉酶、脂肪酶、DAO、内毒素水平;RNA⁃seq测序检测各组大鼠回肠组织差异性表达基因,筛选清解化攻方干预重症急性胰腺炎大鼠肠屏障损伤的核心基因、生物学功能及信号通路。结果:与空白组比较,模型组大鼠胰腺和回肠组织均有明显的病理改变,经清解化攻方干预得到显著改善;ELISA结果提示清解化攻方能够显著改善SAP大鼠血清淀粉酶、脂肪酶、DAO、内毒素含量(P<0.05)。RNA⁃Seq结果显示SAP组与BG组差异基因有2623个,经QJHGD处理后表达明显下调的基因有175个,主要有Tnip3、Lpo等,而上调的基因有320个,主要有aicda、Tnn等,参与调节氧化应激等生物过程,并干预TJ、细胞凋亡、Toll样受体、NOD样受体、NF⁃κB等多条信号通路而发挥作用。结论:清解化攻方可能通过调节Tnip3、aicda等关键基因及调控TJ、细胞凋亡、Toll样受体等多条信号通路起到抑制重症急性胰腺炎肠屏障损伤作用。

雨蛙肽联合脂多糖诱导重度急性胰腺炎体外细胞模型钙通道的变化

目的应用雨蛙肽联合脂多糖诱导AR42J细胞构建重度急性胰腺炎体外细胞模型,研究该模型构建前后细胞内钙通道的变化。方法体外培养大鼠AR42J细胞,实验分组设对照组、雨蛙肽处理组、雨蛙肽+脂多糖处理组。采用RT-PCR检测细胞Cav1.3、Cav2.1、Cav2.2、Cav3.1、Cav3.2 mRNA表达;Western blotting检测细胞Cav1.3、Cav2.1、Cav3.1蛋白表达水平;以荧光探针Fluo-4-AM标记细胞内游离钙,激光共聚焦扫描显微镜观察[Ca2+]i的变化。结果药物处理组Cav1.3、Cav2.1、Cav3.1 mRNA及蛋白表达水平较对照组均明显增高(mRNA:F=23.392,46.85,61.338;蛋白:F=33.798,43.588,79.467;P<0.01),雨蛙肽+脂多糖处理组与雨蛙肽处理组相比较上述检测指标的mRNA表达量也显著增高(P<0.01);药物处理组与对照组Cav2.2、Cav3.2mRNA表达水平无明显差异(F=0.175、0.316;P>0.05);激光共聚焦显微镜观察结果显示药物处理组比对照组[Ca2+]i升高(F=638.984,P<0.01),雨蛙肽+脂多糖处理组较雨蛙肽处理组[Ca2+]i也显著升高(P<0.01)。结论胰腺腺泡细胞内钙超载在雨蛙肽联合脂多糖诱导的重度AP细胞模型发生发展的机制中具有重要作用。

二甲双胍对人胰腺癌细胞增殖与凋亡的影响

背景与目的:近年研究发现二甲双胍对多种肿瘤具有抑制作用,部分临床研究也发现二甲双胍可以降低糖尿病并发胰腺癌的风险和降低胰腺癌的死亡危险。本研究从细胞水平着手研究二甲双胍对胰腺癌细胞增殖和凋亡的影响,并初步探讨其可能机制。方法:体外培养人胰腺癌细胞株Bxpc-3,予二甲双胍进行干预作为二甲双胍干预组,无药物组作为对照组。以MTT检测二甲双胍对Bxpc-3细胞存活率的影响,流式细胞术检测二甲双胍对Bxpc-3细胞周期的影响,流式细胞术及Hoechst 33258荧光染色法检测细胞凋亡,RT-PCR检测AMPKα1、Bax、Bcl-2、Caspase-3、Cyclin D1 mRNA的表达。蛋白质印迹法(Western blot)检测Cyclin D1、Bax、Bcl-2、Caspase-3蛋白的表达。结果:与对照组相比,MTT检测结果显示,二甲双胍可以抑制人胰腺癌细胞株Bxpc-3的增殖,并呈时间-浓度依赖性(F=8.99、124和114.61,P<0.01);流式细胞术检测结果显示,二甲双胍干预组与对照组相比,G0/G1期细胞所占百分比增加(t=-8.71,P<0.01),S期(t=7.54,P<0.01)及G2/M期(t=7.00,P<0.01)细胞所占百分比减少;流式细胞术(早期凋亡率t=-2.68,晚期凋亡率t=1.29,总凋亡率t=-0.85)及Hoechst 33258荧光染色法(t=-0.46)结果显示,两组细胞凋亡率差异无统计学意义(P>0.05);RT-PCR结果显示,二甲双胍干预组Cyclin D1 mRNA表达明显降低(t=4.96,P<0.01),AMPKα1、Bax、Bcl-2、Caspase-3 mRNA表达与对照组相比,差异无统计学意义(t=1.68、-0.56、-1.80、0.67,P>0.05);Westernblot结果显示,二甲双胍干预组Cyclin D1蛋白表达明显降低(t=7.02,P<0.01),Bax、Bcl-2、Caspase-3蛋白表达与对照组相比,差异无统计学意义(t=-0.11、-0.20,0.11,P>0.05)。结论:二甲双胍能显著抑制人胰腺癌细胞株Bxpc-3的增殖,机制主要与其阻滞细胞周期、下调Cyclin D1表达有关;二甲双胍对Bxpc-3细胞的凋亡无明显诱导作用。

二甲双胍对人胰腺癌细胞迁移的抑制作用

目的:研究二甲双胍对胰腺癌细胞迁移的影响,并初步探讨可能机制.方法:体外培养人胰腺癌细胞株Bxpc-3,予二甲双胍进行干预作为实验组(M组),无药物组作为对照组(C组).MTT检测二甲双胍对Bxpc-3细胞存活率的影响,细胞划痕实验检测划痕愈合率,RT-PCR检测MMP-2、MMP-9 mRNA的表达,Elisa检测细胞培养上清液MMP-2、MMP-9蛋白的分泌量.结果:与对照组相比,MTT结果示二甲双胍可以抑制人胰腺癌细胞株Bxpc-3的增殖,并呈时间-浓度依赖性(F=8.991,124,114.61,P<0.01);划痕实验示二甲双胍干预组12、24、48h与对照组相比划痕愈合率显著下降(t=7.683,9.013,10.471,P<0.01);RT-PCR示二甲双胍干预组MMP-2、MMP-9mRNA的表达显著降低(t=16.563,28.494,P<0.01);Elisa示二甲双胍干预组MMP-2、MMP-9蛋白分泌明显下降(t=9.428,13.542,P<0.01).结论:二甲双胍能显著抑制人胰腺癌细胞株Bxpc-3的增殖及迁移,其主要机制可能与抑制MMP-2、MMP-9活性有关.

从“气血津液-络病-肺浊”探讨重症急性胰腺炎肺损伤的动态演变

急性肺损伤是重症急性胰腺炎最常出现的并发症之一,病死率较高,发病机制尚未完全明确。本文结合中医整体观、络病学说、中医时空学,基于“气血津液-络病-肺浊”理论,明确疾病病位及传变规律。该病以气机不畅为主,气血津液失衡为始动因素,气血津液失常导致络病,痰瘀毒是关键病理产物和致病因素,由络及脏,病理因素积聚肺脏形成肺浊。病理演变过程为早期气血津液输布异常,中期痰瘀毒胶结,由络及脏,晚期脏腑失司。治疗应调畅气机,调节气血津液运化输布,兼顾痰瘀毒,脏腑同调,注意病位、病性改变,为重症急性胰腺炎相关肺损伤提供辨证新思路。

狼疮性肾炎血、尿RANTES的变化

目的:检测狼疮性肾炎(LN)患者正常T细胞表达和分泌的活性调节蛋白(RANTES)在血清及尿液中的变化。方法:采用酶联免疫吸附法(ELISA法),对60例LN患者及20例健康人的血清及尿液RANTES的水平进行检测。结果:①LN患者血清RANTES水平较正常人升高,差异有统计学意义(P<0.01);②各病理类型LN患者血清RANTES水平亦较正常人升高(P<0.01);③根据标准曲线公式及所检测到尿液RANTES的吸光度值无法计算得出其水平值。结论:LN患者血清RANTES水平升高。尿液RANTES水平极低。

ghrelin与胰腺疾病的相关性研究进展

ghrelin是一种新发现的脑肠肽,广泛分布于全身多个系统,具有多种生物学功能。研究表明ghrelin在胰腺内、外分泌性疾病中均有异常表达,可能参与了胰腺疾病的发生发展。此文就ghrelin在胰腺疾病中的研究进展作一综述。

基于中、西医临床病证特点的胃癌动物模型分析

胃癌死亡率居全球第四,因此对于胃癌发病机制、发展、转移、治疗的研究尤为重要。基于胃癌的中、西医临床特点,本研究对现应用的动物模型进行总结分析,根据中、西医临床诊断特点分析动物模型的临床吻合度。对于模型的评价,西医方面重视病理学、细胞学,其他方面关注较少;中医方面则病证结合胃癌动物模型目前研究较少,主要采用的是“以药测证”的方式进行发病机制、药物研究。本研究在分析胃癌动物模型临床吻合度的同时,分析、总结各种模型的优缺点及应用范围,并提出存在的问题,使胃癌动物模型进一步完善,更加符合临床病证要求,为胃癌的中西医结合的基础研究提供可供参考的动物模型,更好地服务于中、西医的基础研究。

清解化攻汤对急性胰腺炎大鼠肠黏膜屏障和血清炎症因子的影响

目的:探讨清解化攻汤对急性胰腺炎(AP)大鼠肠黏膜屏障及血清炎症因子的干预作用。方法:24只SD大鼠随机分成假造模组、模型组、西药组及中药组,每组各6只,运用雨蛙素联合脂多糖腹腔注射建立大鼠AP模型,成模后按分组给予相应药物干预,观察回肠组织的病理改变情况;检测血清淀粉酶、肿瘤坏死因子-α(TNF-α)、白细胞介素-1β(IL-1β)、白细胞介素-10(IL-10)、D-乳酸及内毒素水平;Western blot检测回肠组织紧密连接蛋白Occludin的表达情况。结果:与假造模组比较,模型组回肠组织病理损伤明显,回肠黏膜绒毛略不规整或破损,肠上皮下间隙稍见增宽,与固有层分离增大,局部炎性细胞浸润增多,内皮下及固有层充血及出血明显增多,模型组血清淀粉酶、TNF-α、IL-1β、IL-10、D-乳酸及内毒素水平明显升高(P<0.01),回肠组织Occludin蛋白相对表达量明显下降;与模型组比较,西药组和中药组病理改变明显减轻,血清淀粉酶、TNF-α、IL-1β、D-乳酸及内毒素水平均明显下降(P<0.01),血清IL-10及回肠Occludin蛋白相对表达量均明显增高(P<0.01);与西药组比较,中药组血清淀粉酶、D-乳酸及内毒素水平降幅更明显(P<0.05)。结论:清解化攻汤对AP大鼠的肠黏膜屏障有一定的保护作用,而且该方可降低血清促炎细胞因子水平,提高抑炎细胞因子水平,对AP大鼠血清炎症因子有明显的调控作用。

ROS-NLRP3信号通路在急性胰腺炎大鼠中的作用机制研究

目的:探讨抑制ROS-NLRP3信号通路对急性胰腺炎大鼠的保护作用以及相关分子机制。方法:将36只雄性SD大鼠随机分为对照组(NC组)、轻症急性胰腺炎模型组(AP组)、轻症急性胰腺炎+N-乙酰半胱氨酸干预组(AP+NAC组)、假手术组(SO组)、重症急性胰腺炎模型组(SAP组),重症急性胰腺炎+N-乙酰半胱氨酸干预组(SAP+NAC组),每组6只。模型构造24 h后处死大鼠。苏木精-伊红(HE)染色观察大鼠胰腺组织病理改变并进行病理评分;二氢乙锭(DHE)荧光探针检测大鼠胰腺腺泡细胞ROS水平;WST-1法检测大鼠血清超氧化物歧化酶(SOD)水平;免疫组化法(IHC)检测大鼠胰腺组织核苷酸结合寡聚化结构域样受体蛋白3(NLRP3)蛋白表达;采用qPCR检测SO组、SAP组、SAP+NAC组肾脏组织中NLRP3 mRNA水平;采用ELISA检测血清中白细胞介素1β(IL-1β)和肿瘤坏死因子α(TNF-α)的水平。结果:与对照组比较,模型组胰腺组织病理学评分、ROS水平、NLRP3蛋白水平、肾脏组织NLRP3 mRNA水平、血清IL-1β和TNF-α含量明显升高(P<0.05),模型组SOD活性降低(P<0.05);与模型组相比,NAC干预组胰腺组织病理学评分、ROS水平、NLRP3蛋白水平、肾脏组织NLRP3的mRNA水平、血清IL-1β和TNF-α含量降低(P<0.05),SOD活性升高(P<0.05)。结论:抑制ROS-NLRP3信号通路可以减轻大鼠AP模型及SAP模型的胰腺损伤,降低SAP模型大鼠肾脏组织炎性水平。

TLR9在脂多糖诱导的急性胰腺炎体外细胞模型中的作用

目的:探讨Toll样受体9(Toll-like receptor 9,TLR9)在急性胰腺炎发病机制中的作用.方法:不同浓度脂多糖(lipopolysaccharide,L P S)(0、1、10、100 m g/L)刺激A R42J细胞后,RT-PCR法与Western blot法分别检测TLR9、核因子-κB(nuclear factor-κB,NF-κB)P65 mRNA和蛋白质表达的变化,并分析TLR9、P65的相关性;ELISA法检测培养上清液白介素-1β(interleukin-1β,IL-1β)、白介素-6(interleukin-6,IL-6)含量.结果:与空白对照组相比,LPS刺激后TLR9、P65 mR N A与蛋白质表达升高,呈浓度依赖性,各组间有显著性差异(mRNA:F=21.594,F=24.449;蛋白质:F=23.193,F=24.891,均P<0.01),相关性分析:r=0.942,r=0.900,均P=0.000,TLR9、P65呈正相关.上清液IL-1β、IL-6含量随LPS浓度增加而上升,组间差异有统计学意义(F=45.459,F=62.493,均P<0.01).结论:LPS刺激AR42J细胞诱导的炎症效应中,TLR9表达上调,可能通过激活NF-κB,从而促进炎症因子合成与分泌,参与急性胰腺炎发病机制.

基质金属蛋白酶7(MMP7)和硫酸乙酰肝素糖蛋白2(HSPG2)在胰腺癌中的表达及临床意义

目的探讨基质金属蛋白酶7(MMP7)和硫酸乙酰肝素糖蛋白2(HSPG2)在胰腺癌患者中的表达及临床意义。方法选取2018年1月—2020年12月广西医科大学附属肿瘤医院收治的胰腺癌患者30例,收集胰腺癌组织标本及其血清样本,同时收集癌旁正常组织以及30例健康志愿者血清样本作为对照。采用免疫组化方法检测胰腺癌组织及癌旁正常组织中MMP7和HSPG2蛋白表达;采用酶联免疫吸附法检测胰腺癌患者和健康对照者血清样本中MMP7和HSPG2的表达水平;收集患者临床资料并分析MMP7和HSPG2表达与临床病理特征、生存预后的关系。计量资料两组间比较采用成组t检验。计数资料组间比较采用χ^(2)检验或Fisher确切概率法。MMP7与HSPG2表达的关系采用Spearman相关分析。采用Kaplan-Meier法绘制生存曲线,生存情况比较采用Log-rank检验。结果免疫组化结果显示,胰腺癌组织中MMP7和HSPG2蛋白阳性表达均高于癌旁组织,差异均有统计学意义(χ^(2)值分别为31.093、35.623,P值<0.05)。胰腺癌患者血清中MMP7、HSPG2水平均显著高于健康对照组(t值分别为20.174、32.600,P值<0.05)。MMP7和HSPG2表达均与肿瘤直径、TNM分期有关(P值<0.05)。Spearman相关性分析显示,HSPG2与MMP7之间的表达呈正相关(r=0.539,P=0.002)。MMP7和HSPG2蛋白阳性表达患者总生存率明显低于阴性对照患者(χ^(2)值分别为4.084、12.554,P值均<0.05)。结论MMP7和HSPG2在胰腺癌组织和血清中呈阳性表达,且与肿瘤的直径、TNM分期有关,两者可能在胰腺癌的发生发展中存在某种关联,有望成为胰腺癌诊断和判断预后的潜在标志物。

基因芯片筛选ghrelin miRNA转染胰腺炎细胞模型后的差异表达基因

背景:前期研究提示ghrelin在急性胰腺炎发病过程中发挥重要作用,但其机制尚不明确。目的:应用基因芯片技术筛选出ghrelin miRNA转染胰腺炎胰腺腺泡细胞后的差异表达基因。方法:以雨蛙肽构建胰腺炎胰腺腺泡细胞模型。将AR42J细胞分为ghrelin miRNA+雨蛙肽组、阴性对照+雨蛙肽组。提取细胞RNA,合成为ds-DNA,与大鼠全基因组基因芯片杂交、扫描、分析。筛选与炎症和钙通路相关的差异表达基因,并采用RT-PCR法对其中3个基因(Bcl-2、caspase-8、caspase-12)进行验证。结果:给予AR42J细胞ghrelin miRNA+雨蛙肽干预后,共筛选出2938个差异表达基因,其中1435个基因表达上调,1503个基因表达下调。与CAMP/Ca^2+信号通路相关的差异表达基因有60个,与炎症通路相关的差异表达基因有199个。RT-PCR结果表明,ghrelin miRNA+雨蛙肽组Bcl-2、caspase-12表达下调,caspase-8表达上调,与基因芯片筛查结果一致。结论:基因芯片技术可筛选出ghrelin miRNA转染胰腺炎胰腺腺泡细胞过程中发挥关键作用的基因,从而为研究内源性ghrelin对胰腺炎胰腺腺泡细胞的作用机制提供依据和参考。

胃镜检查在下咽癌共病食管癌中的重要性评价及其临床特点分析

背景与目的:食管癌是常见的消化道恶性肿瘤,而当作为头颈部鳞癌中最常见的下咽癌与食管癌共病存在时预后很差,因此早期诊断对该病生存率的提高至关重要。探讨胃镜检查在下咽癌共病食管癌早期诊断中的重要性及其临床特点。方法:在2013年2月-2019年9月广西医科大学附属肿瘤医院收治的226例下咽癌患者中,回顾性分析40例进行了胃镜检查患者的临床资料及确诊为下咽癌共病食管癌患者的临床特点,比较分析进行或未进行胃镜检查下咽癌患者的生存率。结果:226例下咽癌患者中,有40例(17.7%)进行了胃镜检查,其中检出下咽癌共病食管癌36例(90.0%),其中同时性癌29例(80.6%),异时性癌7例(19.4%)。36例下咽癌共病食管癌患者中位年龄56.5(47.3~62.5)岁,男性32例(88.9%),有吸烟史25例(69.4%),有饮酒史24例(66.7%),下咽癌生长的主体部位在梨状窝区的23例(63.9%),呈结节样肿块型25例(69.4%),食管癌呈隆起型病变31例(86.1%),非隆起型病变5例,其中3例为食管鳞癌,2例为原位癌。156例未进行胃镜检查及32例进行胃镜检查的下咽癌患者生存曲线比较差异无统计学意义(P>0.05)。186例未进行胃镜检查及40例进行胃镜检查的下咽癌患者下咽癌病理学分化程度比较差异无统计学意义(P>0.05)。结论:胃镜检查在下咽癌共病食管癌的早期诊断中具有重要意义,建议对下咽癌患者常规开展胃镜检查并作为定期随访项目;中年、男性、吸烟、饮酒是下咽癌共病食管癌患者的重要临床特点。

超声内镜在结直肠及周围病变评估中的临床应用分析

背景超声内镜兼具内镜检查和超声扫描功能,由于肠道解剖结构较为复杂,在结直肠病变中对超声内镜的研究较少,通过探讨超声内镜检查在结直肠病变中的作用,可为临床工作提供一定的诊断价值.目的探讨超声内镜检查在结直肠及周围病变诊断中的临床应用价值.方法回顾性分析2018-09/2021-07,95例结直肠及周围病变患者的小探头和大探头超声内镜检查结果,并与术后病理对照.统计学方法采用kappa检验.结果与术后病理相比:(1)大探头超声内镜检查判断直肠癌浸润深度T分期的准确率为73.9%(17/23):T1期2/4,T2期4/6,T3期6/7,T4期5/5;判断评估区域淋巴结转移N分期的准确率为91.3%(21/23):N014/15,N17/8;一致性较好(kappa值为0.782,P<0.01);(2)小探头超声内镜在结直肠腺瘤或早癌内镜黏膜下剥离术(endoscopic submucosal dissection,ESD)术前评估中判断肿瘤浸润深度的准确率为87.1%(27/31),一致性一般(kappa值为0.665,P<0.01);(3)小探头超声内镜判断结直肠黏膜下隆起性病变起源和类型的准确率为95.5%(21/22),一致性高(kappa值为0.919,P<0.01).(4)超声内镜引导细针穿刺诊断直肠及其周围病变的准确率为70.0%(7/10),一致性一般(kappa值为0.565,P<0.01).结论根据结直肠及其周围病变具体部位、大小,选择性应用小探头或大探头超声内镜检查,对直肠癌TN分期、ESD术前评估、判断结直肠黏膜下隆起性病变特点及获取直肠及其周围病变组织标本具有重要价值.

基于TLR4/NF-κB/MyD88通路探讨清解化攻方抑制雨蛙素诱导重症急性胰腺炎模型大鼠炎症反应的生信分析及实验验证

目的基于TLR4/NF-κB/MyD88通路探讨清解化攻方抑制雨蛙素诱导重症急性胰腺炎(severe acute pancreatitis,SAP)模型大鼠炎症反应的网络药理学分析及实验验证。方法采用网络药理学方法收集清解化攻方有效成分群和潜在靶点,构建药物-成分-靶点网络图,作用靶点通过Metascape数据库GO和KEGG富集分析,筛选SAP炎症相关的靶向通路。采用雨蛙素联合脂多糖复制SAP大鼠模型,予清解化攻方灌胃;HE染色观察胰腺组织,酶联免疫吸附实验和免疫组化验证清解化攻方对SAP大鼠的抗炎作用及其对TLR4/NF-κB/MyD88靶点通路的调控作用。结果预测并筛选得到清解化攻方有效成分105种和124个SAP关键作用靶点;KEGG富集到包含Toll样受体经典通路与NF-κB通路在内的320条不同通路。动物实验验证清解化攻方可降低SAP大鼠血清淀粉酶、血清脂肪酶活性及IL-6、TNF-α水平;HE染色观察到清解化攻方对胰腺病理组织改变的影响,并抑制炎症转导通路TLR4、NF-κB、MyD88关键蛋白的阳性表达。结论清解化攻方改善重症急性胰腺炎大鼠胰腺损伤的作用机制之一,可能与通过下调TLR4/NF-κB/MyD88通路关键蛋白表达相关。